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EBOOK MEIOS DE CULTURA SUMÁRIO Introdução..............................................................................2 Objetivo ..................................................................................3 Classificação..........................................................................4 Meio Seletivo.......................................................................5-6 Meio Diferencial................................................................. 7-8 Meio de Enriquecimento................................................ 9-10 Meio de Transporte ....................................................... 11-13 AVISO DE DIREITOS AUTORAIS: Todo o material deste catálogo, sendo proíbida toda e qualquer forma de plágio, cópia, reprodução ou qualquer outra forma de uso. INTRODUÇÃO 2 Os meios de cultura são preparações nas quais, ao longo de suas formulações, contêm nutrientes necessários para proporcionar o crescimento de micro-organismos; �Os mesmos podem ser sólidos, líquidos ou semi-sólidos; �Em sua composição, há a necessidade em haver nutrientes considerados essenciais,e em concentrações relevantes, para que não ocorra uma situação inibitória de crescimento; �A esterilização deve ser realizada após a preparação de cada meio de cultura. O objetivo desta etapa é eliminar qualquer organismo vivo classificado como contaminante. �Após finalização da preparação, o meio de cultura deve ser mantido em local livre de contaminação,para que no momento de sua utilização,o mesmo esteja em perfeitas condições. OBJETIVO 3 O objetivo deste material é permitir ao usuário final a aquisição de conhecimento na definição, aplicação e características que envolvem meios de cultura. Além disso, explanar sobre algumas classificações com exemplos práticos, de maneira fácil de entender. Ressaltamos que todo o material explanado neste E-Book é relacionado aos modelos comercializados pela SPLABOR. BOA LEITURA! 4 Os meios de cultura são classificados em alguns tipos, que seguem abaixo: �Seletivo; �Diferencial; �Enriquecimento; �Transporte; Iremos abordá-los demaneira individual a seguir. CLASSIFICAÇÃO Os meios classificados como seletivos, são aqueles que suprimem o desenvolvimento (atodecrescimento) de determinados micro-organismos em benefício de outros. De uma maneira bem “básicaepopular”, eles “inibem o micro-organismo na qual o usuário não deseja, e deixa prevalecer somente o que o mesmo deseja focar”. Exemplo: Ágar Mac Conkey Esse ágar é considerado seletivo, pois pelo fato de conterem sua composição sais biliares e cristal de violeta, inibem as bactérias GRAM+, separando as que são GRAM-. OBS: Ele é considerado um meio diferencial também (expli- caremos na próxima página) pois permite saber se a bactéria em questão fermenta ou não a lactose. 5 CLASSIFICAÇÃO - SELETIVO Ágar Mac Conkey Exemplo: Ágar Mac Conkey Indicador de pH: �Em situações onde a bactéria fermenta lactose,o pH do meio torna-se ácido, obtendo coloração vermelha. �Quando não há fermentação da lactose, significa que o meio possui caráter básico, obtendo cor amarela. 6 CLASSIFICAÇÃO - SELETIVO E. coli S. aureus S. enteritidis Os meios classificados como diferencial, entre diversos grupos de micro-organismos baseando-se na capacidade de metabolização de componentes específicos do meio de cultura ou morfologia das colônias, permitem a distinção. Exemplo: Ágar Sangue O mesmo é considerado diferencial pois permite verificar se a bactéria ocasiona hemólise ou não. A hemólise é notada quando há presença de um halo ao redor da colônia. Há uma interpretação com respeito a hemólise também, ou seja: • β hemólise: hemólise total. • α hemólise: hemólise parcial. • γ hemólise: sem hemólise. OBS: Ele não é considerado um meio seletivo, pois permite o crescimento tanto de bactérias GRAM+ quanto GRAM-. 7 CLASSIFICAÇÃO - DIFERENCIAL Ágar Sangue 8 CLASSIFICAÇÃO - DIFERENCIAL Exemplo: Ágar Sangue S. pneumoniae(α) S. pyogenes(β) E. coli(γ) 9 Os meios de enriquecimento proporcionam nutrientes favoráveis ao crescimento de micro-organismos presentes geralmente sob baixos números ou de crescimento lento. Exemplo: Ágar Chocolate O mesmo possui sangue em sua composição. Durante a preparação, pelo fato do meio estar sob altas temperaturas, as hemácias presentes neste sangue são hemolisadas, exteriorizando todo o seu conteúdo, “enriquecendo” o meio, consequentemente. OBS: O ágar chocolate não é considerado diferencial, pois não há hemólise da hemácia pela bactéria. A hemácia já foi hemolisada quando o meio foi preparado. CLASSIFICAÇÃO - ENRIQUECIMENTO Ágar Chocolate 10 CLASSIFICAÇÃO - ENRIQUECIMENTO Exemplo: Ágar Chocolate N. gonorrhoeae S. aureusE. coli 11 São meios que mantêm as bactérias viáveis por mais tempo – quando não é possível a semeadura imediata do material. Exemplo: Cary Blair Princípo: O meio de Cary Blair foi formulado à partir do meio de Stuart, uma vez que micro-organismos patogênicos e outros coliformes fecais sobrevivem bem neste meio. A carência de uma fonte de nitrogênio impede consideravelmente a multiplicação de micro-organismos e a composição nutritiva garante a sobrevivência deles. O que difere este meio do meio de Stuart, é a adição de umasolução salina balanceada de tampão fosfato inorgânico e omitindo dafórmula o azul de metileno. Utilidade: Transporte de material fecal e consequente conservação dos micro-organismos. CLASSIFICAÇÃO - TRANSPORTE 12 Exemplo: Salina Tamponada Princípo: Meio líquido tamponado que mantém a bactéria viável. Utilidade: Meio de transporte de fezes. Exemplo: Meio Stuart Princípo: A carência de uma fonte de nitrogênio impede consideravelmente a multiplicação de micro-organismos e a composição nutritiva garante a sobrevivência deles. Utilidade: Transporte de diversos materiais e consequente conservação dos micro-organismos. Conservação de micro-organismos patogênicos como: Haemophilus spp., Pneumococcus, Salmonella spp., Shigella spp., entre outros. CLASSIFICAÇÃO - TRANSPORTE 13 Exemplo: Agar Nutriente Princípo: O Nutriente Ágar é um meio relativamente simples, de fácil preparação e barato, muito usado nos procedimentos do laboratório de Microbiologia. Utilidade: Nutriente ágar tem várias aplicações no laboratório de Microbiologia, e pode ser utilizado para análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras submetidas à exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras. O uso mais frequente é para conservação e manutenção de culturas em temperatura ambiente neste ágar, como método opcional para os laboratórios que não dispõem do método da crioconservação (congelamento das cepas em freezer à -70°C). Usado para observar esporulação de espécies de bacilos Gram positivos. CLASSIFICAÇÃO - TRANSPORTE Siga nossas redes sociais e fique ligado em todas as novidades! ou acesse www.splabor.com.br https://pt-br.facebook.com/splaborlaboratorios https://www.instagram.com/splabor/ http://www.splabor.com.br/blog/ http://www.youtube.com/SPLaborSite
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