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UNIVERSIDADE DO OESTE DE SANTA CATARINA ÁREA DE CIÊNCIAS DA VIDA CIÊNCIAS BIOLÓGICAS BIOFÍSICA Resolva os exercícios propostos a seguir sobre centrifugação e poste a resolução na atividade TAREFA, no portal de ensino, até a data indicada na trilha. ATIVIDADE ASSINCRONA AULA 03 – TÉCNICAS DE SEPARAÇÃO 1) Com o tempo, muitas partículas ou células em uma suspensão líquida se assentarão no fundo de um recipiente por causa da gravidade. Explique de que forma o processo de centrifugação acelera esse processo: R:O processo de decantação, dependendo do tamanho das particulas a serem sedimentadas, quanto menores, mais tempo para o processo ocorrer. A centrifugação acelera o processo pois a força exercida nas partícula faz com as mesmas saiam do eixo de rotação. A rotação é tão intensa que o componente mais denso, embora muito pequeno e forçado de modo que se deposite no fundo do recipiente. 2) Quais são os componentes básicos de uma centrifuga e a função de cada um deles? Rotor: Dispositivo motor que possui como função alojar os tubos, podem ter ângulo fixo ou vertical. Eixo: O eixo de trasmissão é aquele onde o rotor é acoplado e se conecta ao motor. Motor: O motor é aquele que fornece a energia necessária para a rtação do rotor. 3) Cite o tipo de tubo de centrifuga mais adequado para cada uma das situações a seguir: A) O tubo deve ser autoclavável e resistir a ácidos e bases fortes, como HCl e NaOH: Polietileno, corex ou polialômero. B) O tubo deve ser de metal, não perfurável, autoclavável e resistente a solventes orgânicos como hexano e álcool. Aço Inoxidável. C) Autoclável a 121 oC, tolerante a DMSO (dimetil sulfóxido). Aço Inoxidável. 4) Descreva o princípio da centrifugação diferencial: Separação realizada em velocidades e tempos diferentes, aonde se possibilita a precipitação de partículas com tamanhos diferentes, formada de um gradiente simples. 5) Diferencie centrifugação por gradiente de escala zonal e isopícnica: A centrifugação por gradiente de escala zonal separa partículas de densidades similares, mas de massas diferentes. Enquanto que na centrifugação de densidade isopícnica as partículas a serem separadas possuem tamanhos similares, mas com densidade diferentes. 6) Dentre os tipos de centrifugação estudados, diferencial e por gradiente, qual o mais indicado para separação de linfócitos? Explique como ocorre essa separação: O método de separação por centrifugação mais adequado é por gradiente de densidade, utilizando uma separação de escala zonal. Esse método consite em uma separação por tamanho das partículas. A amostra deve ser colocada sobre um gradiente de sacarose, por exemplo, que ao sofrer a centrifugação vai separar a mistura em diferentes classes com base na massa das respectivas partículas. Os linfócitos possuem uma densidade igual entre si, mas diferem em tamanho, por isso é que se pode separá-los de outras pastículas que diferem em densidade em relação ao linfócitos, haja vista que os mesmos são aticorpos.
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