Esta pergunta tem relação com as bustancias que vão ser adecionadas no tudo de ensaio na primeira etapa do processo da PCR "desmaturação"
Varia um pouco em cada protocolo, mas há um padrão.
Veja quais os componetes usados em meu laboratório:
H20
Buffer (tampão)
MgCl2
dNTP's (desoxirribonucleotídeos)
Primer 1
Primer 2
Taq DNA Polimerase
Primeiro, o DNA é desnaturado (as duas cadeias das quais ele é formado são separadas). Este passo pode ser realizado de diferentes maneiras, sendo o aquecimento (94-95 ° C) da amostra o modo mais usual. A temperatura na qual é decidido realizar a desnaturação depende, por exemplo, da proporção de G + C que a cadeia possui, bem como do comprimento da mesma. Outros métodos, raramente utilizados na técnica de PCR, seriam a adição de sais ou agentes químicos capazes de realizar a desnaturação.
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