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2 ENFERMAGEM ANA DAYAN DE ALEXANDRE ARAUJO, ESTER BISPO FREIRE, LARISSA CUNHA RODRIGUES. Prática n° 02 (24/02/2022): PRÁTICA N° 02 (PROPRIEDADES DOS AMINOÁCIDOS) Disciplina Professor: ANDREWS MARQUES VILA VELHA MARÇO - 2022 ANA DAYAN DE ALEXANDRE ARAUJO, ESTER BISPO FREIRE, LARISSA CUNHA RODRIGUES. PRÁTICA N° 02 (PROPRIEDADES DOS AMINOÁCIDOS) Relatório do Curso de Graduação em curso apresentado à Universidade Vila Velha - UVV, como parte das exigências da Disciplina de Bioquímica sob orientação do Professor Andrews Marques. VILA VELHA MARÇO - 2022 INTRODUÇÃO Aminoácidos são as unidades formadoras das proteínas, podemos dividi-los em duas grandes categorias: aminoácidos essenciais e aminoácidos não essenciais. Os aminoácidos são os blocos de construção de todas as proteínas. Existem 20 tipos diferentes de aminoácidos que formam essas importantes macromoléculas, cada uma com propriedades específicas. É importante ressaltar que independente dos organismos estudados, suas proteínas são formadas a partir dos mesmos 20 aminoácidos. RESULTADOS Após a realização dos experimentos propostos na aula prática, foi possível chegar aos resultados sugeridos como objetivo final da experiência prática. Nesse tópico serão apresentados os resultados obtidos com os experimentos. REAÇÃO DE NINIDRINA: REAÇÃO GERAL: Quando se aquecem aminoácidos em soluções que contém excesso de ninidrina, aqueles que possuem grupamento amino livre estabelecem um composto púrpura, também conhecido como Púrpura de Rüehmann. Essa reação também pode ser usada para detectar peptídeos e proteínas que possuem essa característica. No entanto, existem dois aminoácidos que excedem essa reação: a prolina e a hidroxiprolina, que são denominados iminoácidos, a ninidrina reage com esses aminoácidos e forma um composto amarelo. A intensidade da cor gerada é proporcional à concentração de aminoácidos, peptídeos ou proteínas presentes. REAÇÃO DE FOLIN: CARACTERIZAÇÃO DE HIDROXILA FENÓLICA: é uma mistura de fosfotungstato e fosfomolibdato, utilizado para determinar antioxidantes fenólicos e polifenólicos. Esse reagente atua medindo a quantidade de matéria analisada necessária para a inibição da oxidação do reagente. Ao ver o resultado do experimento, pode-se ver claramente a diferença da coloração das reações. Dessa forma, podemos afirmar que a mudança na coloração do tubo que contém a tirosina acontece por conta da presença de grupo fenólico. REAÇÃO DE ERLICH: CARACTERIZAÇÃO DE GRUPO INDÓLICO O reativo de Ehrlich é um reagente contendo p-dimetilaminobenzaldeído, que pode ser utilizado em testes bioquímicos para identificar o aminoácido triptofano em amostras de proteínas. A alteração que ocorre na positivação desse teste dá-se no indol ou no anel benzil pirrol do triptofano para proporcionar um produto de condensação avermelhado. REAÇÃO XANTOPROTEICA: CARACTERIZAÇÃO DE GRUPO AROMÁTICO O benzeno reage lentamente com o ácido nítrico concentrado (HNO 3) para produzir n itrobenzeno. Essa reação po de ser acelerada por aquecimento. Portanto, os aminoácidos com anéis de benzeno em suas cadeias laterais, e proteínas ou peptídeos com esses aminoácidos em sua composição, podem reagir com o ácido nítrico para produzir compostos amarelos. No entanto, a cor amarela está presente em meios ácidos. é possível observar uma mudança na coloração de apenas um dos tubos de ensaio. Isso acontece devido a aceleração da reação do anel benzênico presente no aminoácido tirosina com o ácido nítrico resultando no composto amarelo visto nesse experimento. REAÇÃO DE SAKAGUCHI: CARACTERIZAÇÃO DE GRUPO GUANIDÍNICO Essa reação tem como propósito verificar a presença da arginina e prolina nas soluções.Nesse procedimento, a arginina reage em me io alcalino com o α-naftol e hipoclorito e hidróxido de sódio, resultando em um produto de coloração avermelhada, enquanto o tubo de ensaio com a solução de glicina apresentou uma coloração amarelada. Após a realização de todas as etapas realizado no laboratório, observamos a reação positiva com a arginina pela sua coloração avermelhada. CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS SULFURADOS A reação de caracterização de aminoácidos sulfurados utiliza o a aquecimento das proteínas no meio alcalino resultando na liberação do enxofre da cisteína sob a forma de sulfato. Esse sulfato é destacado por conta da adição do acetato de chumbo. ocasionando em um precipitado castanho ou preto de sulfeto de chumbo. A solução proteica manifestou uma coloração escura, o mesmo não podendo ser observado na reação controle, que possui glicina ao invés da cisteína, e mantendo-os em banho Maria por mais 3 minutos obtemos uma reação positiva. Pode-se observar a mudança de cor no tubo que contém a cisteína para um precipitado negro. CONCLUSÃO: Ao finalizar todas os experimentos, podemos concluir que por meio de reações é possível identificar aminoácidos que possuem certos grupos ou cadeias laterais que identificam esses aminoácidos.
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