O sequenciamento de DNA é o processo de determinação da sequência de nucleotídeos em um fragmento de DNA. No método de Sequenciamento de Sanger, o DNA alvo é copiado várias vezes, produzindo fragmentos de diferentes comprimentos. Os nucleotídeos fluorescentes terminadores de cadeia marcam os finais dos fragmentos e permitem que a sequência seja determinada.
PAVARINO, E.C.; CHICOTE, P.M.B.; BERTOLLO, E.M.G. Aplicações da Biologia Molecular em Genética de Populações. In: SILVA, A.M.; RIBEIRO-NETO, L.M. (Orgs.). Biologia molecular: métodos e interpretação. Rio de Janeiro: Roca, 2015.
Com base no excerto, avalie as afirmativas sobre o sequenciamento de Sanger:
I. Utilizado para regiões grandes do DNA com mais de 900 pares de base de comprimento.
II. O DNA alvo é separado em fitas simples que servem de molde para sintetizar as fitas complementares.
III. Cada uma das fitas complementares se encerra aleatoriamente com um tipo de nucleotídeo específico diferente.
IV. A série resultante de fragmentos de DNA é separada por eletroforese e analisada para revelar a sequência do DNA.
É correto o que se afirma em:
Alternativas
Alternativa 1:
I e IV, apenas.
Alternativa 2:
II e III, apenas.
Alternativa 3:
III e IV, apenas.
Alternativa 4:
I, II e III, apenas.
Alternativa 5:
II, III e IV, apenas.
Ed
ontem
Vamos analisar cada afirmativa sobre o sequenciamento de Sanger: I. Utilizado para regiões grandes do DNA com mais de 900 pares de base de comprimento. Falso. O sequenciamento de Sanger é eficiente para fragmentos de até cerca de 900 pares de base, mas não para regiões muito grandes. II. O DNA alvo é separado em fitas simples que servem de molde para sintetizar as fitas complementares. Verdadeiro. No método de Sanger, o DNA é desnaturado em fitas simples que servem de molde para a síntese das fitas complementares. III. Cada uma das fitas complementares se encerra aleatoriamente com um tipo de nucleotídeo específico diferente. Verdadeiro. A síntese é terminada aleatoriamente pela incorporação dos nucleotídeos terminadores (dideoxinucleotídeos) marcados, que interrompem a extensão da cadeia. IV. A série resultante de fragmentos de DNA é separada por eletroforese e analisada para revelar a sequência do DNA. Verdadeiro. Os fragmentos são separados por tamanho via eletroforese para determinar a sequência. Portanto, os itens verdadeiros são II, III e IV. A alternativa correta é: Alternativa 5: II, III e IV, apenas.