DISSERTATIVA

Para o processo de PCR convencional, utiliza-se a fita molde de DNA, os nucleotídeos ou dNTPs, os primers e a Taq DNA polimerase. Já para o processo de RT-PCR, utiliza-se a fita molde de mRNA, os nucleotídeos ou dNTPs, primers oligodT e enzima transcriptase reversa.

A técnica de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) é uma ferramenta importante na biologia molecular, permitindo a amplificação de sequências específicas de DNA. No entanto, antes de realizar a PCR, é necessário obter o DNA complementar (cDNA) a partir do RNA mensageiro (mRNA) por meio da reação de transcrição reversa (RT). A conversão do mRNA em cDNA é importante porque o mRNA é uma molécula instável e sensível a degradação, além de ser encontrado em quantidades muito baixas em células e tecidos. Por outro lado, o cDNA é mais estável e pode ser facilmente amplificado pela PCR, permitindo a detecção e quantificação de genes específicos. Além disso, a conversão do mRNA em cDNA permite a remoção de íntrons, regiões não codificantes do DNA, que não são necessárias para a análise de expressão gênica. Dessa forma, a técnica de RT-PCR permite a análise da expressão gênica em diferentes tipos de amostras biológicas, como células e tecidos, possibilitando a identificação de genes envolvidos em processos fisiológicos e patológicos. Em resumo, o estágio de conversão do mRNA em cDNA é fundamental para a realização da técnica de PCR, permitindo a amplificação de sequências específicas de DNA e a análise da expressão gênica em diferentes tipos de amostras biológicas.