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RELATÓRIO DE BIOQUÍMICA HUMANA AULA 1 Aluna : Riqueline Gomes de Souza Matrícula:01145982 Curso: nutrição 2022 (TEMA) ( ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR) 1) Resumo sobre o tema abordado em aula da amilase salivar Amilase salivar é uma enzima presente na saliva. A saliva , quando entra em contato com os alimentos é responsável pelo processo inicial de digestão realizando a quebra de partículas alimentares. A amilase salivar juntamente com o cálcio , início a digestão do amido contido nós alimentos , degradando e transformando em maltose e em outros polímeros de glicose. 2) Materiais utilizados. Tubos de ensaio , pipetas pauster , amido ,saliva, água , lugol, ácido clorídrico. 3)Responda as perguntas. A) Qual a composição do amido? O amido é um carboidrato formado , principalmente , por glicose com ligação glicosídicas. B) complete os resultados obtidos nos tubos 1,2,3 no procedimento da hidrólise química do amido. Atividade foi realizada em 3 tubos , no tubo 1 percebemos que teve modificao quando adicionou 5 gotas de lugol ficou esverdeado , não houve hidrólise, tem a presença de amido no tubo, após o banho de gelo ainda há presença de amido . Não houve hidrólise em ambos os tubos enzimático e químico. No tubo 2 e 3 percebemos que ficou a cor azul escura . C) Qual o objetivo do uso de HCL , aquecimento e resfriamento da hidrólise química do amido? O uso de ácido clorídrico provoca uma reação que favorece a hidrólise do amido. Dessa forma , ao final da reação , após por um curto período de aquecimento , seguindo por um resfriamento com uso de gelo é possível perceber a produção de glicose como produto. D) Descreva a sequência de transformação operadas pela amilase na molécula da amilose. No início do processo digestório, que começa na boca , com a mastigação , produz uma enzima existente na saliva , conhecida como amilase salivar. Quando liberada , inicia-se cuja reação catalisa a hidrólise nas ligações glicosídicas da amilose. E) comente os resultados obtidos nos tubos 1,2,3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido. A hidrólise enzimática do amido é um processo químico que acontece de forma natural no início da digestão, durante a mastigação momento no qual libera a enzima alfa amilase salivar , que atua catalisando a hidrólise de algumas ligações do amido dentro da boca , dando origem a molécula menores , conhecidas como oligossacarídeos. F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observadas no procedimento da hidrólise enzimática do amido. A solução de lugol 2% ( concentração _ solução de iodo que reage com a composição do amido formando uma cor esverdeada , escura , azulada quando encontra o amido o tempo de incubação e temperatura influencia na hidrólise. 4) conclusão sobre atividades catalítica da amilase salivar. A enzima presente na saliva é a substância responsável pela degradação do amido. TEMA (REAÇÃO DE SELIWANOFF ( REAÇÃO PARA DISTINGUIR ENTRE ALDOSE E CETOSE) 1) Resumo sobre o tema abordado. A reação de seliwanoff é um teste que permite distinguir ALDOSE de cetoses. Pelo teste é possível ver que , quando aquecido , as cetoses sofrem desidratação muito mais rápido do que as aldose 2) Material utilizados Ácido clorídrico , solução de sacarose , solução de frutose , solução de glicose , vórtex banho Maria , capela , tubos de ensaio , reagente de seliwanoff, bastão de vidro , pipetas Pasteur , peras de vidro. 3)Responda as perguntas A) o princípio bioquímico do teste de seliwanoff. O teste de seliwanoff ocorre pela reação do ácido clorídrico em contato com os carboidratos que , após a mistura , provocada a desidratação dos carboidratos devido à hidrólise da ligação glicosídicas. B) comente os resultados obtidos nos 3tubos utilizados no procedimento correlacionados com a presença ou não de aldose e cetose. O único tubo que ficou vermelho foi da frutose que indicou que ele é uma CETOSE . O restante não houve alteração de cor. C) explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. Serve de controle negativo D) qual a função do ácido clorídrico ( HCL) e da ferfura aplicados no teste de seliwanoff? Serve para provar que as aldose são mais sensíveis do que as cetoses , pois o seu ponto de ebulição é inferior aos delas. 4)sobre a Identificação de aldose e cetose utilizados o teste de seliwanoff Confirmamos Que a frutose é uma CETOSE . Na reação ocorre a produção do furfural e tem a reação com o resorcional dentro do reativo de seliwanoff e conseguimos perceber pela coloração vermelha intensa do tubo com frutose. TEMA PRECIPITAÇÃO SOBRE O TEMA ABORDADO EM AULA. 1) Resumo sobre o tema abordado Este procedimento é realizado para verificar a influencia de ácido forte e de sais de metais pesado sobre a solubilidade da proteína , assim como a influencia do PH sobre a carga líquida da molécula polipeptídica 2) Material utilizado Tubos de ensaio Identificação , solução de ovoalbulmina , ácido clorídrico , acetato de chumbo em pó , pipetas Pasteur , pera , estante para tubos. 3) Responda as perguntas A)comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbulmina com ácido forte e metal pesa Acontece a precipitação porque ocorre a desnaturação da proteína. B)Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precitacao das proteínas com ácidos fortes e mentais pesados? Ocorre desnaturação por alteração do PH. C)oque ocorre com a ovoalbulmina porque ela forma um precipitado insolúvel neste experimento? Desnaturação proteica 4) sobre a precipitação de proteínas por ácido e metais pesados. Observou precipitação da proteína.. TEMA PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÃO SALINAS CONCENTRADAS 1) Resumo sobre o tema da aula abordado A precipitação de proteínas pelas altas concentração de sais resultado na separação de mistura complexas de proteínas , posto que a concentração de sal necessária para precipitação é diferente para cada proteínas. 2) Materiais utilizado Pipetas pauster , solução de ovoalbulmina , tubos de ensaio , sulfato de amônia concentrado , água destilada. 3)Responda as perguntas A) que é “salting ouro” salting in” e camada de solvatação? Salting out” é a precipitação das proteínas em solução por meio de altas concentração de sais salting in é o aumento da solubilidade das proteínas em consequência do acréscimo de baixas concentração de sais. Camada de solvatação permitem que as partículas se espalhem uniformemente na água. B)Explique o princípio bioquímico de precipitação de proteínas por adição de solução Salinas. É um processo utilizado para fazer a separação das proteínas. C)comente os resultados observado da precipitação da proteínas por sulfato de amônio na presença e ausência da água , correlacionando com a solubilidade da proteína. Primeiro houve a pesagem de 10gr de sulfato de amônio e sua diluição em 10 ml de água destilada . Depois com pipetas inseriram 2ml de solução de ovoalbulmina em dois tubos em um deles foi adicionado 2ml de sulfato de amônio concentrado , vertendo pela parede do tubo , ao segundo tubo também fora adicionado 2 ml de água destilada observou a formação de uma solução leitosa. 4) sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros ( solução Salinas concentradas. O correu a formação de uma substância branca , com aparência leitosa , isso confirmar que o correu a precipitação da proteína. TEMA REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES 1.Resumo sobre o tema da aula abordado O Reativo é utilizado para a detecção de açúcares redutores cuja aplicação é feita para observar se há é utilizado de açúcar na urina e detectar uma possível diabete. 2.Materiais ultilizados Tubos de ensaio , proveta graduada , balão de funcho chato , pipeta , estufa , reagente , Benedict , glicose , sacarose , água destilada ,banhomaria 2.Responda as perguntas A)qual a composição do reativo de benedict? Reativo a base de sulfato de cobre B) Oque são açúcares redutores? São açúcares que contém , em sua composição , um grupo carboxílicos livre aldeído , com capacidade de redução em contato com o grupo aldeído, monossacarídeos , glicose , dissacarídeo , frutose , que sofrem oxidação em contato com agentes oxidantes em solução alcalinos. C) explique a fundamentação teórica do teste de Identificação de açúcares redutores com o reativo de benedict. Os açúcares redutores reagem com o sulfato de cobre do reagente de benedict , reduzindo-o ao óxido de cobre um composto insolúvel , de cor avermelhada , nesta solução ,um resultado positivo é indicado bola perda da cor azul inicial. D)Comente os resultados observado no experimento relacionando com a Identificação de açúcares redutores. No resultado ,observou que no primeiro tubo contendo três ml de glicose e cinco ml do reagente de benedict após ficar em banho Maria durante cinco minutos , houve uma modificação na cor que passou de azul para um tom avermelhada , os demais tubos , um contendo sacarose e outro água destilada , não sofreram modificações. E) Exemplifique alguma aplicação deste teste na área clínica. E um teste qualitativo ou quantitativo? É um teste qualitativo que indica presença de açúcares na urina e constando uma possível diabete. 4. sobre a indetificacao de açúcares redutores ultilizando o teste de benedict. Como está é uma solução composta por citrato de sódio , carbono de cálcio e sulfato de cobre, quando entra em contato com os açúcares redutores, sua coloçao sofre modificações isso ocorre devido à reação do sulfato de cobre. Referências bibliográfica Aula prática online pelo portal do aluno. Nelson,D.L; Cox,M,M. Princípios da bioquímica de Lehniger,porto alegre: artmed,2009 Biochemistry, Part 2, Debajyoti Das, Academic Publishers, 1978. Introduction to Organic Laboratory Techniques: A Small Scale Approach, Donald L. Pavia, Gary M. Lampman, George S. Kriz, Randall G. Engel, Cengage Learning, 2005. Analytical Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Rajan Katoch, Springer Science & Business Media, 19 de jul de 2011. Laboratory Manual for Biotechnology, Verma, Ashish S./ Das Surajit & Singh Anchal, S. Chand Publishing, 2014. Sites : https://www.fciencias.com/2016/10/20/teste-seliwanoff-laboratorio-online/ https://www.engquimicasantossp.com.br/2020/01/reagente-seliwanoff-teste-distinguir.html?m=1 http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/precipitacao-por-sais-de-metais-pesados-e-por-acidos-fortes https://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/precipitacao_proteinas.htm https://youtu.be/eLQzCmglQus
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