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Roteiros Histologia Manual de Estágio Para um bom diagnóstico histológico, é necessário que você siga corretamente as indicações dos itens a seguir: 1. Observe se o microscópio está em perfeito funcionamento: lentes oculares e objetivas bem atarraxadas e limpas; Charriot com as pinças sobre a platina movimentando- se normalmente. 2. Observe a lâmina contra a luz e examine o corte a olho nu. 3. Coloque a lâmina na platina, prendendo-a com as pinças e, movimentando o Charriot, centralize a preparação na “janela” da platina. 4. Encaixe a objetiva de pequeno aumento, girando o revólver; acenda a lâmpada e tente focalizar para o seu olho, não conseguindo, peça ajuda. 5. Passeie por toda a estrutura corada, movimentando o Charriot, para ter uma visão panorâmica do corte. Você é capaz de identificar a coloração empregada pelo aspecto tintorial dos núcleos e da substância intercelular? Detenha-se em algum campo específico e encaixe a objetiva de médio aumento. De quanto foi o aumento anterior com a objetiva de pequeno aumento e agora com a de médio aumento? Faça os cálculos. 6. Tente interpretar a lâmina. Lembre-se de que você está diante de um único plano de corte e que as estruturas como vasos e ductos têm distribuição tridimensional nos tecidos e órgãos. Os cortes transversais apresentam-se com uma luz central. Tente compreender outros tipos de corte dessas estruturas. Tente visualizar em três planos as estruturas observadas. 7. Utilize outra objetiva e vá aprofundando seu estudo. Observe as dimensões das estruturas com cada objetiva empregada. 8. Não desanime da primeira vez. Repita as operações até que possa dominar o microscópio. Antes de devolver a lâmina ao suporte, certifique-se de que reconheceu as estruturas pela coloração e pela morfologia que apresentam. Faça os seus questionamentos, discuta com o colega vizinho e, só após, chame o professor para esclarecimentos. Dica: Ao observar uma lâmina ao microscópio óptico, certifique-se de que reconheceu algumas estruturas com segurança. Desta forma, ficará mais fácil o reconhecimento destas nas próximas observações. Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Cortes Histológicos AULA 1 ROTEIRO 1 OBJETIVO Visualizar os diferentes tipos de cortes e observar a diferença de visualização nos diferentes formatos de corte. PROCEDIMENTO Faça cortes dos tipos: transversais, oblíquos, longitudinais medianos e excêntricos e ainda tangenciais. Nos pecíolos de mamonas, faça cortes em diferentes níveis. O objetivo desses cortes é permitir uma interpretação tridimensional a partir de fatias com duas dimensões (a espessura é desprezível). O importante, é que, trabalhando com estes pecíolos macroscópicos, você pode confrontar o seu exercício mental com a realidade desses cortes (por exemplo, cortes de artérias, veias, ductos de glândulas exócrinas, entre outros órgãos). Em relação aos demais materiais (limão, ovo cozido, abacate, faça os cortes indicados, coloque-os uns ao lado dos outros e faça uma boa observação e comparação. Após o corte e as análises, realize uma comparação entre eles e diga como isso pode influenciar na visualização das lâminas. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Coloração de Hematoxilina e eosina AULA 1 ROTEIRO 2 OBJETIVO Visualização de lâminas contendo a coloração de rotina utilizada na histologia com os corantes denominados de hematoxilina e eosina (H/E) para verificação de núcleo e citoplasma da célula. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina Pele grossa Na lâmina de pele grossa observamos a coloração de hematoxilina e eosina. A hematoxilina é um corante básico que cora estruturas ácidas tendo como princípio a acidofilia. O núcleo que contém o DNA e RNA se cora intensamente pela hematoxilina. A eosina é um corante ácido que cora estruturas básicas tendo como princípio a basofilia. Normalmente observamos o citoplasma corado pela eosina. Serviço Social Aumento de 40X Observe neste aumento a camada superficial de células pavimentosas (achatadas) com a presença do núcleo corado pela hematoxilina. Aumento de 100X Diferencie a porção de núcleo e citoplasma com as diferenças de coloração. Manual de Estágio Aumento de 400X Diferencie as camadas de células do epitélio e a coloração de H/E. Observe a composição desse tecido epitelial. Existe diferença no formato das células que estão na região basal quando comparadas às células da região apical? Justifique. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Observe a região mais superficial desse tecido epitelial. Você consegue observar a presença de células nessa região? Justifique e descreva a importância dessa estrutura nesse tipo de tecido. Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Tireoide AULA 1 ROTEIRO 3 OBJETIVO Visualização da lâmina de tireoide para a visualização do epitélio e do folículo tireoidiano. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Tireoide Na lâmina observe o epitélio cúbico simples (células foliculares). Note a presença do coloide na região central do folículo tireoidiano. Aumento de 40X Observe os folículos tireoidianos, as células foliculares cúbicas e o coloide. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe o epitélio cúbico simples e o coloide. Como podemos classificar o tipo glandular observado na glândula tireoide? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Descreva como esse tipo de glândula é formado. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: pele AULA 1 ROTEIRO 4 OBJETIVO Visualização da lâmina de pele grossa e pele fina para a visualização do epitélio e do tecido conjuntivo propriamente dito. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Pele grossa (epitélio/conjuntivo/ adiposo) Aumento de 40X Neste aumento visualizamos: � Queratina (camada mais externa e corada em róseo) � Epitélio pavimentoso estratificado � Papilas epidérmicas e dérmicas � Tecido Conjuntivo Frouxo e tecido conjuntivo denso não modelado � Tecido adiposo unilocular � Note as características que são a queratina (camada córnea) bem mais desenvolvida, epiderme espessa. Não possui folículos pilosos!! Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a camada de queratina e as camadas do epitélio pavimentoso estratificado. Note a diferença entre o epitélio e conjuntivo propriamente dito. No tecido conjuntivo observe a diferença entre o tecido conjuntivo frouxo e tecido conjuntivo denso não modelado. Observe o tecido adiposo unilocular com as células adiposas (célula grande com uma gotícula de gordura no citoplasma). Serviço Social Lâmina: Pele fina Observe camadas: queratina (camada menos espessa), epitélio pavimentoso estratificado, tecido conjuntivo. Note a presença dos folículos pilosos. Observe as glândulas sebáceas e glândulas sudoríparas. A diferença entre a pele fina e pele grossa está na espessura da epiderme. Aumento de 40X Observe as camadas e a presença de estruturas glandulares. Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a camada mais delgada de queratina, as camadas do epitélio pavimentoso estratificado, os folículos pilosos e as glândulas sudoríparas. Manual de Estágio Existe diferença entre a pele grossa e a pele fina? Quais? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ A camada córnea observada na pele grossa e na pele fina são iguais? Justifique. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Existe diferença entre a pele grossa e a pele fina? Quais? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Serviço Social A camada córnea observada na pele grossa e na pele fina são iguais? Justifique. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Traqueia e intestino delgado AULA 2 ROTEIRO 1 OBJETIVO Visualização da lâmina de traqueia e de intestino delgado para visualização dos diferentes tipos de epitélio e das particularidades de cada lâmina. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Traqueia Na lâmina observe o epitélio pseudoestratificado cilíndrico ciliado com células caliciformes. Aumento de 40X Observe o epitélio e a cartilagem hialina da traqueia. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe o epitélio pseudoestratificado cilíndrico ciliado com células caliciformes. Lâmina: Pulmão Na lâmina observe o epitélio e a organização do órgão. Aumento de 40X Observe o epitélio e a organização dos alvéolos pulmonares. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a organização das células e alvéolos. Lâmina: Intestino delgado Na lâmina observe o epitélio cilíndrico simples contendo células caliciformes e a borda em escova. Aumento de 40X Observe o epitélio cilíndrico simples e a célula caliciforme. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe o epitélio cilíndrico simples, as células caliciformes e a borda em escova. Qual a importância da presença dos cílios nesse tecido? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Justifique a presença de células caliciformes no tecido. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: bexiga, fígado e glândula salivar AULA 2 ROTEIRO 2 OBJETIVO Visualização das lâminas de bexiga, de fígado e de glândula salivar e observação das diferenças das estruturas. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Bexiga Na lâmina observe o epitélio de transição. Aumento de 40X Observe a estrutura e organização dos diferentes tecidos. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe o epitélio transicional e o formato das células que o compõem. Lâmina: Fígado Observe as estruturas glandulares. Aumento de 40X Observe a organização da estrutura dos tecidos e a organização glandular. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X O órgão é revestido por uma cápsula delgada de tecido conjuntivo (cápsula de Glisson) que envolve uma grande “massa” de hepatócitos, células de formas poliédricas dispostas como placas anastomosadas de posicionamento radial que constituem os lóbulos hepáticos, de formato hexagonal. Lâmina: Glândula salivar Observe a formação dos tipos de células glandulares e diferencie cada uma delas. Aumento de 40X Observe a organização e estruturação dos tecidos. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Observar os ácinos mistos (6) formados por uma porção secretora mucosa com um pequeno capuz de células serosas, semilua serosa, assim denominado devido ao formato de lua crescente.Também podem ser observados os ductos e septos conjuntivos. Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: tendão e fibras AULA 2 ROTEIRO 3 OBJETIVO Visualização da lâmina de tendão para visualização da disposição dos feixes de fibras colágenas do tipo I. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Tendão O tendão é formado por tecido conjuntivo denso modelado e feixes de fibras colágenas do tipo I dispostas paralelas entre si. Aumento de 40X Observe a direção paralela das fibras colágenas. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento o núcleo dos fibroblastos e a direção das fibras colágenas. Qual a função dos fibroblastos? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Diferencie os tipos de tecido conjuntivo. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: cartilagem AULA 3 ROTEIRO 1 OBJETIVO Visualização de lâminas contendo cartilagem hialina e cartilagem elástica. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Cartilagem hialina- Traqueia Aumento de 40X Observe a cartilagem hialina em uma coloração azulada. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a cartilagem hialina, os condrócitos e condroblastos presentes. Observe o pericôndrio. Lâmina: Cartilagem elástica – Orelha Aumento de 40X Observe a cartilagem elástica (fibras colágenas e elásticas). Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a presença das fibras e os condrócitos. O que é o pericôndrio? Quais são suas funções? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Tecido ósseo AULA 3 ROTEIRO 2 OBJETIVO Visualização de lâminas de joelho (ossificação endocondral), calota craniana e do sistema de Harvers. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Joelho – ossificação endocondral Aumento de 40X Observe as diferentes zonas existentes na proliferação dos condrócitos até a ossificação. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a zona de repouso, a zona de proliferação (de cartilagem seriada), zona de cartilagem hipertrófica, zona de cartilagem calcificada e a zona de ossificação. Lâmina: Calota craniana Aumento de 40X Observe o tecido ósseo e as diferentes células existentes na calota craniana. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Neste aumento diferencie o osteoblasto, osteócitos e osteoclastos. Lâmina: Sistema de Harvers Aumento de 40X Note a presença do sistema de Harvers e do canal de Harvers. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe a presença de lâminas que correspondem à disposição das fibras colágenas em lamelas. Descreva as funções das células ósseas. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Sangue AULA 3 ROTEIRO 3 OBJETIVO Visualização de lâminas de esfregaço sanguíneo para análise morfológica das diferenças entre as células sanguíneas. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Esfregaço sanguíneo Aumento de 1000X (imersão) Observe a diferença morfológica das hemácias, plaquetas e leucócitos (polimorfonucleares e mononucleares). Manual de Estágio Lâmina: artéria aorta Os vasos sanguíneos são formados por camadas ou túnicas. A túnica íntima (1) corresponde ao endocárdio cardíaco, ou seja, endotélio e tecido conjuntivo subendotelial, sendo facilmente observada na face luminal da parede dos vasos. Em seguida observa- se a túnica média (2), composta basicamente por músculo liso e fibras, que, no caso das artérias elásticas, existe uma predominância das fibras elásticas, formando lâminas elásticas (ondulações fortemente acidófilas), cuja utilidade deve-se à alta complacência característica dessa porção do sistema vascular. Externamente, está presente a túnica adventícia (3) que corresponde histologicamente ao tecido conjuntivo. Nessa túnica há os vasorum, rede de vasos menores que nutrem a parede de vasos de grande calibre. Aumento de 40X Observe a estrutura do vaso sanguíneo e sua organização. Aumento de 100X e 400X Observe as regiões apresentadas e a organização presente na estrutura arterial. Serviço Social Como é feita a diferenciação das células sanguíneas? ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: órgãos linfoides AULA 3 ROTEIRO 4 OBJETIVO Entender e descrever sobre a organização histológica linfoide. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Linfonodo Aumento de 40X Observar a organização histológica deste órgão, sua cápsula, a divisão entre córtex (1) e medula (2), sua aparência histológica e a distribuição cortical dos nódulos linfoides (3). Serviço Social Aumento de 100X e 400X Em médio/grandeaumento, é possível ver a cápsula de tecido conjuntivo denso (4), onde estão os vasos aferentes, assim como as trabéculas que partem da cápsula e adentram a zona cortical. Adjacente à cápsula e ao redor das trabéculas, encontramos espaços, chamados de seios subcapsular (5) e paracortical respectivamente. Na região central do linfonodo, há a zona medular na qual encontramos os cordões medulares (6) (plasmócitos agrupados em cordões) e os seios medulares (7) (espaços revestidos por endotélio e macrófagos). É importante observar ainda a região do hilo do linfonodo (8), que na preparação estará caracterizada pela descontinuidade da cápsula que o envolve, onde encontramos os vasos eferentes, a veia e a artéria do linfonodo. Lâmina: Baço Aumento de 40X Observar a organização histológica deste órgão. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Em médio/grande aumento, observar a presença da cápsula (9) (acidófila) que emite trabéculas (10) de mesma coloração as quais possuem vasos em seu interior, vasos trabeculares (11). A polpa branca (12) corresponde ao conjunto dos nódulos linfáticos cuja estrutura é idêntica aos do linfonodo, à exceção da existência de uma pequena arteríola em seu interior, conhecida como arteríola central (13). A região imediatamente ao redor das arteríolas centrais é a bainha periarterial (área timo-dependente). Entre os nódulos linfáticos (polpa branca), constatamos a presença da polpa vermelha (14), formada por seios esplênicos (espaços revestidos por endotélio com a presença de macrófagos ao redor) delimitados por cordões esplênicos ou de Billroth (formados pelos plasmócitos). O estroma (fibras reticulares e fibras musculares) no baço é mascarado pelo parênquima (linfócitos). É importante observar ainda a intensa vascularização deste órgão (vênulas, arteríolas e artérias). Serviço Social Manual de Estágio Caderno de histologia [recurso eletrônico]: texto e atlas / Christina da Silva Camillo ... [et al.]; Francilberto Dyego de Souza ... [et al.] (Colaboradores). – Natal, RN: EDUFRN, 2017. p. 118: PDF; 10,4 Mb. Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Tecido Muscular AULA 4 ROTEIRO 1 OBJETIVO Visualização das lâminas de língua, coração e musculatura do intestino delgado para análise morfológica das diferenças entre músculo estriado esquelético, músculo estriado cardíaco e músculo liso. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Língua – músculo estriado esquelético Aumento de 40X Observe os cortes longitudinal e transversal da língua e suas diferenças. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X No corte longitudinal, observe a presença de estriações transversais e a célula multinucleada do músculo. Lâmina: Coração – músculo estriado cardíaco Aumento de 40X, 100X, 400X Observe a presença das estriações transversais e da presença dos discos intercalares. Serviço Social Aumento de 100X e 400X Observe a ausência de estriações transversais e as células únicas, cada qual com o seu núcleo. Manual de Estágio Descreva as diferenças existentes entre os tecidos musculares estriados (esqueléticos e cardíacos) e liso. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Serviço Social Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Tecido Nervoso AULA 4 ROTEIRO 2 OBJETIVO Visualização das lâminas de medula e cerebelo diferenciando os componentes da substância branca e cinzenta. PROCEDIMENTO Observar as lâminas ao microscópio de luz nos aumentos recomendados a seguir. Lâmina: Medula Aumento de 40X Observe a diferença entre a substância branca e cinzenta. Note a presença dos corpos celulares na substância cinzenta. Manual de Estágio Aumento de 100X e 400X Neste aumento observe os corpos celulares e a presença do corpúsculo de Nissl. Os pequenos núcleos correspondem às várias células da neuroglia. Lâmina: Cerebelo Aumento de 40X, 100X e 400X Diferencie a camada molecular, camada dos neurônios de Purkinjie e a camada granulosa. Serviço Social Manual de Estágio Instituto de Ciências da Saúde Disciplina: Histologia Título da Aula: Nomenclatura de tecidos epiteliais AULA 4 ROTEIRO 3 OBJETIVO Realizar o reconhecimento dos diferentes tecidos epiteliais. PROCEDIMENTO Observe as imagens abaixo e nomeie os tecidos epiteliais. 1- Serviço Social 2- 3- Manual de Estágio 4- 5- 6-
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