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Estud� d� Histologi� Conceitos: ● Tecidos Fundamentais: ○ Epitelial; ○ Conjuntivo; ○ Muscular; ○ Nervoso. ● Tecido = Célula + Matriz Extracelular; ● Matriz Extracelular: ○ Moléculas; ○ Apoio mecânico, transporte de nutrientes e interação. Técnica histológica: ● Preparação dos tecidos para exame: ○ Microscópico; ○ Espessura dos orgãos X feixe de luz; ○ Secções ou cortes (finos). ● Etapas de preparação das lâminas histológicas permanentes: 1. Obtenção do tecido: ○ Depende do material, da peça (mamífero vivo) e da técnica usada (deve ser precisa); 2. Fixação: ○ Preservação das estruturas teciduais pela suspensão dos processos metabólicos e degenerativos; ○ Aumenta a afinidade com o corante: ajuda na coloração; ○ Formol 10%; 3. Inclusão: ○ Bloco de parafina; ○ Confere a consistência necessária pro corte delgado; ○ Precedida por 3 etapas: ■ Desidratação: no etanol 70-100%; ■ Diafanização: clareamento; ■ Impregnação: parafina fundida penetra nos vasos, espaços intercelulares e no interior das células. 4. Microtomia: ○ Série de cortes da amostra; ○ Corte do tecido pelo micrótomo (1 a 10 micrômetros de espessura). 5. Coloração: ○ Corantes em solução aquosa; ○ Utiliza o contraste de cores e o índice de refração das estruturas para melhor visualização; ○ Coloração Ag: Impregnação por metais, ideal para estudar tecido nervoso; ○ Núcleo e citoplasma têm índices de refração muito parecidos (tem que colorir pela técnica dicrômica). Técnica dicrômica: ● Coloração HE; ● H (Hematoxilina): ○ azul ou violeta: básico; ○ colore estruturas ácidas; ○ DNA ácido desoxirribonucleico: núcleo. ● E (Eosina): ○ rosa: ácido; ○ colore estruturas básicas; ○ Proteínas citoplasmáticas: citoplasma. Artefatos: ● Distorções e perdas de componentes; ● Causas: ○ Retração; ○ Remoção imperfeita do fixador/corante; ○ Dobras e pregas; ○ Dentes na navalha; ○ Manipulação grosseira do tecido vivo; ○ Degeneração post-mortem: problema que ocorre durante a fixação. Técnica de microscopia: ● Microscópio óptico (MO): luz/fotônico; ● Partes integrantes: ○ Mecânica: ■ pé/base; ■ braço/coluna; ■ porta-objetivas (revólver); ■ platina (janela); ■ Charriot (pinças); ■ macro/micrométrico; ○ Óptica: ■ De iluminação: ● Lâmpada; ● Condensador; ● Diafragma; ● Filtro. ■ De aumento: ● Oculares; ● Objetivas. ● Imagem MO aumentada, virtual e invertida; ● Poder de resolução: menor distância entre duas estruturas que permite que elas sejam vistas como duas unidades separadas; ○ depende diretamente da lente objetiva. ● Obs.: menos luminosidade (menor feixe) dá pra ver melhor o tecido estriado;
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