O primeiro passo para iniciarmos o desenho de primers é a obtenção da sequência que desejamos amplificar. A partir dessa sequência, podemos avaliar as outras variáveis que podem interferir em seu uso para técnicas, como o tamanho dos primers, o conteúdo G/C de repetições, a temperatura de melting (dissociação da dupla fita de DNA) e a temperatura de anelamento.
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