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Acerca das funções dos diferentes reagentes utilizados nos protocolos empregados para o isolamento de ácidos nucleicos, julgue os itens subsequentes, em verdadeiro (V) ou falso (F). Justifique as alternativas falsas:
a) O fenol empregado na purificação de ácidos nucleicos serve para promover a desnaturação desses ácidos, tornando-os insolúveis.

Testando o Conhecimento

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Questões sobre PCR e DNA

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Respostas

Ed

há 12 horas

Vamos analisar a afirmação: a) O fenol empregado na purificação de ácidos nucleicos serve para promover a desnaturação desses ácidos, tornando-os insolúveis. Essa afirmação é falsa (F). O fenol é utilizado na purificação de ácidos nucleicos, mas sua função principal não é desnaturar os ácidos nucleicos para torná-los insolúveis. Na verdade, o fenol ajuda a separar os ácidos nucleicos de proteínas e outros contaminantes, promovendo a extração dos ácidos nucleicos em uma fase aquosa, enquanto as proteínas e outros compostos permanecem na fase orgânica. Portanto, a resposta correta é que a afirmação é falsa (F).

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A técnica de PCR (reação em cadeia de polimerase), a mais utilizada para amplificação (clonagem) do DNA in vitro, revolucionou o acesso a informações genéticas.
Com relação a essa técnica, assinale a opção correta.
A Na PCR, os primers (iniciadores) se hibridam com moléculas de DNA fita dupla.
B Com a PCR, a enzima Taq polimerase é capaz de manter sua atividade mesmo nas altas temperaturas necessárias para desnaturar a molécula de DNA.
C A PCR também pode ser aplicada na análise de proteínas.
D Com a PCR, a clonagem molecular necessita de 48 a 72 horas para ser executada.
E A PCR necessita ser acompanhada de um método de purificação para separar o fragmento amplificado do restante do genoma.

Considerando os diversos aspectos da reação em cadeia da polimerase, julgue os itens que se seguem, em verdadeiro (V) ou falso (F). Justifique as alternativas falsas:
a) Cada ciclo da amplificação de DNA por PCR apresenta três etapas fundamentais, conhecidas como desnaturação, hibridização e alongamento.

f) A técnica da PCR promove a geração de grandes quantidades de um fragmento específico de DNA.

Enumere de 1 a 4 de acordo com a sequência das etapas de uma extração de DNA:
( 2 ) Separar o DNA dos outros componentes celulares.
( 1 ) Rompimento das membranas celulares liberando os ácidos nucléicos na solução.
( 4 ) Eluição do DNA.
( 3 ) Precipitação/Purificação do DNA para garantir a máxima pureza do material.

A reação em cadeia da polimerase (PCR) se tornou em pouco tempo uma das ferramentas mais utilizadas no estudo dos ácidos nucléicos.
Quais os componentes de uma reação típica de PCR?
a) Água, tampão, DNA polimerase, sonda de DNA e plasmídeos.
b) Água, tampão, sondas, DNA polimerase e DNA molde.
c) Água, tampão, DNTPs, primers, DNA polimerase, magnésio e DNA molde.
d) Enzimas de restrição, DNTPs, DNA polimerase, magnésio e sonda.
e) Nenhuma das alternativas está correta.

Qual o material genético que deve ser adicionado em uma reação de RT-PCR?
a) DNA;
b) RNA;
c) DNA e RNA;
d) DNA mitocondrial;
e) Nenhum dos anteriores.

A análise de DNA por eletroforese é uma das técnicas fundamentais nos laboratórios de pesquisa e de diagnóstico.
Qual das seguintes afirmacoes está CORRETA em relação a eletroforese de DNA?
a) O princípio da eletroforese é baseado no fato de a molécula de DNA possuir carga positiva em valores de pH neutro ou alcalino e, consequentemente, fragmentos de DNA migram no sentido do polo negativo (anodo).
b) O tamanho dos fragmentos de DNA é o principal fator que influencia a migração em gel de agarose: pequenos fragmentos de DNA migram mais lentamente no gel de agarose.
c) Para análise dos resultados da corrida em gel de agarose corado com brometo de etídio, este não precisa necessariamente ser visualizado usando um transiluminador de luz ultravioleta.
d) O gel de poliacrilamida é utilizado para separação de fragmentos grandes (>1kb) de DNA.
e) N.D.A.