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Para responder corretamente, vou analisar cada etapa da técnica do ELISA descrita e comparar com as opções fornecidas: I- Adição do substrato: Esta etapa geralmente ocorre após a adição do conjugado e a incubação, para que a reação enzimática ocorra. II- Adição de conjugado, incubação e lavagem: O conjugado é adicionado antes do substrato para que se ligue aos anticorpos presentes na placa. III- Sensibilização e lavagem da placa: A sensibilização da placa ocorre antes da adição da amostra, para que os anticorpos se fixem à placa. IV- Adição da amostra, incubação e lavagem: A amostra é adicionada após a sensibilização da placa para que ocorra a ligação antígeno-anticorpo. V- Bloqueio e lavagem da placa: O bloqueio da placa geralmente ocorre após a adição da amostra, para evitar ligações não específicas. Analisando as etapas descritas e comparando com as opções fornecidas, a sequência correta é a seguinte: B) I - II - III - IV - V.
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