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Estudo Dirigido 1 Princípios de Bioenergética, Glicólise e Via das Pentoses Fosfato Bioquímica Metabolismo – Ciências Biológicas – 2° Semestre, 2017 1) Por que a falta de irrigação sanguínea leva à morte de células e tecidos? Que tipos de substâncias são transportadas pelas hemácias até as demais células de um organismo? Que tipos de compostos são transportados pelo plasma para estas células? A falta de irrigação sanguínea corta o suprimento de nutrientes e oxigênio às células e tecidos, o que faz com que estes parem de funcionar e morram. As hemácias são responsáveis pelo transporte de oxigênio, usado na oxidação completa dos compostos provenientes dos alimentos para obtenção de energia dentro da célula. Estes compostos são transportados pelo plasma sanguíneo e incluem glicose (principalmente), aminoácidos, ácidos graxos, etc. 2) Adicione ATP, O2, ADP e Pi (fosfato inorgânico, HPO4 2- ) ao esquema abaixo: 3) Observe as reações: Glicose + Pi ↔ Glicose-6-fosfato Keq < 1 ∆G0 > 0 Glicose + ATP ↔ Glicose-6-fosfato + ADP Keq > 1 ∆G0 < 0 a) Qual das duas reações acima parece mais conveniente para a fosforilação da glicose (obtenção celular de glicose-6-fosfato a partir de glicose)? Pelo fato da segunda reação poder acontecer mais espontaneamente (∆G0 negativo) e o produto ser favorecido (Keq maior que 1), a segunda reação é mais conveniente. b) Sabendo que ADP + Pi ↔ ATP + H2O tem um ∆G 0 de +7,3 kcal/mol, como os organismos podem sintetizar ATP? Através de uma série de reações diversas que levam à oxidação dos compostos provenientes dos alimentos. Assim, os organismos conseguem energia suficiente para fazer com que a reação acima (que é endergônica) aconteça. 4) A lactato desidrogenase é uma enzima dependente de NAD, que catalisa a oxidação reversível do lactato: As velocidades iniciais da reação são acompanhadas espectrofotometricamente a 340 nm, após a adição de lactato, NAD + , lactato desidrogenase e tampão a um sistema de reação in vitro. Quando a variação na absorbância a 340 nm é monitorada ao longo do tempo, qual dos dois gráficos abaixo representa os resultados? Justifique sua resposta. O segundo gráfico (debaixo) seria o gráfico mais correto, pois a absorbância a 340 nm apenas detecta a forma reduzida do NAD (NADH - veja slide 21 da Aula 1), que neste exemplo é o produto da reação. Após a adição de lactato, NAD + e lactato desidrogenase, haverá a formação de NADH (além de piruvato) cuja concentração aumenta com o tempo. 5) Em relação à via das pentoses fosfato, responda: a) Qual a sua localização celular e qual(is) a(s) coenzima(s) reduzida(s)? Localização: citoplasma. Coenzima reduzida: NADP+. b) Um dos produtos desta via, a ribose 5-fosfato, é utilizado para síntese de qual biomolécula? Nucleotídeos (ácidos nucléicos - DNA ou RNA). 6) Classifique os acontecimentos abaixo de acordo com o código: A = glicólise anaeróbica; e B = glicólise aeróbica. ( A ) Corrida dos 100 metros rasos ( B ) Futebol ( B ) Maratonas ( B ) Provas de ciclismo ( A ) Natação de 50 metros ( A ) Musculação 7) Em relação à glicólise, responda: a) Qual a localização celular da via glicolítica e quais os passos irreversíveis desta via? Localização: citoplasma. Passos irreversíveis: Glicose → Glicose-6-fosfato Frutose-6-fosfato → Frutose-1,6-bifosfato Fosfoenolpiruvato → Piruvato b) Quais as reações onde há fosforilação do metabólito?* Por que essa fosforilação é importante? Glicose → Glicose-6-fosfato (Passo 1) e Frutose-6-fosfato → Frutose-1,6-bifosfato (Passo 3) – estas duas reações fazem com que a glicose esteja comprometida na via glicolítica. O passo 1 garante que a glicose não saia da célula ou que ela não entre na síntese de glicogênio; o passo 2 garante que ela continue na glicólise e não entre em outras vias, como por exemplo, a via das pentose fosfato. * A pergunta pode ter ficado não muito clara, portanto aceitarei certas variações nas respostas, que incluem o passo 5 da via – Gliceraldeído 3-fostato → 1,3 Bisfosfoglicerato. c) Quantos carbonos têm a molécula de glicose, frutose-1,6-bifosfato e piruvato? 6C, 6C e 3C, respectivamente. d) Sabendo-se que a quantidade de NAD + celular é limitada (da ordem de 10 -5 M), estime a quantidade de glicose que pode ser convertida a piruvato. 0.5 x 10 -5 M. e) Qual então seria a quantidade de ATP produzida em anaerobiose? 10 -5 M. 8) A conversão do piruvato a lactato ou do piruvato a etanol tem um papel importantíssimo para a manutenção do metabolismo celular. Qual é este papel? A regeneração do NAD+. Sem NAD+, a glicólise pára.
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