bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final;
Todas as bactérias Gram positiva ou Gram negativa absorve de maneira idêntica o cristal
violeta e o lugol, adquirindo a cor roxa devido ao complexo formado pelas duas
substâncias no citoplasma celular, mas quando tratadas com álcool apresentam
comportamentos diferentes. As bactérias Gram positivas não se deixam descorar pelo
álcool que mantém a cor roxa do complexo violeta lugol, já as bactérias Gram negativa, se
descoram e quando recebem a fucsina coram e apresentam a cor vermelha do corante. Ao
serem examinadas ao microscópio as células Gram positiva se apresentam de cor roxa
enquanto as células Gram negativas são vermelhas.
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