Um pesquisador deseja clonar a sequência codificante de um gene de 540 pb a jusante ( downstream) do promotor (200 pb) de um vetor, para subsequente expressão e purificação da proteína de interesse. Assim, o gene foi isolado como fragmento da ação da enzima de restrição SmaI (o sítio de econhecimento dessa enzima é CCC↓GGG / a seta indica sítio de clivagem) e clonado no sítio SmaI do vetor localizado imediatamente a jusante do promotor. A sequência do gene contém um único sítio para enzima de restrição EcoRI localizada 70 pb a jusante do códon iniciador. A representação esquemática do plasmídeo a seguir indica a localização dos sítios de reconhecimento de algumas enzimas de restrição no vetor e a posição de inserção do gene de interesse.

 O pesquisador avaliou as colônias obtidas no processo de clonagem por meio da digestão do material com as duas enzimas de restrição HindIII e EcoRI. Qual dos seguintes padrões de digestão com essas duas enzimas de restrição representa o clone com perfil desejado pelo pesquisador para os experimentos de superexpressão?

   a.   ~270 pb + ~470 pb + o restante da estrutura vetor.

   b.   ~740 pb + ~70 pb + o restante da estrutura vetor.

   c.   ~200 pb + o restante da estrutura vetor.

   d.   ~810 pb + o restante da estrutura vetor.

   e.   ~200 pb + 540 pb + o restante da estrutura vetor.