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CENTRO UNIVERSITÁRIO AUTÔNOMO DO BRASIL-UNIBRASIL ALINE EDUARDA DE MORAES ANA CARLA FIORESE ROCHA VICTÓRIA ARISTIA SALAS LABRES DE OLIVEIRA CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS Curitiba - Paraná 2021 ALINE EDUARDA DE MORAES ANA CARLA FIORESE ROCHA VICTÓRIA ARISTIA SALAS LABRES DE OLIVEIRA CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS Relatório de aula prática apresentado ao Curso de Biomedicina do Centro Universitário Autônomo do Brasil-UniBrasil Orientadora: Michelle Zibetti Tadra Sfeir Curitiba - Paraná 2021 INTRODUÇÃO TEÓRICA Aminoácidos são unidades estruturais básicas das proteínas. Existem 20 deles, podendo classifica-los como essenciais ou naturais. Dessa maneira, podem ser essenciais, os quais devem ser ingeridos, e naturais que o organismo produz. Em vista disso, peptídeos são aminoácidos unidos por ligações peptídicas (carboxila de um aminoácido com a amina de outro) e quando esses possuem mais de 70 aminoácidos, recebem o nome de proteína. As proteínas são formadas por milhares de aminoácidos e pode-se afirmar que são necessárias na composição de todas as células, ou seja, são muito importantes para o bom funcionamento do organismo. OBJETIVOS Identificar a presença de peptídeos na amostra através do reativo de biureto. evidenciar a presença de resíduos de tirosina e triptofano na solução de ovoalbumina testada. A primeira prática consiste em colocar 2 mL de reativo de biureto em dois tubos de ensaio, após isso, no tubo A1 1 mL de água destilada e no tubo A2 juntar 1 mL de ovoalbumina. A segunda prática se baseia em no tubo B1 adicionar água e 10 gotas de ácido nítrico, leva-lo para banho maria e logo depois colocar 4ml de solução de hidróxido de sódio. Além disso, o tubo B2 consistia em pipetar 1 mL de ovoalbumina e em seguida adicionar 10 gotas de ácido nítrico, posteriormente levar em banho maria por 5 minutos e logo após acrescentar 4 mL da solução de hidróxido de sódio. RESULTADOS Após a primeira atividade, os resultados obtidos mostraram que o tubo A1 não houve alteração, ou seja, negativo para proteína. Já no tubo A2 houve alteração de cor, a solução se tornou violeta indicando positividade para proteína. A segunda atividade trouxe os seguintes resultados, no tubo B1 não houve reação, a solução continuou possuindo cor clara. Entretanto, o segundo tubo apresentou uma solução de cor amarelada, positivando para proteína. PESQUISA 1. Em que se baseia a reação do biureto? A reação do Biureto é o resultado da formação de um complexo entre Cu2+ e as proteínas ou peptídeos com mais de dois aminoácidos. As ligações peptídicas são ligações amida, e o par de elétrons dos átomos de nitrogênio das amidas encontram- se disponíveis, podendo servir de ligante para o átomo de cobre II. O sulfato de cobre II em meio alcalino apresenta coloração azul clara, na presença de proteínas ou peptídeos forma produto violeta caracterizando a formação do complexo de coordenação entre o cobre e os átomos de nitrogênio das ligações peptídicas adjacentes, agindo como um ligante bi dentado. Os dipeptídeosdão reação negativa por apresentarem apenas uma ligação peptídica. Os aminoácidos também dão reação negativa por não apresentarem ligação peptídica. Os grupos amino livres não coordenam com o cobre, pois em pH 7,0 encontram-se protonados na forma de - NH3+, não tendo elétrons disponíveis para doar. 2. Em que se fundamenta a reação xantoprotéica e que grupos de aminoácidos são responsáveis por esta reação? A reação xantoprotéica é um método que pode ser usado para determinar a quantidade de proteína solúvel em uma solução, usando ácido nítrico concentrado. O teste dá um resultado positivo em aminoácidos que transportam grupos aromáticos, especialmente na presença de tirosina. Se o teste for positivo, a prova é neutralizada com um álcali, ficando amarelo escuro. A cor amarela é devida ao ácido xantoproteico que é formado devido à nitração de certos aminoácidos, sendo os exemplos mais comuns a tirosina e o triptofano. Esta reação química é um teste qualitativo, determinando a presença ou ausência de proteínas. 3. O que é proteinúria? A proteinúria é um marcador da doença renal e desempenha um papel importante na triagem, no diagnóstico e na monitorização das doenças renais. Estudos epidemiológicos demonstraram que a proteinúria é um fator de risco independente para eventos cardiovasculares e doença renal progressiva. Proteinúria é uma condição caracterizada pela presença de proteínas na urina, em uma quantidade superior ao normal. Está usualmente associada a algum tipo de doença ou anormalidade, mas, ocasionalmente, pode ser observada em adultos normais. O plasma, a porção líquida do sangue, contém diversas proteínas diferentes. Uma das funções dos rins é a conservação das proteínas plasmáticas. 4. Qual significado e importância da detecção da proteína de Bence-Jones em urina de indivíduos? As proteínas de Bence Jones são cadeias leves livres, ou seja, fragmentos, de imunoglobulinas monoclonais. Sua presença e quantificação na urina auxilia, principalmente, no diagnóstico do mieloma múltiplo, mas também é utilizado na macroglobulinemia de Waldenstrom, na doença de deposição de cadeia leve idiopática, no linfoma de linfócitos B e na amiloidose primária (AL). CONCLUSÃO Foram feitos quatro experimentos, divididos em dois grupos A1, A2 e B1, B2. Para o grupo A1 e A2 utilizamos ovoalbumina, ácido nítrico e hidróxido de sódio. Possibilitando observar que só houve reação no A2 devido à mudança de cor, indicando positividade para proteína. Já para o grupo B1 e B2 foi utilizado biureto, ovoalbumina e água destilada. Foi observado que somente o B2 houve mudança de cor, indicando também, positividade para proteína. Diante dos resultados, notamos que a ovoalbumina reage com o biureto no A2 após o banho maria e já no B2 notamos que a ovoalbumina reage com o ácido após o banho maria fazendo com que ambos alterem a cor. REFERÊNCIAS PEPTÍDEOS. Disponível em: https://brasilescola.uol.com.br/biologia/peptideos.htm O QUE SÃO PROTEÍNAS DE BENCE JONES E QUAL SUA IMPORTÂNCIA CLINICA? Disponível em: https://www.sanarmed.com/o-que-sao-as-proteinas-de- bence-jones-e-qual-a-sua-importancia-clinica-colunistas AVALIAÇÃO DE PACIENTES COM PROTEINÚRIA. Disponível em: https://www.medicinanet.com.br/conteudos/revisoes/7071/proteinuria.htm PROTEINÚRIA. Disponível em: https://labtestsonline.org.br/conditions/proteinuria CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS VIA MÉTODO DE BIURETO COMO PROPOSTA INTERDISCIPLINAR PARA O ENSINO DE QUÍMICA DE COORDENAÇÃO. Disponível em: https://if.ufmt.br/eenci/artigos/Artigo_ID524/v13_n5_a2018.pdf AMINOÁCIDOS, PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS EXPERIMENTAL. Disponível em: https://cesad.ufs.br/ORBI/public/uploadCatalago/12221710072012Quimica_Biomolec ulas_aula_5.pdf BERG, J. M.; TYMOCZKO, J. L; STRYER, L. Bioquímica. 7.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2014, 1162p Aulas teóricas.
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