Para identificar a alternativa que NÃO possui relação com as etapas de construção de um organismo recombinante, vamos analisar cada uma das opções: A) Criação do cassete de expressão - Esta etapa é fundamental na construção de organismos recombinantes, pois envolve a montagem do DNA que será expresso. B) Regulação do gene - Embora a regulação do gene seja importante para o funcionamento do organismo, ela não é uma etapa direta na construção do organismo recombinante em si. C) Inserção do gene - Esta é uma etapa crucial na construção de um organismo recombinante, pois envolve a introdução do gene de interesse no vetor. Dessa forma, a alternativa que NÃO possui relação com as etapas de construção de um organismo recombinante é: B) Regulação do gene.