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1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE ANÁLISE DE ALIMENTOS ANÁLISE DE LIPÍDIOS ANÁLISE DE LIPÍDIOS O termo lipídio engloba um grupo diversificado de compostos, incluindo gorduras, óleos e ceras, além de vários outros compostos, como fosfolipídios, colesterol e lipoproteínas. As propriedades desses compostos incluem baixa solubilidade em água e solúvel na maioria dos solventes orgânicos não polares. Essas biomoléculas participam como componentes não proteicos das membranas biológicas, precursores de compostos essenciais, agentes emulsificantes, isolantes térmicos, vitaminas, fonte e transporte de combustível metabólico (CECCHI, 2003). Estão presentes nos alimentos e quando consumidos da maneira correta trazendo benefícios para saúde, transporte de vitaminas, síntese de hormônio, dentre outras. Para serem absorvidos pelo organismo, as gorduras são quebradas em unidades menores através da ação da enzima lipase. Como os lipídios são insolúveis em água, sua extração e subsequente separação requerem o uso de solventes orgânicos e técnicas raramente usadas na purificação de moléculas solúveis em água. Geralmente, as misturas contendo lipídios são separadas por diferenças de polaridade ou solubilidade em solventes não polares. Após a extração da mistura, o solvente é removido por destilação e o material obtido é analisado por gravimetria. No entanto, a mistura complexa de lipídios contém vários outros compostos, que nas condições da determinação, possam ser extraídos pelo solvente (NELSON et al., 2014). Estes compostos incluem os ácidos graxos livres, ésteres de ácidos graxos, as lecitinas, as ceras, os carotenoides, a clorofila e outros pigmentos, além dos esteróis, fosfatídeos, vitaminas A e D, óleos essenciais, entre outros. No entanto, esses elementos se apresentam em quantidades relativamente pequenas, que não chegam a representar uma diferença significativa na determinação. A extração eficiente de lipídios se torna uma tarefa difícil em produtos contendo grande quantidade de açúcares, proteínas e umidade (ARGANDOÑA et al., 2017). 2 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE ANÁLISE DE ALIMENTOS ANÁLISE DE LIPÍDIOS Os lipídios neutros do tipo, triacilgliceróis, ceras, pigmentos, são prontamente extraídos dos tecidos com éter etílico, clorofórmio ou benzeno, solventes que não permitem a agregação causada pelas interações hidrofóbicas. Os lipídios de membrana são mais bem extraídos por solventes orgânicos mais polares, como o etanol ou o metanol, que reduzem as interações hidrofóbicas entre as moléculas lipídicas enquanto também enfraquecem as ligações de hidrogênio e as interações eletrostáticas que ligam os lipídios de membrana às proteínas de membrana. Um extrator bastante utilizado é uma mistura de clorofórmio, metanol e água, inicialmente em proporções de volume (1:2:0,8) que são miscíveis, produzindo uma única fase. Depois que o tecido é homogeneizado nesse solvente para extrair todos os lipídios, mais água é adicionada ao extrato resultante, e a mistura separa-se em duas fases, metanol/água (fase de cima) e clorofórmio (fase de baixo). Os lipídios permanecem na camada com clorofórmio, e as moléculas mais polares, como as proteínas e os açúcares, repartem-se na camada de metanol/água (NELSON et al., 2014 e VOGEL, 1992). Figura 1 – Extração de Lipídeos F a s e o r g â n i c a : L i p í d i o s e c l o r o f ó r m i o F a s e a q u o s a : á g u a e m e t a n o l 3 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE ANÁLISE DE ALIMENTOS ANÁLISE DE LIPÍDIOS A fase orgânica, contendo clorofórmio e os lipídios é separada. O solvente é evaporado e os lipídios obtidos são pesados. Com o valor da massa dos lipídios obtidos da extração, é possível calcular o percentual desses compostos na amostra, pela seguinte fórmula: 𝐿𝑖𝑝í𝑑𝑖𝑜𝑠(%) = 𝑀ó𝑙𝑒𝑜 . 4 𝑀𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎 . 100 Com esse método, é possível extrair todas as classes de lipídios, inclusive os polares. Além disso, ele pode ser usado em produtos com alto teor de água, bem como em produtos secos, e pode ser totalmente medido em tubos de ensaio sem a necessidade de equipamentos especiais e complicados. Com isso, no laboratório virtual você irá executar procedimentos adequados para dimensionar o teor de lipídios a frio, pelo método Bligh - Dyer. Mamostra= massa da amostra (g); Móleo= massa dos lipídios (g) contidos em 5 mL. 4 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE ANÁLISE DE ALIMENTOS ANÁLISE DE LIPÍDIOS REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ARGANDOÑA, E. J. S.; Maldonade, I. R.; Breda, C. A.; Justi, P. N.; Alves, A. V.; Silva, T. G. Roteiro de aulas práticas da disciplina de análise de Alimentos. Dourados, MS: Ed. UFGD, 2017. 105p. CECCHI, H. M. Fundamentos teóricos e práticos em análise de alimentos. 2. ed. rev. Campinas: Editora da Unicamp, 2003. 208 p. NELSON, David L.; Cox, Michel M. Princípios de Bioquímica de Lehninger. 6ª Edição, 2014. Ed. Artmed. VOGEL, A. Química Analítica e Qualitativa. 1992. 5ª Ed. Editora Mestre Jou. São Paulo. 665p.