RELATÓRIO DA PRÁTICA DE CITOLOGIA

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

UNIVERSIDADE PAULISTA - UNIP
RELATÓRIO DA AULA PRÁTICA
CURSO: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DISCIPLINA: CITOLOGIA
ALUNA: ELIZABETH GUIMARÃES FERREIRA VIEIRA
R.A: 2109096 POLO: DUTRA SÃO JOSE DOS CAMPOS
DATA: 06 / 11 e 13/11 / 2021
INTRODUÇÃO
O presente estudo feito na aula prática da disciplina de Citologia,
permitiu aos alunos aprenderem na prática o que foi visto anteriormente nas
aulas teóricas.
Os alunos foram orientados quanto ao uso dos IPIS de segurança,
devido a todo material biológico coletado para análise ser potencialmente
infectante. Foram obrigatórios o uso de jaleco, máscara de proteção e luvas
descartáveis.
Com o auxílio do Microscópio óptico composto (MOC), foi possível
observar as células que são invisíveis a olho nu.
Para o estudo da aula 1 foi demostrado as partes do Microscópio óptico
composto (MOC) e também foi ensinado como manuseá-lo de forma correta e
para a observação dos materiais coletados, os alunos foram orientados quanto
ao uso dos materiais como as lâminas, lamínulas, o uso de corantes, entre
outros.
Os materiais estudados foram: as células epiteliais da mucosa bucal,
iogurte natural, letra de jornal, folha, lâmina pronta com o esôfago de uma rato
e amostra de sangue.
Para o estudo da aula 2 foram observados: Lamina 1 - Fígado de porco
na técnica H/E, lâmina 2 - coração (Não identificado) na técnica H/E, lâmina 3 -
Coração (Não identificado) na técnica Masson, lâmina 4 - Língua de gato na
técnica H/E (Obs: Todas as lâminas anteriores foram cedidas pela professora),
lâmina 5 - Preparação da Lâmina da folha da Elódea (Egeria densa), lâmina 6 -
Preparação da lâmina de raiz de cebola.
Os corantes usados foram: a Hematoxilina e Eosina que evidenciam
características estruturais. A hematoxilina cora as estruturas em azul e a eosina
cora as estruturas em vermelho ou rosa. Corantes ácidos reagem com
componentes catiônicos das células e tecidos. Quando se juntam a hematoxilina
e a eosina, coram o citoplasma, filamentos citoplasmáticos e fibras
extracelulares. Outro corante usado foi o Masson que é uma coloração especial
usada principalmente para caracterizar e discriminar diferentes tecidos
conjuntivos e componentes de tecidos moles.
AULA 1 - IDENTIFICAÇÃO DE PEÇAS E FUNCIONAMENTO DO
MICROSCÓPIO ÓPTICO COMPOSTO (MOC) E OBSERVAÇÃO DE CÉLULAS
EPITELIAIS DAMUCOSABUCAL PELA TÉCNICA DOAZUL DEMETILENO.
Nessa etapa do estudo foi apresentado aos alunos como identificar peças
e o funcionamento do Microscópio Óptico Composto. Posteriormente foi feita a
coleta da mucosa bucal de cada aluno separadamente para observação de
células epiteliais.
PARTE A: Foi feita a identificação das peças e funcionamento do MOC.
Material e métodos
Microscópio óptico composto (MOC), lâminas, lamínulas. O Microscópio óptico
permite a visualização de material que não é possível ser visto a olho nu. (Figura
1).
Figura 1 - Microscópio óptico composto (MOC)
Fonte: Elizabeth Guimarães
OMOC possue as seguintes peças: Peças ópticas (Oculares e Objetivas),
Condensador, Sistema iluminador e/ou espelho plano-côncavo, Peças
mecânicas (Tubo ou canhão), Revólver, Braço ou Estativo, Parafusos
macrométricos e micrométricos, Sistema Charriot, Lâmina sobre a platina, Mesa
ou platina, Base ou pé, Parafuso do sistema condensador e diafragma.
Focalização: Foi mostrado aos alunos o passo a passo para iniciar o uso do
Microscópio, nas seguintes etapas:
Etapa 1: Ligar a fonte luminosa sempre verificando a voltagem correta;
Etapa 2: Abaixar a platina utilizando o parafuso macrométrico;
Etapa 3: Colocar a lâmina já preparada sobre a platina;
Etapa 4: Ajustar o condensador, o diafragma para obter uma boa iluminação;
Etapa 5: Olhando em direção à platina, girar o parafuso macrométrico para
aproximar o material existente na lâmina da objetiva de menor aumento (4x),
Etapa 6:Olhe pelas oculares e gire o parafuso macrométrico no sentido contrário
até obter a imagem do material. Depois gire o parafuso micrométrico para obter
a imagem bem nítida do material, se houver a necessidade de obter uma imagem
mais ampliada para do aumento de 40x para 100x, girando o revólver e assim
por diante se houver a necessidade, repetindo o tal procedimento até obter o
aumento de 400x.
PARTE B: Observando o material coletado da mucosa bucal
Foram coletadas as células epiteliais da mucosa bucal de cada aluno
individualmente para ser feita a observação.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: MOC, espátula de madeira,
lâminas, lamínulas, corante azul de metileno, papel filtro e conta-gotas.
Os alunos foram orientados a raspar com uma espátula de madeira,
suavemente, a mucosa que reveste a bochecha. Posteriormente espalhar o
material contido na ponta da espátula no centro da lâmina de vidro. Depois
colocar uma gota do corante sobre o material coletado (células epiteliais). No
procedimento seguinte em um ângulo de 45º deixar a lamínula cair sobre o
material bruscamente. O preparo foi colocado no MOC nos aumentos 40x, 100x
e 400x para observação das células epiteliais, isoladas ou aglomeradas.
Pode-se observar a membrana plasmática, o citoplasma e o núcleo,
notando que as células epiteliais da bochecha são poliédricas. (Figura 2).
Figura 2 - Células epiteliais da mucosa bucal
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE C: Observando a letra de jornal
Nessa parte foi feita a focalização de uma lente de jornal. Cada aluno foi
orientado a coletar uma letra de jornal, fornecida pela professora, depois o
material foi colado em uma lâmina para observação.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: MOC, lâminas; lamínulas;
tesoura; pinça; pipeta; recipiente com água; folha de jornal.
Os alunos foram orientados da seguinte forma: Foi recortada uma letra
pequena de jornal, em seguida a letra foi Colocada na lâmina em posição de
leitura, em cima da letra foi adicionada uma gota de água sobre a lâmina, com
o auxílio de uma pipeta, depois colocando a lamínula em posição de 45° e deixar
a lamínula cair sobre o material bruscamente. Após a coleta do material usando
os materiais disponíveis, o mesmo foi colocado no microscópio de luz para ser
observado. Foram usados os procedimentos de focalização do material: O
preparo foi colocado no MOC nos aumentos 40x, 100x e 400x para observação
das células da celulose presentes no papel e também foi observado que a letra
é visualizada inversamente. (Figura 3)
Figura 3 - Letra do jornal
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE D: Observando a Célula procariótica: bactéria do iogurte
Nessa parte foi feita a coleta de uma gota de iogurte natural para a
observação das bactérias presentes. Cada aluno foi orientado a coletar uma
gota de iogurte e posteriormente depositar em lâmina para observação.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz; óleo de
imersão, lâminas; lamínulas; palito, papel filtro e pipeta.
Os alunos foram orientados da seguinte forma:
Colocar uma gota de iogurte natural sobre uma lâmina, pingar uma gota de água
e homogeneizar com o auxílio de um palito, coloca a lamínula em posição de
45º, rebaixando, lentamente, até que a mesma fique, totalmente, sobre a lâmina,
evitando a formação de bolhas de ar.
Proceder à etapa da focalização, utilizando as objetivas de 4x, 10x, 40x
e 100x, e analisar na objetiva de 100x, colocando o óleo de imersão para
observar o transporte de água pelas bactérias e seus tipos morfológicos. Foram
observadas as bactérias do iogurte. (Figura 4).
Figura 4 - Bactérias do iogurte natural
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE E: Observação de um esfregaço de sangue periférico segundo a técnica
de Leishman.
Nessa parte foi feita a coleta de uma gota de sangue de cada aluno ou
feito o uso do sangue disponível no laboratório para a observação dos tipos de
leucócitos. Cada aluno foi orientado a coletar uma gota de sangue e
posteriormente depositar em lâmina para observação.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: lâmina limpa e seca, lanceta
especial esterilizados, lâmina para o esfregaço, algodão, álcool,
corante de
Leishman, papel de filtro, água destilada com conta-gotas, caixa para o descarte
e pia para a lavagem das lâminas utilizadas, MOC e óleo de imersão.
Os alunos foram orientados da seguinte forma: Fazer assepsia digital na
polpa do dedo com uma solução de álcool 70%. (Os alunos que não utilizaram
o próprio sangue, utilizaram o disponível em laboratório). Com a lanceta, pique
a polpa interna da falange do dedo mínimo, espere sangrar, coletar a gota e
colocando-a na extremidade da lâmina, fazer bruscamente o procedimento do
esfregaço. A lâmina deve ficar na pia, depois deve-se cobrir o esfregaço com o
corante Leishman e aguardar por cinco minutos, passado os cinco minutos,
deve-se gotejar a água destilada sem tirar o corante, com uso da pipeta , escorrer
e lavar com água destilada, deixar o esfregaço secar ao ar ambiente e após a
secagem da lâmina, proceder à etapa da focalização, utilizando as objetivas de
4x, 10x, 40x e 100x, observando-a no aumento de 1000x utilizando o óleo de
imersão sem o uso da lamínula. Observe os glóbulos vermelhos, em maior
número, e os glóbulos brancos, em roxo e em menor número. (Figura 5)
Figura 5 - Sangue
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE F: Observação de corte transversal do esôfago de uma rato (material
preparado por técnicas diferentes de coloração). Técnicas de H&E e H + PAS.
Material e métodos
A lâmina já confeccionada foi cedida pela professora para a observação. Foram
usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando as objetivas
de 4x, 10x, 40x e 100x. Foi observado o esôfago. (Figura 6)
Figura 6 - Esôfago
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE G: Observação de uma pequena fração de uma folha da Tradescantia
palida ( Popularmente conhecida como trapoeraba-roxa ou coração-roxo).
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz; copo com
água, lâminas; lamínulas; papel filtro e pipeta.
A lâmina foi preparada sem corante e somente foi adicionado uma gota
d’água.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x.
Foram observados os estômatos, e com a ampliação do mesmo pode-se
observar as células guarda e o núcleo. (Figura 7).
Figura 7 - Estômatos da Tradescantia palida
Fonte: Elizabeth Guimarães
AULA 2 - Observação das lâminas prontas Fígado de porco, coração,
Língua de gato, Folha da Elódea. Preparação da lâmina de raiz de cebola
para a observação do ciclo celular mitótico.
Nessa etapa foram cedidos para os alunos lâminas prontas contendo
fragmentos microscópios para a observação. Posteriormente feita a preparação
da lâmina de raiz de cebola.
PARTE A: Observação da lâmina de fígado de porco pronta, usando a técnica
de H/E (Hematoxilina-Eosina).
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz e óleo de
imersão.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x (com óleo de imersão).
Foram observados os hepatócitos (células do fígado do porco) e oslóbulos hepáticos. (Figura 8).
Figura 8 - Fígado de porco
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE B: Observação da lâmina de coração pronta, usando a técnica de H/E(Hematoxilina-Eosina).
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz e óleo de
imersão.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x (com óleo de imersão).
Foi observado o músculo estriado cardíaco. (Figura 9).
Figura 9 - Coração (não identificado) Técnica H/E
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE C: Observação da lâmina de coração pronta, usando a técnicaMasson.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz e óleo de
imersão.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x (com óleo de imersão).
Com a técnica de Masson o músculo estriado cardíaco fica mais fácil dese observar. (Figura 10).
Figura 10 - Coração (não identificado) Técnica Masson
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE D: Observação da lâmina de lingua de gato pronta, usando a técnicaMasson.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x.
Foram observadas as papilas gustativas filiformes, valadas e fungiformes.
(Figura 11).
Figura 11 - Lingua de gato Técnica H/E
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE E: Preparo e observação da lâmina da folha da Elódea.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz; copo com
água, solução salina a 1,5%, lâminas; lamínulas; papel filtro e pipeta.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x. Foi usada a solução salina a 15% na
segunda observação.
Pode-se observar o cloroplasto, o citoplasma e o núcleo. Com a solução
hipertônica pode-se observar a plasmólise. (Figura 12).
Figura 12 - Folha da Elódea
Fonte: Elizabeth Guimarães
PARTE F: Observação de hemácias em meios hipertônico, isotônico ehipotônico.
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz; lâminas
e lamínulas, pipetas Pasteur, tubo de ensaio, seringa e agulhas decartáveis com
solução de NaCl 2%, 0,9% e 0,4%.
Foram usados os seguintes métodos da etapa da focalização, utilizando
as objetivas de 4x, 10x, 40x e 100x.
Foram registrados a concentração de cada solução utilizada em cada
uma das lâminas, posteriormente pingado uma gota de sangue no centro da
lâmina e sobre a gota de sangue foi pingado uma solução de NaCl 2% e depois
coberto com uma lamínula. (Figura 13).
Foram observados as hemácias (Figura 14) em meio isotônico e
hipertônico.
Figura 13 - Hemácias em meio Isotônico e hipertônico
Fonte:http://carlamcnascimento.blogspot.com/2014/03/1-semestre-de-ef-aula-pratica.html
Figura 14 - Hemácias
Fonte: Akemy
PARTE G: Preparo e observação da lâmina da raiz da cebola (Allum cepa), elatécnica de esmagamento de meristema apical para a observação do ciclocelular mitótico (interfase, prófase, metáfase, anáfase e telófase).
Material e métodos
Foram usados os seguintes equipamentos: microscópio de luz; cebola,
béquer, papel-alumínio, pregador de madeira, água, orceína acética, pinça,
pincel, gilete ou bisturi, vidro, placa de Petri, tubo de ensaio, bico de Bunsen,
lâminas e lamínulas.
Foi cortada algumas pontas das raízes da cebola, a seguir as raízes foram
mergulhadas num tubo de ensaio com 2 a 3 ml de orceína acética,
posteriormente levada ao bico de Bunsen até ferver (2 a 3 minutos) (Figura 15).
Após esse procedimento o material foi despejado numa placa de Petri, e com a
pinça as raízes foram conduzidas as lâminas. Depois sobre cada raiz foi
colocado uma gota de orceína acética fria e deixada em repouso durante 5
minutos. Após esse prazo foi colocado uma lamínula sobre o material e com
cuidado foi feito o esmagamento da raiz.
Foram observadas as fases da mitose e da interfase. (Figura 16)
Figura 15 - Bico de Bunsen
Fonte: Mirelle
Figura 16 - Raiz da cebola (metáfase e anáfase)
Fonte: Mirelle
Resultados e Discussão
As observação realizadas no laboratório permitiu aos estudantes
conhecer a células e suas estruturas. Permitiu-lhes aprender a preparar material
biológico para observação, a manusear o microscópio que é peça fundamental
para os estudos da biologia.
Conclusão
A aula prática permite aos alunos a observação cuidadosa e criteriosa
dos materiais coletados e permite-os usar técnicas de observação que precisa
ser consistente e coerente e que possa ser verificado em metodologias
estudadas.
O presente estudo possibilitou-os aprender a preparar material biológico
para a observação de suas estruturas microscópicas e também aprenderam a
manusear o MOC, que é uma ferramenta fundamental.
Diante disso, a prática de laboratório proporciona aos alunos a
oportunidade de vivenciar na prática o que foi aprendido na teoria.
REFERÊNCIAS
COLORAÇÕES
ESPECIAIS: TRICRÔMICO DE MASSON. Disponível em:
<https://patologiaveterinaria.paginas.ufsc.br/2020/04/>. Acesso em :
16/11/2021.
ESÔFAGO. Disponível em: <https://www.unifal-
mg.edu.br/histologiainterativa/esofago/>. Acesso em:08/11/2021.
LÂMINA DE HEMÁCIAS EM HIPERTÔNICO, ISOTÔNICO E HIPERTÔNICO.
Disponível em: <http://carlamcnascimento.blogspot.com/2014/03/1-semestre-de-ef-
aula-pratica.html>. Acesso em : 16/11/2021.
PANORAMA HISTÓRICO DA TEORIA CELULAR. Disponível
em:<file:///C:/Users/ELIZAB~1/AppData/Local/Temp/23734-
Texto%20do%20artigo-79752-1-10-20161012-1.pdf>. Acesso em: 08/11/02021.
TEORIA CELULAR. Disponível em:
<http://www.invivo.fiocruz.br/celula/teoria_03.htm>. Acesso em: 08/11/2021.
https://patologiaveterinaria.paginas.ufsc.br/2020/04/05/coloracoes-especiais-tricromico-de-masson/
https://patologiaveterinaria.paginas.ufsc.br/2020/04/
https://patologiaveterinaria.paginas.ufsc.br/2020/04/05/coloracoes-especiais-tricromico-de-masson/
http://carlamcnascimento.blogspot.com/2014/03/1-semestre-de-ef-aula-pratica.html
http://carlamcnascimento.blogspot.com/2014/03/1-semestre-de-ef-aula-pratica.html
http://carlamcnascimento.blogspot.com/2014/03/1-semestre-de-ef-aula-pratica.html