Para realizar a coloração de Gram, as etapas devem ser seguidas em uma ordem específica. Vamos analisar as etapas mencionadas: 1. Fixação do esfregaço - Esta é a primeira etapa, onde a amostra é fixada ao porta-lâmina. 2. Cristal violeta - Após a fixação, aplica-se o cristal violeta, que é o corante primário. 3. Solução de iodo - Em seguida, aplica-se a solução de iodo, que atua como mordente. 4. Álcool - Depois, utiliza-se o álcool para descolorir as bactérias, permitindo a diferenciação entre Gram positivas e Gram negativas. 5. Safranina - Por último, aplica-se a safranina, que cora as bactérias Gram negativas. Agora, organizando as etapas na ordem correta, temos: 1. Fixação do esfregaço (5) 2. Cristal violeta (3) 3. Solução de iodo (1) 4. Álcool (2) 5. Safranina (4) Portanto, a sequência correta é: 5, 3, 1, 2, 4. A alternativa que apresenta essa sequência é: B 5,3,1,4,2.