Citologia - Métodos de Estudo e Visualização

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Citologia – Métodos de Estudo e Visualização
CONHECIMENTOS ESPECÍFICOS
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CITOLOGIA – MÉTODOS DE ESTUDO E VISUALIZAÇÃO
A aula abordará as técnicas utilizadas para visualizar as células.
CÉLULAS
• Século XVII (Robert Hooke): primeiro a utilizar a terminologia “célula”.
Ao observar plantas mortas utilizando um microscópio rudimentar, Hooke observou algu-
mas cavidades ou espaços vazios, “celas” (porque as células estavam mortas).
Com o tempo, a tecnologia foi se aprimorando e possibilitou visualizar estruturas que, à 
época do Hooke, não se viam.
À medida que os organismos eram observados, notou-se que todos tinham a mesma 
estrutura de células, constituindo a base para a teoria celular.
• Mundo Microscópico: tornou possível o que é impossível de se ver a olho nu.
• Teoria Celular: todos os seres vivos são formados por células.
Havia uma teoria de que as células só poderiam ser originadas a partir de outra célula 
pré-existente. Essa teoria, conhecida como Teoria da Biogênese, foi incluída à Teoria Celular. 
Na condição atual, as células só se originam a partir de outra pré-existente.
• Observou-se a existência de dois tipos básicos: Procariontes e Eucariontes
PROCARIONTES X EUCARIONTES
Fonte: Mycrobiology, 5ª Ed, PRESCOTT 
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CONHECIMENTOS ESPECÍFICOS
Ao se comparar as duas células, é possível verificar suas diferenças.
Há uma barreira que separa o ambiente externo do ambiente interno. A região interna foi 
chamada de citoplasma. A região que envolve a célula e a separa do meio externo foi cha-
mada de membrana, envoltório celular ou membrana plasmática.
Membrana + citoplasma = comum a todas as células.
Ao comparar com a célula de eucarioto, é possível ver diferenças muito marcantes. A 
principal diferença é a presença do núcleo. Nos procariotos, há uma região que pode ser 
confundir com o núcleo, mas não é. É o nucleoide, que é uma região com alta concentração 
de ácidos nucléicos (muito DNA).
Na célula eucariótica, destaca-se o núcleo e outras partes. A célula é mais complexa.
Obs.: É errado afirmar que um eucarioto é mais evoluído que um procarioto. O tempo de 
evolução de todos os organismos é igual. A diferença entre eles, na verdade, é o grau 
de complexidade.
Exemplos dos dois tipos:
Procariotos: bactérias e archaea
Eucariotos: todos os demais (têm núcleos em suas células).
MÉTODOS PARA ESTUDAR CÉLULAS
A microscopia óptica utiliza lentes que magnificam a imagem combinadas com a luz 
visível. O comprimento de onda da luz visível acaba sendo o limite de resolução dos micros-
cópios ópticos (limite teórico: 0,2 µm). Atende até a faixa dos micrômetros. 
O clássico microscópio óptico é o microscópio de campo claro: a luz fica embaixo da 
amostra. Há uma fonte de luz embaixo. As amostram ficam mais escuras em meio ao campo 
claro. Esse é o microscópio mais tradicional.
Já no microscópio de campo escuro, há inversão da imagem. As células ficam mais claras 
que o fundo. Pode ser muito útil com organismos luminescentes ou que refletem a luz.
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Microscópio de contraste de fase: muito útil ao se observar células que não são boas 
refletoras de luz. Usa-se a refração diferencial da luz.
Microscópio de Fluorescência: marcação fluorescentes de partes que se quer observar 
mediante a excitação das células
No século XX, conseguiu-se construir microscópios com resolução bem melhor dos que 
a dos ópticos. Surgiu então a Microscopia Eletrônica (limite teórico: 0,5 nm).
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Diferentemente dos microscópios ópticos que ficam limitados ao comprimento da onda, o 
microscópio eletrônico utiliza feixe de elétrons que são muito menores que um comprimento 
de onda. Houve uma revolução no conhecimento das células e as estruturas intracelulares.
Transmissão (MET): observe na figura a diferença entre a microscopia óptica e a eletrônica.
A resolução é muito maior.
Utilizando-se o feixe de elétrons, é possível ver dentro das células e também estrutu-
ras virais:
Fonte: Mycrobiology, 5ª Ed, PRESCOTT
Outro tipo: Varredura (MEV). Com o tipo Transmissão (MET), é possível ver dentro das 
estruturas. Já com o tipo Varredura (MEV), é possível observar superfícies e a maneira como 
as células interagem umas com as outras.
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Fonte: Mycrobiology, 5ª Ed, PRESCOTT
Três tipos de microscopias: 
Fonte: Bio, 1ª Ed.; LOPES, 2006
Nas imagens acima, pode-se ver um espermatozoide. Na primeira, observa-se por meio 
de microscópio óptico; na segunda, com um microscópio eletrônico de transmissão; e na 
última imagem, com um microscópio de varredura.
Comparação da escala:
Fonte: Bio, 1ª Ed.; LOPES, 2006
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Outras Técnicas de Microscopia
Microscopia Confocal de Varredura a Laser: imagens tridimensionais a partir de vários 
planos de leitura que o microscópio faz.
Fonte: Mycrobiology, 5ª Ed, PRESCOTT
Microscopia de Tunelamento: superfícies condutoras.
Microscopia de Força Atômica: superfícies não condutoras.
Observe a molécula de DNA abaixo. É possível ver a dupla hélice e a interação entre as 
moléculas. É possível, inclusive, observar a interação entre os átomos.
Fonte: Mycrobiology, 5ª Ed, PRESCOTT
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Outras Técnicas de Análise de Células
• Cromatografia em coluna: separação de substâncias da célula para análises individuais.
• Eletroforese em gel: separar as moléculas por tamanho.
• Centrifugação: separar elementos da célula.
• Citometria de fluxo: medir o tamanho individual de células.
Obs.: � Normalmente são utilizadas em conjunto. 
DIRETO DO CONCURSO
1. (COSEAC/UFF/BIÓLOGO/2019) A pequena dimensão das células e dos componentes 
da matriz extracelular (MEC) contida entre as células faz com que a histologia dependa 
do uso de microscópios. (Junqueira & Carneiro, 2013). A imagem a seguir mostra cro-
mossomos humanos visualizados ao microscópio eletrônico de varredura (MEV). Nesse 
tipo de microscópio:
a. a luz visível atravessa diretamente o espécime e, em seguida, um conjunto de lentes 
causam sua refração, ampliando a imagem.
b. um feixe de elétrons percorre a superfície do espécime, fornece topografia com um 
efeito 3-D.
c. uma fonte de luz de mercúrio e filtros especiais são usados para selecionar o compri-
mento de onda que será absorvido e refletido pelo espécime, corado com pigmento 
fluorescente.
d. um feixe de laser muito estreito é usado para focalizar o espécime, que é marcado com 
uma molécula fluorescente
e. o espécime é atravessado por um feixe de elétrons, que são transmitidos para um con-
junto de lentes (magnetos) e depois para um detector de elétrons para formar a imagem.
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CONHECIMENTOS ESPECÍFICOS
2. (CESPE/SEDUC-AL/PROFESSOR/2018)A respeito de microscopia, julgue o item 
que se segue.
1) O microscópio óptico, também chamado de microscópio de luz, possibilitou o des-
cobrimento de células e a elaboração da teoria de que todos os seres vivos são 
constituídos por células.
2) Embora o microscópio eletrônico de varredura apresente elevado grau de resolu-
ção, é recomendado que o exame de superfície das estruturas celulares seja reali-
zado com o microscópio de transmissão, que tem a vantagem de fornecer imagens 
tridimensionais.
3. (UECE/SEDUC-CE/PROFESSOR/2018) Relacione, corretamente, os microscópios ópti-
co e eletrônico, com suas respectivas características, numerando a Coluna II de acordo 
com a Coluna I.
Coluna I
1) Óptico
2) Eletrônico
Coluna II
( ) � Possui resolução de, aproximadamente, 0,2 µm.
( ) � Possui resolução de, aproximadamente, 0,2 nm.
( ) � Direciona os elétrons para uma tela fluorescente ou um filme fotográfico a fim de 
gerar uma imagem visível.
( ) � Usa lentes de vidro e luz visível para formar uma imagem ampliada do objeto.
 
GABARITO
1. b
2. 1) C
 2) E
3. 1, 2, 2, 1
���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula 
preparada e ministrada pelo professor Tiago Benoliel Rocha. 
A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo 
ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu-
siva deste material.