O km descreve a afinidade da enzima pelo substrato, determina o quanto a enzima "está afim" de um determinado substrato. Quanto menor for o km, maior será a afinidade. Por exemplo, o km do cérebro é menor, por uma questão evolutiva e de sobrevivência, para que, com a escassez de substratos, as enzimas "cheguem lá primeiro". Quanto mais substrato, maior será a velocidade da reação, até essa atingir uma velocidade máxima (platô). O km é a metade dessa velocidade máxima.
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