RELATORIO - REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS (PRÁTICA 2)

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UNIVERSIDADE PRESBITERIANA MACKENZIE 
Escola de Engenharia 
Curso de Química 
 
 
 
 
 RELATORIO - REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE 
AMINOÁCIDOS (PRÁTICA 2) 
 
 
 
 
Tayna Costa de Jesus, 41990765 
 
 
 
 
SÃO PAULO 
1º/2022 
 
Tayna Costa de Jesus, 41990765 
06N11 
 
 
 
RELATORIO - REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS 
(PRÁTICA 2) 
 
 
 
 
 Trabalho para obtenção de nota 
na disciplina de Bioquímica I, 
professor Marcos Antonio 
Fazio. 
 
 
 
 
SÃO PAULO 
1º/2022 
Sumário 
 
1. Objetivo da Prática .............................................................................................................. 2 
2 Parte experimental ............................................................................................................... 5 
EXPERIMENTO 01 – Determinação de Aminoácidos Sulfurados ....................................... 5 
EXPERIMENTO 02 – Reação de Millon............................................................................... 5 
EXPERIMENTO 03 – Reação de Hopkins-Cole ................................................................... 6 
EXPERIMENTO 04 – Reação de Sakagushi ......................................................................... 6 
EXPERIMENTO 05 – Reação de Ninhidrina ........................................................................ 7 
3 Resultados e Discussão ....................................................................................................... 8 
4 Conclusões ........................................................................................................................ 10 
5 Questionário ...................................................................................................................... 11 
6 Bibliografia........................................................................................................................ 16 
 
 
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1. Objetivo da Prática 
Identificar a presença de alguns -aminoácidos por intermédio de reações características. 
2. Introdução 
Na bioquímica os α- aminoácidos são aqueles em que as funções amino (NH2) e 
carboxila (COOH) estão ligadas ao mesmo carbono, chamado de carbono alfa. Eles apresentam 
dois grupos que podem sofrer protonação (adição de H+) e desprotonação (retirada de H+). 
Ligados ao átomo de carbono também tem um átomo de hidrogênio (H) e um radical ou cadeia 
lateral R. Tendo como exceção a glicina onde o grupo-R é o hidrogênio e a presença de outro 
hidrogênio (-H) ligados ao átomo de carbono-α. 
 
Figura 1- Formula geral dos aminoácidos - 
https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Fmundoeducacao.uol.com.br%2Fbiol
ogia%2Faminoacidos.htm&psig=AOvVaw33bs8-
UnxLm6Z3k9OR0HIg&ust=1646234454845000&source=images&cd=vfe&ved=0CAwQjhxqF
woTCLDi8L-bpfYCFQAAAAAdAAAAABAD 
São conhecidos 20 aminoácidos (Alanina, Arginina, Aspartato, Asparagina, Cisteína, 
Fenilalanina, Glicina, Glutamato, Glutamina, Histidina, Isoleucina, Leucina, Lisina, 
Metinonina, Prolina, Serina, Tirosina, Treonina, Triptofano e Valina). 
Os aminoácidos podem ser divididos em essenciais e não essenciais. Os aminoácidos 
essenciais são aqueles que os seres humanos não têm a capacidade de sintetizar ou sintetizam 
em quantidades insuficientes para suprir as necessidades, sendo então obtidos pela dieta. Tendo 
como exemplos os aminoácidos essenciais são valina, leucina a isoleucina, treonina, metionina, 
lisina, histidina e arginina. 
3 
 
 
Figura 2- Exemplos de aminoácidos Essenciais - 
https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Fbrasilescola.uol.com.br%2Fbiologia%2Faminoacidos.h
tm&psig=AOvVaw3KxhLQl9-
sIE_PFfDLNeDk&ust=1646245436318000&source=images&cd=vfe&ved=0CAwQjhxqFwoTCJCV66zEpfYCFQA
AAAA 
Os aminoácidos não essenciais são aqueles que os seres humanos têm a capacidade de 
sintetizar em seu organismo. Exemplos de aminoácidos não essenciais são a alanina, arginina, 
asparagina, ácido aspártico, cisteína, ácido glutâmico, glutamina, glicina, prolina, serina e 
tirosina. 
Os aminoácidos naturais apresentam uma configuração do carbono assimétrico L e os 
que não são naturais uma configuração D, onde L e D são enantiômeros um do outro e os 
aminoácidos que compõem as proteínas em nossos corpos são todos L-aminoácidos. 
O estudo da composição e polaridade do grupamento R possibilita classificar em 
Aminoácidos com grupamento R apolar (hidrofóbicos ou insolúveis em água), polar neutro 
(hidrofílico ou solúveis em água), polar com carga negativa (ácido) e polares com carga positiva 
(básico). A polaridade será a capacidade de um grupo químico formar polos elétricos que 
possibilitam que esse grupo se solubilize em água interagindo com ela por ligações de 
hidrogênio. 
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Os aminoácidos apolares são os menos solúveis por conta da ausência de grupamentos 
hidrofílicos no grupamento R, sendo formados em sua maioria por hidrocarbonetos. Nessa 
classificação se encontra a L-alanina, L-valina, L-leucina, L-fenilalanina, Lprolina, L-
triptofano, L-metionina e L-isoleucina e glicina. A alamina trata-se do aminoácido mais solúvel 
deste grupo e a glicina é o mais simples, por possuir no R apenas um átomo de hidrogênio, em 
alguns casos a glicina é classificada como polar, pois o grupamento funcional possibilita certa 
solubilidade. A glicina é o único aminoácido que não possui carbono assimétrico. 
 
Figura 3 Aminoácidos apolares ou hidrofóbicos - 
https://cesad.ufs.br/ORBI/public/uploadCatalago/11280916022012Bioquimica_aula_3.pdf 
Os aminoácidos polares são solúveis em água porque apresentam em suas cadeias 
laterais grupos polares como OH, NH e C=O, que fazem ligações de hidrogênio com a água. 
Os aminoácidos polares neutros/com grupamento R polar não-carregado, possuem 
grupos R que são hidrofílicos na cadeia carbonada que não se ionizam, porem possibilitam 
maior solubilidade ao aminoácido. Nessa classificação se encontra a serina, L-treonina, L-
cisteína, L-asparagina, L-tirosina e L-glutamina. A cisteína e tirosina tem o o grupamento R 
mais polares, por consequência os mais solúveis desses. 
Os aminoácidos polares ácidos (com carga liquida negativa) são aqueles que em um pH 
de 7,0 apresentam grupos R com carga líquida negativa. Nessa classificação se encontra o L-
aspartato e L-glutamato. Cada um deles possui na cadeia lateral um segundo grupo carboxila 
ionizado em pH 7,0 adquirindo carga negativa no grupamento carboxila (- COO-). 
Os aminoácidos polares básicos (com carga liquida positiva) são aqueles que em um pH 
de 7,0 os grupos R apresentam carga positiva líquida e em pH neutro, esses grupos estão 
protonados, sendo denominados então de aminoácidos básicos. Nessa classificação se encontra 
a lisina, arginina e histidina. 
 
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2 Parte experimental 
 
EXPERIMENTO 01 – Determinação de Aminoácidos Sulfurados 
Reagentes: 
 Solução de albumina 10 mg∙mL-1 
 Solução de NaOH 6M 
 Ácido acético glacial 
 Acetato de chumbo 10% Cys Met 
Procedimento: 
Foi colocado no interior de um tubo de ensaio 1,0 mL da solução de albumina e em 
outro tubo 1,0 mL de água destilada (que é usado como controle), foi adicionado lentamente 1 
mL de NaOH 6 M aos dois tubos. A seguir foi aquecido os tubos em chama direta com auxílio 
de uma pinça de madeira (tomando cuidado para não superaquecer os tubos). Adicionando 3 
gotas de ácido acético glacial e 3 gotas de acetato de chumbo 10% em cada um dos tubos e por 
fim foi feito as anotações. 
EXPERIMENTO 02 – Reação de Millon 
 
Esse ensaio é utilizado par identificação do aminoácido tirosina (Tyr), que é o único 
aminoácido que possui um grupo fenólico. Os fenóis quando aquecidos com sais de mercúrio 
em presença de ácido nítrico sofrem nitração formando compostos de coloração vermelho 
tijolo. 
Reagentes: 
 Solução de Albumina 10 mg/mL 
 Reativo de Millon Tyr 
Procedimento: 
Foi colocado em um tubo de ensaio 2,0 mL da solução de albumina e em outro tubo 2,0 
mL de águadestilada (que é usado como controle). Adicionado a ambos os tubos 1 mL do 
Reativo de Millon e Aquecido os tubos em chama direta por 30 segundos com o auxílio de uma 
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pinça de madeira (tomando cuidado para não superaquecer os tubos). Por fim foi observado e 
anotado os resultados. 
 
EXPERIMENTO 03 – Reação de Hopkins-Cole 
 
Esse ensaio é utilizado para identificar o aminoácido triptofano. Na reação de Hopkins-
Cole as proteínas que possuem triptofano, reagem com o ácido glioxílico e pela ação do ácido 
sulfúrico concentrado formam compostos de cor violeta na interface das soluções. 
Reagentes: 
 Solução de Albumina 10 mg/mL 
 Reativo de Hopkins-Cole 
 Ácido sulfúrico concentrado Trp 
Procedimento: 
Foi colocado em um tubo de ensaio 1 mL de albumina e em outro tubo 1 mL de água 
destilada (que é usado como controle). Adicionado em ambos os tubos 3 mL do Reativo de 
Hopkins-Cole, por fim foi adicionado lentamente pela parede interna de cada tubo 2 mL de 
ácido sulfúrico concentrado. Depois de ter aguardado alguns minutos foi observado o resultado. 
 
EXPERIMENTO 04 – Reação de Sakagushi 
 
Esse ensaio é utilizado para identificar o aminoácido arginina. Na reação de Sakagushi 
as proteínas que contém arginina, apresentam coloração vermelha quando tratadas com -naftol 
e hipoclorito de sódio. 
Reagentes: 
 Solução de Albumina 10 mg/mL 
 Solução de NaOH 2,5 M 
 -naftol (0,4% em etanol) 
 Hipoclorito de sódio (6-7%) Arg 
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Procedimento: 
Foi colocado em um tubo de ensaio 1 mL de albumina e em outro tubo 1 mL de água 
destilada (que é usado como controle), a seguir foi adicionar em ambos os tubos 1 mL de NaOH 
2,5 M, 0,5 mL do -naftol e 1 mL de hipoclorito. Depois de agitado foi interpretado e anotado 
os resultados. 
 
EXPERIMENTO 05 – Reação de Ninhidrina 
 
Essa reação é clássica para identificar -amino grupo livre e possibilita a identificação 
quantitativa de aminoácidos. 
Reagentes: 
 Solução de Albumina 10 mg/mL. 
 Solução de ninhidrina 0,1%. 
Procedimento: 
Foi colocado em um tubo de ensaio 1 mL de albumina e em outro tubo 1 mL de água 
destilada (que é usado como controle); adicionado a ambos os tubos 3 mL da solução de 
ninhidrina e por fim os tubos foram levados em banho-maria fervente por 3 minutos para ser 
observada a coloração formada. 
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3 Resultados e Discussão 
Para ser realizada as determinações foi feito ensaios qualitativos. 
EXPERIMENTO 01 – Determinação de Aminoácidos Sulfurados 
No primeiro experimento após o aquecimento de proteína em meio alcalino resulta na 
liberação de enxofre, por conta da cisteína e a metionina. A presença do enxofre é evidenciada 
pela adição de acetato de chumbo, por conta do precipitado castanho de sulfeto de chumbo. A 
solução com proteínas apresentou coloração castanha, porém não ocorreu o mesmo na solução 
controle, que foi utilizada água destilada. 
 
Figura 4 foto do experimento de determinação de aminoácidos sulfurados tirada em laboratório 
EXPERIMENTO 02 – Reação de Millon 
No tubo onde havia a presença da proteína, após o aquecimento foi observada uma 
coloração salmão, por conta do aquecimento dos fenóis presentes na tirosina. Já no qual havia 
água destilada, mesmo após o aquecimento a solução manteve-se incolor. 
 
Figura 5 foto do experimento de reação de Millon tirada em laboratório 
 
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EXPERIMENTO 03 – Reação de Hopkins-Cole 
No tubo no qual havia proteína, houve a mudança da coloração da solução para um tom 
violeta e a formação de um anel, ocorreu pelo fato de que a solução utilizada continha triptofano 
que reage com o ácido glioxílico, formando compostos de coloração violeta em sua interface. 
Já no tubo que havia apenas água destilada não foram observadas, pois a reação ocorre somente 
na presença de proteínas que contém triptofano. 
 
Figura 6 Reação do experimento de Hopkins-Cole 
 
EXPERIMENTO 04 – Reação de Sakagushi 
No tubo em que havia a proteína, a substância adquiriu coloração avermelhada intensa, 
devido a presença de arginina na solução, que apresenta essa coloração depois da utilização dp 
α-naftol e hipoclorito de sódio. Já no que havia a presença da água a substância apresentou uma 
coloração meio castanha, pelo fato de que não havia proteína para que houvesse reação. 
 
Figura 7 foto do experimento de reação de Sakagushi tirada em laboratório 
EXPERIMENTO 05 – Reação de Ninhidrina 
Na reação de ninhidrina há a formação de um composto roxo/ azul-violeta, pois ela reage 
com o grupamento amina presente nos aminoácidos. No caso da prolina que são iminoácidos, 
forma-se um produto de coloração amarelada. Sua coloração pode ser mais ou menos intenso 
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dependendo das concentrações dos aminoácidos presentes, no que foi feito em laboratório foi 
possível ver uma coloração azulada. No caso do que tinha agua não apresentou alteração de 
coloração por conta da falta de presença do aminoácido. 
 
Figura 8 foto do experimento de Reação de Ninhidrina tirada em laboratório 
4 Conclusões 
O objetivo principal desse relatório foi determinar a presença de alguns -aminoácidos 
por intermédio de reações características, para chegar a esse objetivo foram utilizados cinco 
experimentos que são os de: Determinação de Aminoácidos Sulfurados, reação de Millon, 
reação de Hopkins-Cole, reação de Sakagushi e reação de Ninhidrina. A partir dos resultados 
observados, conclui-se que é possível determinar a presença de proteínas em solução com o 
auxílio de algumas reações químicas conhecidas, bem como a natureza de alguns aminoácidos 
presentes nestas proteínas. 
Pela realização do experimento de Determinação de Aminoácidos Sulfurados, foi 
evidenciada a liberação de enxofre. Através da realização do experimento de reação de Millon, 
foi possível determinar que apenas as proteínas que contém tirosina dão positiva. No caso do 
experimento de reação de Hopkins-Cole foi possível foi possível concluir que a reação de só 
ocorre na presença de proteínas que contém triptofano. Já no caso da reação de Sakagushi foi 
possível concluir que ocorre apenas em meio a arginina. 
No experimento da reação de Ninhidrina teve a formação de compostos de coloração 
azulada pois ela reage com o grupamento amina presente nos aminoácidos. 
Dessa forma, conclui-se que os resultados obtidos foram os esperados. 
 
 
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5 Questionário 
1) Escreva a fórmula estrutural dos seguintes aminoácidos em pH 7,4: 
a) Leu b)Trp 
 
 
c)Thr d) Ser 
 
e) Arg f) Lys 
 
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g) Asp h) Tyr 
 
 
 
2) Dos aminoácidos citados acima, indique quais são classificados como: 
a) Polares ácidos 
Ácido aspártico (Asp) pois o grupo R é uma cadeia lateral com carga negativa e possui 
grupo carboxila. 
b) polares básicos 
Lisina (Lys) e arginina (Arg) todos possuem grupamento R de 6 carbonos, o grupo R é 
uma cadeia lateral básica, carregada positivamente e possuem grupo amino. 
c) polares neutros 
A treonina (Thr), a serina (Ser) e a tirosina (Tyr) pois possuem grupamento hidrofílico 
na cadeia carbonada que não se ionizam, porém lhe confere maior solubilidade. Se encontrando 
no R a Hidroxila. 
d) apolares 
A leucina (Leu), pois além de apresentar uma cadeia alifática hidrocarbonada, ela não 
possui grupamentos hidrofílicos. 
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O triptofano (Trp) pois além da presença do anel aromático ocorre a ausência de 
grupamentos hidrofílicos no grupamento R 
 
e) indique o índice hidropatico de cada aminoácido criado na questão 1. 
O índice hidropático dos aminoácidos reflete a tendência que as suas cadeias laterais têm 
para interagir com o meio aquoso, quanto mais negativo for o índice maior é a contribuição 
hidrofílica (polar)e quanto mais positivo maior a contribuição hidrofóbica (apolar) . 
Leu = 3,8 (sendo assim por apresentar o índice mais positivo, maior é a contribuição 
hidrofóbica) - A leucina não possui grupamentos hidrofílicos e faz parte dos apolares 
Thr = -0,7 
Ser = -0,8 
Trp = -0,9 
Tyr = -1,3 
Asp = -3,5 
Lys = -3,9 
Arg = -4,5 (sendo assim por apresentar o índice hidropatico mais negativo, maior é a 
contribuição polar (hidrofílica) 
3) Justifique as respostas do item anterior baseados em argumentos bioquímicos. 
Os aminoácidos são compostos anfótero, ou seja, em meio ácido agem como base, 
aceitando prótons, ionizando o grupo amina e em meio básico agem como um ácido 
doando prótons, ionizando o grupo carboxila, Como os aminoácido tem um grupo 
carboxila e um grupo amino, eles podem ser classificados de acordo com a estrutura da 
cadeia lateral em neutros, ácidos ou básicos 
4) Escreva a equação da reação química completa de formação dos dipeptídeos formados 
pelos seguintes aminoácidos: 
 
 
 
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a) Val e Lys. 
 
b) Ser e Arg. 
 
c) Asn e Tyr. 
 
 
 
 
 
 
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5) Escreva as fórmulas estruturais dos aminoácidos, presentes no peptídeo abaixo, na 
Configuração L. 
 
 
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6 Bibliografia 
1. https://cesad.ufs.br/ORBI/public/uploadCatalago/11280916022012Bioquimica_aula_
3.pdf 
2. https://cesad.ufs.br/ORBI/public/uploadCatalago/12175810072012Quimica_Biomolec
ulas_aula_3.pdf 
3. http://www2.fct.unesp.br/docentes/edfis/ismael/nutricao/Amino%E1cidos%20e%20pr
ote%EDnas%20pgs%209%20a%2013%20e%2017.pdf 
4. https://gostamosdebioquimica.files.wordpress.com/2011/04/aminoc3a1cidos-e-
peptideos.pptx#:~:text=Hidropatia%3A%20um%20%C3%ADndice%20de%20hidrop
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