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Parasitologia Clínica -------------- Introdução a Parasitologia --------------- O parasitismo é definido como o estudo de um tipo particular de associação entre seres vivos, em que alguns organismos podem estar engajados de modo ocasional ou permanente. Em geral, define-se uma relação como parasitária quando ocorrem prejuízos mensuráveis na população de hospedeiros, tais como maior mortalidade ou retardo de crescimento. Na Parasitologia humana, entretanto, o prejuízo para o hospedeiro caracteriza-se, em termos bem mais subjetivos, como doença. A maioria dos parasitas tem como característica sintomatológica, a diarreia (casos isolados ou constantes); também pode ter casos assintomáticos, depende de vários fatores. Helmintos e Protozoários parasitos do homem O termo verme refere-se, genericamente, a um grupo de metazoários com corpo alongado – achatados (platelmintos) ou cilíndricos (nematelmintos), capazes de existir em diferentes ambientes (tanto em vida livre, espaços aquáticos e/ou terrestres, e em vida parasitária. Os ciclos biológicos dos helmintos capazes de parasitar animais – humanos e não humanos – costumam ser bastante complexos, destacando-se o desenvolvimento de estágios evolutivos sequenciais, dentro e fora dos hospedeiros. Destaca-se que a interação helmito/hospedeiro(s) tem distintas possibilidades de desenlace, desde situações nas quais não se produz doença (clinicamente manifesta). Obs: Helmintos produzem ovos e protozoários produzem cistos, caso erre isso em um laudo, o faz ficar inválido. Helmintos Filo Platyhelmintes - Taenia solium, Taenia saginata, Hymenolepis nana. Echinococcus granulosus, Schistosoma mansoni. Filo Nematoda - Ascaris lumbricoides, Toxocara canis, Trichuiris trichiura. Enterobius vermicularis, Strongyloides stercoralis. Ancylostona duodenale, Nector americanus. Wuchereria bancrofti (Filariose linfática), Onchocerca volvulus (Oncocercose). ● Helmintos - formas evolutivas eliminadas nas fezes: ❖ OVOS - Ascaris lumbricoides - Trichuris Trichiura - Enterobius vermicularis - Ancilostomídeos (Ancylostoma duodenale e Necator americanus). - Taenia solium - Taenia saginata - Hymenolepis nana - Schistosoma mansoni ❖ LARVAS - Migrans cutâneas - Migrans visceral (infecções pelo genero toxocara) Protozoários Os protozoários são organismos microscópicos, unicelulares e eucariontes, isto é, providos de um núcleo diferenciado e de outras organelas membranosas, como mitocôndrias, aparelho de Golgi, lisossomos, vacúolos, dentre outras. A transmissão dos protozoários intestinais, normalmente, ocorre através da via fecal-oral, enquanto os que vivem no sangue ou nos tecidos do Homo sapiens são transmitidos a outros seres humanos, por exemplo a partir de artrópodes vetores. Parasitologia Clínica Trypanosoma cruzy. Leishmania spp. Giardia intestinalis. Trichomonas vaginalis. Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar, Endolimax nana, Iodamoeba butschlii. Toxoplasma gondii. Plasmodium spp. Coccídeos: Cryptosporidium sp, Isospora belli, Sarcoystis hominis, Cyclospora cayetanensis. ● Protozoários - Formas evolutivas eliminadas nas fezes: ❖ CISTOS/TROFOIZOITOS - Giardia lamblia - Entamoeba histolytica/E. dispar - Entamoeba coli - Endolimax nana - Iodamoeba butschlii - Blastocystis hominis (apenas cisto) ❖ OOCISTOS dos Coccídeos: - Cryptosporidium sp - Isospora berli - Sarcoystis hominis - Cyclospora cayetanensis -------------------------------------------------------------------- ASSUNTOS A SEREM ABORDADOS: ● Biossegurança no laboratórios de Parasitologia. ● Coleta e Conservação de material para coproscopia. ● Exame macroscópico e microscópico das fezes. ● Conservação das fezes: MIF (mercurocromo ou mertiolate, iodo e formol, SAF (acetado de sódio, ácido acético glacial, formol e água destilada), solução de Formaldeído. ● Normas de acondicionamento e transporte biológico. MÉTODOS ❖ Métodos Diretos - Exame direto a fresco ❖ Métodos de Concentração - Método de Hoffman, Pons e Janer (sedimentação espontanea). - Método de Willis (flutuação em solução saturada de cloreto de sódio). - Método Faust e cols (flutuação em solução de sulfato de Zinco). - Método de Coproplus. ❖ Método Quantitativo - Kato e Katz ❖ Métodos para isolamento de Larvas - Método de Rugai ❖ Pesquisa de Oocistos - Método de Henriksen e Pohlenz (Coloração por Kinyon). ❖ Pesquisa de sangue oculto nas fezes ❖ Diagnóstico de hematozoários - Método direto a fresco. - Esfregaço em camada delgada e em gota espessa. - Método de Coloração Panótico e Giemsa. EXAMES PARASITOLÓGICOS (para helmintos e protozoários) Fezes: diagnóstico de ovos ou larvas de helmintos, cistos, trofozoítos ou oocistos de protozoários ❖ O exame parasitológico de fezes engloba duas etapas: uma macroscópica e outra microscópica - A primeira através da qual é possível detectar e identificar macroparasitos eliminados. - E a outra que identifica a existência de cistos e trofozoítos de protozoários, e de larvas e ovos de helmintos. Parasitologia Clínica Sangue: formas sanguíneas. ❖ Pode ser realizado por dois métodos diferentes: gota espessa e distensão sanguínea - Na primeira técnica, o sangue é coletado por punção venosa ou digital e colocado sobre a lâmina de microscopia, na qual permanece secando para o exame, sem a utilização de anticoagulantes. - No método de distensão sanguínea, coleta-se uma microgota, a qual é espalhada sobre a lâmina. Após a coloração da lâmina, verifica-se a existência de hemoparasitos. COLETA DE AMOSTRA ● As amostras fecais devem ser colhidas, sem contaminação com urina, nem detritos do solo, em recipientes limpos, de boca larga, sem vazamentos; ● Evitar amostras colhidas até 1 semana depois da administração de laxantes potentes; ● Refrigeração/uso de preservadores; ● As fezes formadas não devem ser incubadas a 37 graus C, nem congeladas; ● Coleta em dias alternados (pode ser que um dia tenha ovos e no outro não, serve pra aumentar a sensibilidade); ● Fezes sólidas permanecem adequadas para exames parasitológicos por tempo relativamente longo, especialmente se mantidas sob refrigeração, torna, em muitos casos, desnecessário o uso de preservadores; ● Quando a refrigeração não é possível, devem-se usar preservadores compatíveis com os métodos de exame a serem utilizados a seguir. Obs: Coleta de fezes tem que ser um exame periódico para profissionais que trabalham com alimentos. CONSERVANTES/PRESERVADORES ● MIF (mercurocromo ou mertiolate, iodo e formol) = +popular e - utilizado ● Formol 5 ou 10 % tamponado = proibição do mercúrio ● SAF (acetado de sódio, ácido acético glacial, formol e água destilada) = bom para trofozoítos em fezes diarreicas ● Embrulhar em papel aluminio e armazenar na geladeira (5 a 10 graus C) ou isopor com gelo = até 48 horas. COLETA DA AMOSTRA/RECEPÇÃO DO MATERIAL ● Identificar o frasco com letra legível, indicando nome do paciente, data e hoa da coleta: lápis (não borrar com o conservante). ● Tempo de entrega do material dependende da suspeita clínica - Fezes diarreicas - Giardia 30 min - estrongiloidose com exame de larvas vivas imediatamente após a emissão das fezes. ● De preferência - coleta pela manhã no laboratório ou enviada rapidamente. EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES (EPF) Tem como objetivo diagnosticar os parasitos intestinais, por meio da pesquisa das diferentes formas parasitárias que são eliminadas nas fezes. ● O exame macroscópico permite a verificação da consistência das fezes, do odor, da presença de elementos anormais, como muco ou sangue, e de vermes adultos ou partes deles. ● O exame microscópico permite a visualização dos ovos ou larvas de helmintos, cistos, trofozoítos ou oocistos de protozoários. Pode ser quantitativo (contagem de ovos) ou qualitativo. Parasitologia Clínica Rotina: A grande maioria dos métodos é apenas QUALITATIVO (apenas indica a presença ou não do parasita). Quantitativo: Kato-Katz - é empregado para investigar a presença de ovos de Schistosoma mansoni (no material fecal) e, menos frequentemente,de outros helmintos. A técnica tem menor reprodutibilidade. OBS: Não é método para protozoário. E é padrão ouro para identificar esquitossomose. As fezes podem estar em diferentes consistências: - Formadas/ Sólidas (O processo de reabsorção de líquido ocorreu normalmente, nas líquidas não dá tempo desse processo ocorrer). - Semiformadas. - Pastosas. - Líquidas/ Diarréicas. O ciclo do protozoário é a causa de se esperar encontrar cistos em fezes formadas, esse processo se chama encistamento (formação de cistos). Em relação aos ovos, eles podem ser encontrados tanto em fezes formadas, quanto as líquidas. ESCOLHA DO MÉTODO Não existe um método capaz de diagnosticar, ao mesmo tempo, todas as formas parasitárias. Alguns métodos são mais gerais, permitindo o diagnóstico de vários parasitos intestinais, outros são métodos específicos, indicados para um parasito em especial. Métodos gerais: método de sedimentação de Hoffman, Pons e Janer e Coproplus e os métodos de centrifugação (MIFc, Ritchie). Suspeita clínica não relatada: método geral. ● Qualidade no EPF: 1 - algumas espécie de parasitos só são evidenciados por técnicas especiais; 2 - um exame isolado, onde o resultado é negativo, não deve ser conclusivo, sendo recomendável a sua repetição com outra amostra; 3 - A produção de cistos, ovos ou larvas não é uniforme ao longo do dia ou do ciclo do parasito. ● Métodos utilizados nos Exames parasitológicos ❖ Exame de fezes direto a fresco. - Procedimento simples; - 2mg de amostra; - Permite visualizar trofozoítos vivos; - obtida diretamente da amostra fecal, sem conservante, pouco material (falso-negativo); - Métodos de concentração são melhores: maior quantidade de amostra, maior sensibilidade. ❖ Técnicas de concentração - Muitas vezes o número de formas parasitárias é pequeno, havendo necessidade de recorrer a processos de enriquecimento para concentrá-las. - Flutuação ou sedimentação - Espontânea ou por centrifugação (método de Faust et al. - centrifugação-flutuação/ método de Hoffman, Pons e Janer ou de Lutz - sedimentação espontânea). ❖ Método de Willis - ❖ Coproplus ❖ Método de Ritchie - ❖ Método de Henriksen e Pohlenz (Coloração por Kinyon). ❖ Método de Rugai - ❖ Método de kato-kantz (quantitativo) - Obs: Se tiver + alimento não digerido do que material fecal, colocar no laudo, caso não seja o caso, não é necessário relatar. -------------------------------------------------------------------- ● Alguns conceitos: Parasitologia Clínica - Acolia: ausência de cor, fezes esbranquiçadas, pode ser um sinal de alterações/doenças hepáticas - Melena: amarronzado, fezes escurecidas, fezes borrachudas… - Presença de muco nas fezes: coletar para análise, pode estar presente por lentidão no fluxo intestinal. - Em casos de taenia é comum aparecer várias proglotes(partes dos parasitas) nas fezes, em outros casos podem aparecer o parasita todo. - Protozoários não dá pra ver na macroscopia, mas talvez os helmintos sim. - Sulfato ferroso é uma medicação que pode alterar a coloração das fezes, assim como outros medicamentos. -------------------------------------------------------------------- Bibliografia: Parasitologia - Fundamentos e Prática Clínica SIQUEIRA-BATISTA, Rodrigo et al. Mais opções de livro Parasitologia Contemporânea - FERREIRA -------------------------------------------------------------------- Por Dávylla Pinheiro.
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