AULA_MICROSCOPIA

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Conceitos gerais da microscopia de luz e seus componentes ópticos
Visualizando o MICRO???
Quando foi possível?
Para quê?
Origem da vida
Abiogênese x Biogênese
A vida poderia surgir a partir da matéria sem vida. A partir de um ‘princípio vital’ presente no ar.
René Descartes (1596 – 1650) e Isaac Newton (1643 – 1727) chegaram a defender essa teoria.
Os organismos podem surgir a partir de uma massa morta segundo um princípio ativo (por exemplo, nascer um rato da combinação de uma camisa suja e de um pouco de milho).
Abiogênese ou Geração espontânea
A vida surge de uma vida pré-existente por meio da reprodução.
O médico Francesco Redi (1626 – 1698) e o padre Lazzaro Spallanzani (1770) por meio de experimentos defendiam esta teoria.
Biogênese
Experimento de Francesco Redi
Experimento de Spallanzani
Pasteur derruba a Abiogênese
Cientista francês (séc XIX) principais fundadores da microbiologia – Pasteurização.
Todo ser vivo é formado por células.
A célula é a unidade estrutural e funcional, fundamental dos seres vivos. 
Existe uma grande variedade de formatos de células.
Fibroblasto
Espermatozoide
Célula hepática
Neurônio
Célula do rim
Hemácia
Célula muscular lisa
A História do Microscópio
Robert Hooke, foi o primeiro (em 1665) a observar células. Hooke observou cortes finos de cortiça, que se apresentavam ao microscópio com um aspecto similar a pequenos favos de mel empilhados. A cada um destes favos Hooke atribuiu a designação de cellulae (células).
A História do Microscópio
Anton van Leeuwenhoek começou a enviar cartas para a Royal Society da Inglaterra em 1673, com descrições das suas observações.  Analisou: placa bacteriana dos próprios dentes,
poça de água, saliva.
A “incrivelmente grande companhia de animálculos vivos … estava em tão grande número”, escreveu, “que toda a água … parecia estar viva.” 
“animálculos”
Método de Estudo das Células
As células são microscópicas
As células são estruturas muito pequenas e, por isso, não podem ser vistas sem o uso de um microscópio;
As estruturas intracelulares são ainda menores, e são necessários microscópios específicos, com poder de resolução maior..
Escala microscópica mostrando a relação real 
do tamanho das células e das partículas virais. 
O olho humano tem poder de resolução de 0,1 mm (100µm);
Microscopia Óptica
Foi o primeiro microscópio desenvolvido, que permitiu o conhecimento da célula a partir da sua visualização;
Também chamado de microscópio de luz, uma vez que esta é fundamental para a formação de uma imagem ampliada do objeto examinado;
Possui um conjunto de lentes que aumenta o objeto 1.000 a 1.500 vezes.
Em 1665, o cientista Hooke escreveu um livro com desenhos detalhados de suas descobertas microscópicas, denominado Micrographia.
Microscopia Óptica
Tecido sanguíneo
Mostrando dois monócitos no centro (em azul), hemácias (em vermelho) e fragmentos de plaquetas (pequenas pedaços azuis). 
Permite a observação de células e o estudo dos tecidos.
Muitos pesquisadores são loucos por microscópios. 
As células podem ser bem deslumbrantes, como vitrais vivos.
Diatomáceas
Ameba
Volvox
Protozoários
Raiz de um cabelo
Tecido nervoso
Microscopia Eletrônica
Diferente dos microscópios de luz, usa-se um feixe de elétrons;
Permite a observação de subestruturas celulares e até de macromoléculas, com poder de resolução muito maior;
Permite a visualização de estruturas com aumento de até 500.000 vezes, como a membrana plasmática e as organelas celulares.
Imagens de Microscopia Eletrônica
Atividade 1: Componentes de um microscópio
Base ou pé
Fonte de luz
Parafusos de foco
Braço ou haste
Condensador
Platina
Charriot
Objetivas
Revólver
Canhão
Ocular
Partes Mecânicas do Microscópio
Parte Ótica do Microscópio
Como manusear o microscópio
1. Selecionar a objetiva de menor aumento e baixar a platina completamente. Se o microscópio foi utilizado corretamente anteriormente, deve estar nesta posição.
2. Colocar a lâmina com o objeto a ser visualizado sobre a platina e travar com a pinça.
3. Começar a visualização com a objetiva de menor aumento.
4. Realização do enfoque.
a. Aproximar o máximo possível a lente do objeto a ser visualizado através do ajuste macrométrico. Esse deve ser feito sem olhar diretamente pela ocular, para evitar possíveis danos ao objeto ou a própria lente.
b. Olhando através da ocular, comece a aproximar a amostra da objetiva até que consiga ter uma visualização nítida, com o ajuste micrométrico realizar o enfoque fino.
5. Mude para objetiva seguinte. A imagem deve estar quase focada, se necessário gire o micrométrico para melhorar o enfoque fino. Se ao trocar de objetiva o objeto sumir completamente, é preferível voltar a objetiva anterior e refazer os passos do item 3. 
OBS: A objetiva de 40X enfoca muito próximo da amostra e com isso pode vir a causar acidentes: como contaminar a lente com a amostra em análise se negligenciado as precauções anteriores ou manchar a lente com o óleo de imersão se usar a objetiva de 100X.
No microscópio, o aumento obtido é resultado da multiplicação entre o aumento da objetiva e o da ocular. Por exemplo, se o aumento de uma objetiva for de 100x e o de uma ocular for de 10x, a ampliação total será de 1000x.
 O poder de resolução se refere à precisão da imagem focalizada (mais nítida ou menos nítida).
Poder de Aumento x Poder de Resolução
O MICROSCÓPIO ÓPTICO
Serve para ampliar um objeto.
Funciona com um conjunto de lentes (ocular e objetiva) que ampliam a imagem.
A Iluminação é natural ou artificial.
É constituído por uma parte mecânica que suporta e permite controlar uma parte óptica que amplia as imagens.
Oculares
Ampliam a imagem fornecida pelo sistema de objetivas (Aumento de 10x).
Canhão ou tubo
Serve de suporte ao sistema ocular
Braço
Serve de suporte à platina e ao revólver.
CHARRIOT
Sua função é permitir o movimento da lâmina sobre a platina.
Revólver
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Serve de suporte às objetivas e permite a sua mudança.
Objetivas
Amplia a imagem do objeto que está a ser observado.
Platina
Serve de suporte à preparação a observar.
Tem uma abertura na pane central (janela da platina).
Condensador
Distribui regularmente no campo da preparação a luz que atravessa o diafragma
Diafragma
Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparação.
Fonte de Luz
Parafusos Macrométrico e Micrométrico
Permite movimentos (de maior ou menor amplitude) de aproximação ou afastamento entre a preparação e as objetivas.
Base ou pé
Constitui a base de suporte de todos os elementos do microscópio.
Cuidados com o Microscópio
Transportá-lo com ambas as mãos, apoiando a base numa
delas e segurando o braço com a outra.
Ao colocá-lo sobre a mesa, mantê-lo a alguma distância do bordo.
Evitar molhá-lo ao usar preparações temporárias.
As lentes são peças muito caras. Para as limpar, deve usar a flanela que normalmente acompanha o aparelho.
Após a utilização, encaixar a objetiva de menor ampliação alinhada com a ocular.
1) Campo Claro: O feixe de luz passa através da amostra sendo captado pela objetiva. Aplicação: muito usado para o exame de rotina das lâminas histológicas, visualização de tecido células, microrganismos nos laboratórios de análise clínica e pesquisa.
Técnicas de Microscopia 
2) Campo Escuro: É utilizado um anel de campo escuro, esse disco bloqueia a luz que entraria diretamente para a objetiva, entrando apenas a luz refletida pela amostra. Como não existe luz de fundo direta, a amostra aparece iluminada contra um fundo preto, denominado "campo escuro“. Na prática clínica, serve para identificar bactérias como espiroquetas, Treponema pallidum e Leptospira.
1) O microscópio óptico é formado por diferentes partes e cada uma delas desempenha uma função específica. Nesse equipamento, o componente responsável por regulara intensidade da luz sobre a amostra analisada é
A) o revólver.
B) a lente ocular.
C) o diafragma.
D) o condensador.
E) a platina.
A imagem abaixo apresenta a estrutura básica de um microscópio óptico.
equipamento é um recurso importante nas aulas de biologia para visualização de estruturas microscópicas. Assim, é importante conhecer seus principais componentes para manusear o aparelho corretamente.
Que partes do microscópio estão indicadas pelos números 1, 2, 3 e 4, respectivamente?
A) Lente ocular, lente objetiva, fonte de luz e parafuso para ajuste de foco.
B) Lente objetiva, lente ocular, fonte de luz e interruptor.
C) Lente objetiva, lente ocular, condensador e parafuso para ajuste de foco.
D) Lente ocular, lente objetiva, fonte de luz e interruptor.
3) Qual é o aumento final de uma imagem, quando é observada por uma objetiva de 40x de um microscópio de luz cuja ocular possui a inscrição de 16x?
A) 400x
B) 640x
C) 1600x
D) 6400x
4) Um perito preparou uma lâmina de tecido de fígado corado com Hematoxilina-Eosina. Em seguida, o mesmo avaliou a lâmina com a objetiva de 40x na microscopia óptica (MO) para realizar análise do tecido.
Com relação a MO e a forma correta de sua utilização, marque a opção CORRETA.
A) Para locomover a lâmina para direita ou esquerda o perito utilizou o Charriot.
B) O aumento final utilizado pelo perito na MO foi de 40x.
C) A lâmina foi colocada na platina, presa com a presilha e para focalizar o tecido o perito utilizou a objetiva de 100x com o macrométrico.
D) Para analisar a lâmina foi utilizado óleo de imersão.
E) O parafuso macro e micrométrico é utilizado para abaixar e elevar a platina. O macrométrico permite uma melhor focalização e o micrométrico permite um ajuste “grosseiro” da imagem.
5) De acordo com o modelo, a parte mecânica do microscópio é muito variada na sua estrutura. Entretanto, a maioria dos modelos tem uma peça giratória do tubo que proporciona a fixação e troca de objetivas. Essa peça é denominada de:
A) canhão.
B) platina.
C) revólver.
D) coluna.