[Laboratório Virtual - RT-PCR] Segundo o sumário da aula prática, a transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR – reverse transcription polymerase chain reaction) é um método de biologia molecular utilizado desde o início da década de 1980. A partir de conhecimentos em virologia baseados em enzimas responsáveis pela replicação viral, os cientistas estudaram a atividade da enzima transcriptase reversa (RT – reverse transcriptase). Sobre os reagentes utilizados na reação de RT-PCR, analise as opções a seguir:I- Amostra de RNA e Transcriptase reversa.II- Primer F, primer R e OligoDT.III- Buffer e MgCl2.IV- dNTP, Taq DNA polimerase e indutor de RNAse.Assinale a alternativa CORRETA:
A alternativa correta é a II - Primer F, primer R e OligoDT. Esses reagentes são utilizados na reação de RT-PCR para amplificar o RNA em DNA complementar (cDNA) e permitir a detecção de sequências específicas de RNA. O primer F é um oligonucleotídeo que se liga à extremidade 5' do RNA, enquanto o primer R se liga à extremidade 3'. O oligoDT é um primer específico para poli(A), que se liga à cauda de poli(A) presente na maioria dos mRNA e permite a amplificação de todo o mRNA presente na amostra.
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