Estudo Dirigido_Fotocolorimetria

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO CENTRO DE BIOCIÊNCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOFÍSICA E RADIOBIOLOGIA
ESTUDO DIRIGIDO: FOTOCOLORIMETRIA
1. Defina fotocolorimetria e cite uma aplicação deste método.
	Método biofísico de análises, o qual é utilizado para determinação de concentrações de soluções, determinação do grau de pureza e identificação de substâncias.
2. Descreva a Lei de Lambert-Beer.
	Em soluções mais concentradas a intensidade de luz emergente é menor. Quanto maior for o percurso óptico menor será a intensidade de luz emergente.
3. Se aumentarmos o percurso óptico (d), o que acontece com o feixe de luz emergente (I)?
	O valor de I será reduzido.
4. O que diferencia a fotocolorimetria da espectrofotometria? Cite aplicações da espectrofotometria.
	O fotocolorimetro isola um comprimento de onda específico de luz usando filtros, para separar a luz, e o espectrofotometro permite a medição no espec ctro de todos s comprimentos de onda de luz vísiveis, visto que ele utiliza grades de difração, produzindo dados espectrais. A espectrofotometria pode ser usada em análise enzimática do viho e determinação da qualidade da água.
5. Cite os componentes do fotocolorímetro, descreva suas funções e cite as diferenças em relação ao espectrofotômetro.
O fotocolorímetro possui: uma fonte de luz, filtros, compartimento onde as cubetas contendo as soluções serão colocadas, fotocélula, miliamperímetro e sistema de medição da Intensidade de luz. A principal diferença é que o fotocolorimetro usa fontes de luz LED e filtro de cores e os espectrofotômetros usam fontes de luz que podem produzir variações no comprimento de onda.
6. Em qual princípio físico se baseia a grade (ou rede) de difração? Descreva este princípio.
Baseada no fenômeno da difração que consiste no desvio da trajetória retilínea da luz após contornar objetos ou passar por um orifício quando são interrompidas por eles.
7. Por que a grade de difração separa os diferentes comprimentos de onda ( λ) da luz branca?
Porque ao passar pela grade de difração ocorre a separação da luz vranca em suas cores componentes.
8. Quais são as definições matemáticas da Absorbância e da Transmitância e qual a equação matemática que relaciona estas duas grandezas?
	A absorbância é a proporção de luz que é absorvida por um determinado material (), transmitância é a medida da intesidade do feixe de luz incidente(I0) comparado com a intensidade da luz emergente (I) ( ). A equação que relaciona as duas grandezas é: .
9. Explique como é realizado e em que se baseia o procedimento de calibração do fotocolorímetro/espectrofotômentro?
Para realizar a calibração devemos colocar uma cubeta contendo o solvente que será utilizado dentro da gaveta do espectrofotômetro, após isso fechamos a gaveta e inserimos o comprimento de onda desejado. Depois, basta apertar o botão de calibração.
10. Por que é necessário recalibrar o equipamento, cada vez que mudamos o comprimento de onda da luz?
	Pois a cubeta e o solvente que será usado pode ter valores diferentes com a alteração do comprimento de onda.
11. Quais grandezas estão relacionadas na curva padrão?
Absorbância e concentração.
12. Na nossa prática, a construção do espectro de absorção teve qual objetivo? Cite outras aplicações baseadas no espectro de absorção.
O espectro de absorção serviu para encontrarmos o fotopico da solução. 
13. Teoricamente, quantas medidas/pontos seriam necessários para traçarmos a curva padrão? Explique porque, na prática, este procedimento não seria suficiente.
Na teoria seriam precisos dois pontos (um ponto de origem e outro que seria obtido pela medida) e uma medida. Porém, utilizando apenas 2 pontos, existe uma grande chance de obter uma reta com margem de erro maior.
14. Qual a utilidade do fator de calibração? E como ele é calculado?
O fator de calibração permite que não precisemos consultar o gráfico sempre que precisarmos obter novos valores. Podendo ser calculado pela seguinte fórmula: 
15. Qual a importância da utilização do fotopico na construção da curva padrão? Analise as consequências de utilizarmos um comprimento de onda diferente daquele do fotopico.
A utilização do fotopico resulta numa maior inclinação da reta. Portanto numa mesma faixa de valores de concentração teremos uma faixa maior de valores de absorbância, o que proporcionará maior sensibilidade ao método.