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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO 
Fundação CECIERJ/Consórcio CEDERJ 
 
Licenciatura em Química 
 
 
 
Química VI 
 
 
 
ESTUDO DIRIGIDO EXPERIMENTAL 1 (EDEX1) – ESPECTROFOTOMETRIA E 
CONSTRUÇÃO DE CURVA PADRÃO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Professora: Gabriela Rodrigues de Souza 
Aluno: Roberto Ricardo Rangel 
Matrícula: 19214070100 
 
 
Nova Iguaçu – RJ 
2022.1 
 
 
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1ª – QUESTÃO 
 
a) Enuncie a lei de Beer-Lambert. 
 
A lei de Lambert-Beer ou lei de Bouguer-Lambert-Beer – que se trata de uma 
compilação dos trabalhos dos cientistas Pierre Bouguer (1698-1758), Johann Lambert (1728-
1777) e August Beer (1825-1863) – diz que a intensidade de um feixe de luz monocromático 
decresce de modo exponencial à medida que a concentração da substância absorvente aumenta 
aritmeticamente; sendo utilizada em espectrofotometria para a determinação da concentração 
de diversas substâncias. 
 
b) Explique por que essa lei só é válida para amostras com baixas concentrações (em geral 
amostras com concentrações < 0,01 mol/L). 
 
Para concentrações superiores ao limite de linearidade existente na lei de Lambert-
Beer, a proporcionalidade linear entre a concentração e absorvância deixa de existir acarretando 
desvios. Isso é devido a interação que ocorre entre as moléculas em altas concentrações, 
interferindo na distribuição de carga e alterando o coeficiente de absorvidade molar (). 
 
c) Considere uma amostra com volume e concentração conhecidos. Uma alíquota dessa amostra 
apresentou um determinado valor de absorbância quando lida no espectrofotômetro em um 
comprimento de onda específico. Se adicionarmos água destilada a essa amostra de modo que 
seu volume dobre de valor, o que se pode esperar do seu valor de absorbância em relação ao 
valor da absorbância da amostra original quando uma alíquota de mesmo valor dessa amostra 
for lida no espectrofotômetro com o mesmo comprimento de onda? Explique a partir da 
interpretação da Iei de Beer-Lambert. 
 
 Segundo a lei de Lambert-Beer a absorvância varia linearmente com a concentração, 
e ao dobrarmos o volume da amostra reduzimos sua concentração a metade da concentração 
original; logo podemo supor que a sua absorvância neste mesmo comprimento de onda 
também caia pela metade. 
 
 
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2ª – QUESTÃO 
Uma amostra contendo um determinado analito com absortividade molar igual a 554 L.mol-1cm-
1 foi lida em um espectrofotômetro, apresentando valor de absorbância igual a 0,368 em uma 
célula de amostra de espessura 1,00 cm. 
 
a) Determine a concentração (em molL-1) do analito. 
 
A = bC 
0,368 = 554 × 1,00 × C 
C = 
0,368
554
 
C = 6,64×10-4 mol∙L-1 
 
b) Determine o valor da transmitância dessa amostra. 
log
1
T
= A 
log
1
T
= 0,368 
log T-1 = 0,368 
-log T = 0,368 
T = 10-0,368 
T = 0,449 
 
c) Se substituirmos a célula de amostra por outra de espessura 1,50 cm, qual será o valor de 
absorbância lido no espectrofotômetro? 
A = bC 
A = 554  1,50  6,6410-4 
A = 0,552 
 
3ª – QUESTÃO 
Seu grupo de laboratório de Química VI fará a leitura das absorbâncias de uma determinada 
amostra em diferentes concentrações e, para isso, vocês necessitam selecionar no 
espectrofotômetro o comprimento de onda mais adequado de modo a minimizar os erros na 
análise que irão realizar. O gráfico a seguir apresenta valores de absorbância dessa amostra em 
diferentes comprimentos de onda. De acordo com o gráfico, qual comprimento de onda deverá 
ser selecionado para a análise? Explique. 
 
 
3 
 
 
 
 
Para que se tenha uma seletividade para o método, com boa sensibilidade nas medidas 
e garantia da linearidade da lei de Lambert-Beer, é muito importante que a radiação absorvida 
esteja limitada a uma faixa estreita de comprimentos de onda; neste caso a 530nm. 
 
 
4ª – QUESTÃO 
A tabela a seguir foi obtida a partir da leitura das absorbâncias de alíquotas com diferentes 
concentrações de uma amostra do corante metilorange. O espectrofotômetro foi ajustado para o 
comprimento de onda em 445nm. 
 
Tubo 
Concentração 
(mg/mL) 
Absorvância 
(445nm) 
Branco 0,0000 0,000 
1 0,0020 0,139 
2 0,0040 0,295 
3 0,0060 0,442 
4 0,0080 0,593 
5 0,0100 0,731 
 
a) A partir dos dados da tabela, construa o gráfico da curva padrão (curva de calibração), 
indicando a equação e o coeficiente de determinação (R²). 
 
4 
 
 
 
b) O que significa o coeficiente de determinação na curva? 
 
O coeficiente de determinação, também chamado de R², é uma medida de ajuste de 
um modelo estatístico linear generalizado aos valores observados de uma variável aleatória. Seu 
valor varia entre 0 e 1 e pode ser expressado em termos percentuais, indicando o quanto o 
modelo linear é mais explicativo, ou seja, o quanto melhor ele se ajusta à amostra. No nosso 
caso temos uma regressão linear com um R2 = 0,9997 ou 99,97%. 
 
c) Utilizando a curva padrão, qual o valor aproximado da concentração de uma determinada 
alíquota do corante quando o valor de absorbância lido no espectrofotômetro for 0,625? 
 
y = 73,771x - 0,0022 
x = 
y + 0,0022
73,771
 
Concentração = 
Absovância + 0,0022
73,771
 
Concentração = 
0,625 + 0,0022
73,771
 
Concentração = 0,0085 mgmL-1 
 
 
 
y = 73,771x - 0,0022
R² = 0,9997
0,000
0,100
0,200
0,300
0,400
0,500
0,600
0,700
0,800
0,0000 0,0020 0,0040 0,0060 0,0080 0,0100
A
b
so
rv
ân
ci
a 
(4
45
nm
)
Concentração (mg/mL)
Curva de Calibração
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
ARAÚJO FILHO, HIRAM DA COSTA et al. Análise Instrumental [recurso eletrônico]: Uma 
Abordagem Prática, 1ª Edição / texto e organização Hiram da Costa Araújo Filho, Ademário 
Iris da Silva Junior; coautores Adney Luís Anjos da Silva ... [et al.]; coordenação Nival Nunes 
de Almeida. Rio de Janeiro: LTC, 2021.