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As endonucleases de restrição são enzimas que reconhecem uma sequência específica de nucleotídeos do DNA e o clivam em um ponto determinado. O empr...

As endonucleases de restrição são enzimas que reconhecem uma sequência específica de nucleotídeos do DNA e o clivam em um ponto determinado. O emprego dessas enzimas no diagnóstico de doenças infecciosas, neoplásicas e hereditárias vem crescendo dia a dia e está preconizado em alguns programas de saúde pública do Governo Federal. O esquema abaixo mostra a sequência de bases reconhecida pela enzima Dde I, seu ponto de corte (representado pela seta) e dois fragmentos de DNA a serem examinados.

CT ↓ NAG – sequência reconhecida pela DdeI (N= nucleotídeo qualquer)
Fragmento A= ...ACT CCT GAG GAG ... + Dde I
Fragmento S= ...ACT CCT GTG GAG ... + Dde I

Considerando a especificidade da enzima e os fragmentos em estudo e sabendo que o fragmento “A” é o normal e o fragmento “S” representa uma mutação, qual a representação do resultado da corrida eletroforética dos fragmentos resultantes da digestão do DNA de um indivíduo normal e de um doente, ambos homozigotos?


a) ( ) Normal = 1 banda; doente = 1 banda.
b) ( ) Normal = 1 banda; doente = 2 bandas.
c) (x) Normal = 2 bandas; doente = 1 banda.
d) ( ) Normal = 2 bandas; doente = 2 bandas.
e) ( ) Não é possível diferenciar a mutação nestes fragmentos.

Essa pergunta também está no material:

Genética: Cruzamentos e Conceitos
22 pág.

Respostas

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A resposta correta é a alternativa c) Normal = 2 bandas; doente = 1 banda. A enzima Dde I reconhece a sequência CTNAG e cliva o DNA no ponto indicado pela seta. O fragmento A é o normal e não possui a mutação, enquanto o fragmento S possui uma mutação que altera a sequência de nucleotídeos reconhecida pela enzima, resultando em um ponto de corte diferente. Quando o DNA dos indivíduos é digerido com a enzima Dde I, o fragmento A é clivado em dois fragmentos, resultando em duas bandas na eletroforese. Já o fragmento S é clivado em três fragmentos, resultando em três bandas na eletroforese. Portanto, um indivíduo normal apresentará duas bandas e um indivíduo doente apresentará apenas uma banda.

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