Diagnóstico e triagem pré-natais

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Maria Cecília Moscardini CMMG – 2º período 
Genética 
Diagnóstico e triagem pré-natais 
Aula 14 
Objetivos 
»Informar riscos de defeitos congênitos 
e doenças genéticas 
»Reduzir a ansiedade, principalmente 
em grupos de alto risco. 
»Planejar tratamentos, cuidados pós-
natais 
»Preparo psicológico da família. 
»Triagem → desconhece risco 
aumentado, oferecido para todas as 
grávidas 
»Diagnóstico → fetos com alto risco de 
condição genética, mais definitivo 
possível, sim/não 
Métodos de diagnóstico 
→Testes invasivos 
• Amniocentese 
• Amostragem de Vilosidade Coriônica 
(CVS) 
• Cordocentese 
• Diagnóstico Pré-Implantação 
→Testes não invasivos 
• Ultrassonografia 
• Teste pré-natal não invasivo (NIPT) 
Testes invasivos 
Amniocentese 
»Introduzir agulha saco amniótico e 
extrair líquido amniótico (em torno de 
20mL) 
»O líquido amniótico contém células de 
origem fetal que podem ser cultivadas 
para testes diagnósticos 
»Normalmente entre a 16-20 semana de 
gestação 
»Risco de 1:300 a 1:500 em indução de 
aborto 
»Complicações raras: perda de líquido 
amniótico, infecção e lesão no feto pela 
agulha 
»Além da 
análise dos 
cromossomos 
e do genoma 
fetal, a 
concentração 
de alfafetoproteína (AFP) pode ser 
testada no líquido amniótico para 
detectar defeitos do tubo neural (DTNs) 
»A AFP é uma glicoproteína fetal 
produzida principalmente no fígado, 
secretada na circulação fetal e 
excretada através dos rins no líquido 
amniótico 
Genética 
 
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»Espinha bífida aberta e fetos com 
anencefalia podem ser identificados 
Amostragem de Vilosidades 
Coriônicas (CVS) 
»Biópsia do tecido das vilosidades do 
córion por via transcervival ou 
transabdominal 
»Entre a 10 e 13 semana de gestação 
»Vantagem: resultados disponíveis em 
uma fase mais inicial da gestação 
»AFP não pode ser testada nesse 
estágio, mas pode ser dosada no soro 
materno. 
»Risco de 1:300 a 1:500 em indução de 
aborto 
Cordocentese 
»Entre 18 e 36 semanas 
»Coleta do 
sangue fetal a 
partir do 
cordão 
umbilical 
»O risco de 
perda fetal 
associada ao procedimento: 1 a 2 % 
»Varredura ultrassonográfica do 
abdome materno 
»Aspira-se de 2 a 5 ml de sangue fetal 
Diagnóstico pré-implantação 
(PGD) 
»Durante a fertilização in vitro (FIV) 
»Selecionar embriões livres de uma 
condição genética específica. 
»Casais com risco significativo de uma 
doença genética ou aneuploidia 
»Biópsia de blastômero único 
-Única célula 
removida do 
embrião em 3 dias 
após a FIV 
 
»Biópsia de blastocisto 
-Cinco células retiradas do 
trofoderma (não da massa 
celular interna) 
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-Óvulo fertilizado é cultivado por 5 a 6 
dias 
Testes não invasivos 
Ultrassonografia 
»Avaliação da 
idade fetal, 
gestações múltiplas 
e viabilidade fetal 
»Quando 
malformação é detectada ou suspeita, 
um estudo de ultrassom detalhado assim 
como o ecocardiograma fetal pode ser 
indicado. 
»Várias anomalias fetais detectáveis por 
ultrassom estão associadas a aneuploidia. 
»Determinação do sexo pode ser um 
importante prelúdio ou adjunto 
diagnóstico de algumas doenças 
recessivas ligadas ao X (hemofilia). 
 
 
 
 
Teste pré-natal não invasivo (NIPT) 
» NIPT à Non-Invasive Prenatal Testing 
»Utilizado para triagem e não para 
diagnóstico 
»A partir da 9 semana de gestação. 
»Trissomia do 21, trissomia do 18, 
trissomia do 13, aneuploidias sexuais, 
triploidia, microdeleção 22q11.2 
(Síndrome de Di George) e sexagem 
fetal (opcional). 
»Há também a opção do teste 
“AMPLIADO”: aneuploidias dos 
cromossomos 13, 18, 21, X e Y + teste de 
5 microdeleções: 22q11.2 (síndrome de 
DiGeorge), 1p36 (síndrome da Deleção 
1p36), 15q-mat (síndrome de Angelman), 
5p- (síndrome de Cri-du-chat) e 15q-pat 
(síndrome de Prader-Willi). 
»No sangue materno, haverá o DNA 
fetal (livre de células) e o DNA materno. 
O sangue materno é coletado e é 
processado, separando o plasma (DNA 
fetal + DNA materno) e as células 
brancas (somente o DNA materno). 
Essas duas partes são avaliadas 
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separadamente, entretanto no plasma 
não é possível diferenciar a DNA fetal 
do DNA materno, então ele é avaliado 
em conjunto. É avaliado regiões 
especificas do cromossomo, e 
posteriormente realizado o 
sequenciamento relacionado a esses 
cromossomos. Posteriormente, é 
“subtraído” a informação das células 
branca das informações obtidas no 
plasma, obtendo assim a informação do 
DNA fetal 
Triagens e estágios da gestação 
Triagem no primeiro 
trimestre 
»Ultrassom – translucência nucal (NT) 
»Entre a 11 e a 13 semana de gestação. 
→Analitos no soro materno: 
»Proteína A plasmática associada à 
gravidez (PAPP-A) 
-Está abaixo da faixa normal em todas 
as trissomias 
»Hormônio gonadotrofina coriônica 
humana (hCG) 
-Aumentada na trissomia do 21 
-Diminuída em outras trissomias 
 
 
 
 
 
Triagem no segundo 
trimestre 
»Dosagem de analitos no sangue 
materno: 
◦ hCG (aumentado na trissomia do 21 e 
diminuída nas outras) 
◦AFP (diminuído em todas as trissomias) 
◦Estriol não conjugado (diminuído em 
todas as trissomias) 
◦Inibina A (aumentado na trissomia do 21 
e não significativamente afetada nas 
outras) 
»Níveis desses analitos podem ser 
afetados por fatores como etnia, 
tabagismo, diabetes materno, FIV. Os 
laboratórios geralmente ajustam essas 
variações. 
 
 
 
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Estratégias de triagem 
integradas 
Citogenética no 
diagnóstico pré-natal 
»As indicações para o estudo do 
cariótipo no pré-natal são bem definidas, 
como: 
•Idade materna avançada 
•Alteração em exames séricos 
maternos 
•Alteração na ultrassonografia fetal 
•Presença de rearranjo cromossômico 
em um dos genitores 
•Gravidez prévia e/ou criança nascida 
com anomalia cromossômica 
»Amostras a serem consideradas: 
•Amostragem de vilosidades coriônicas 
•Liquido amniótico 
•Sangue fetal (Cordocentese) 
•Material de abortamento 
»A ferramenta escolhida pode ser FISH, 
cariótipo ou Microarranjo. O 
microarranjo está sendo considerado 
como melhor opção, pois nele é 
possível detectar variações no numero 
de cópias (exemplo: duplicação) 
Mosaicismo no diagnóstico 
pré-natal 
»Refere-se a presença de duas ou mais 
linhagens celulares em um indivíduo ou 
amostra de tecido. 
»Cautela na interpretação – devido a 
cultura de células realizadas 
»Contaminação com células maternas é 
uma possível explicação (mais 
frequente na coleta da vilosidade 
coriônica) 
»Mosaicismo verdadeiro – detectado 
em múltiplas colônias de várias culturas 
primárias diferentes 
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»Pseudo-mosaicismo – única cultura 
primária – difícil de ser interpretado 
»Restrito a uma única célula – não é 
levado em conta 
»Mosaicismo pode estar presente na 
placenta e ausente no feto (mosaicismo 
confinado a placenta) 
Mosaicismo confinado a placenta 
»Mosaicismo confinado a placenta 
(particularmente trissomia 7, 11, 14 ou 15) 
»Diploidia fetal pode ter surgido de 
resgate trissômico 
»Dissomia uniparental 
 
 
 
 
 
 
 
Aconselhamento genético 
»Histórico familiar acurado 
»Background étnico determinava 
necessidade de teste de portadores nos 
pais 
»Informar sobre o risco do feto ser 
afetado 
»A natureza e consequências prováveis 
do problema específico 
»Riscos e limitações dos procedimentos 
a serem realizados 
»A possível necessidade de repetir os 
procedimentos devido falhas 
»O tempo requerido para saber os 
resultados 
Interrupção da gravidez 
»No Brasil não é qualificado como crime 
quando ocorre naturalmente ou quando 
praticado por médico capacitado em 
três situações: 
(1) em caso de risco de vida para a 
mulher causado pela gravidez, 
(2) quando a gestação é resultante de 
um estupro 
(3) se o feto for anencefálico. 
»Na Islândia, a lei permite queo bebê 
seja abortado mesmo depois de 16 
semanas de gestação, em casos de 
deformidade do feto, o que, segundo a 
compreensão da lei islandesa, inclui a 
síndrome de Down. 
»Na Dinamarca, o aborto vitima 98% dos 
bebês diagnosticados com síndrome de 
Down. No Reino Unido, a porcentagem 
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chega a 90%. Na França são 77% e nos 
Estados Unidos 67%.