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AtlAs de pArAsitologíA AtlAs de pArAsitologíA Primera edición 2011 MArthA Nelly MoNtoyA pAlAcio Víctor AlfoNso góMez cAlderiN soNiA del pilAr Agudelo lópez Medellín, Colombia. 2011 ©2011 por la Corporación para Investigaciones Biológicas, CIB. Reservados todos los derechos. Ni todo el libro, ni parte de él, puede ser reproducido, archivado o transmitido en forma alguna o mediante algún sistema electrónico, mecánico o de fotorreproducción, memoria o cualquier otro, sin permiso por escrito del editor. Todos los conceptos aquí expuestos son responsabilidad del autor. Primera edición 2011 ISBN 978-958-9076-57-6 Dirección General Dr. Diego Miguel Sierra Botero, MBA. Dirección del Fondo Editorial Dra. Lina María González Duque, MD., MSc. Corrección de texto Dra. Natalia Rendón Ñungo, MD. Diseño, diagramación y carátula Diana Cecilia Molina Molina Corrección sobre pruebas Dra. Lina María González Duque, MD., MSc. Índice analítico Dra. Natalia Rendón Ñungo, MD. Impresión y terminación PANAMERICANA formas e impresos S.A. ADVERTENCIA Se debe valorar la pertinencia de los conocimientos científicos publicados en cualquier libro de medicina antes de aplicarlos en la práctica clínica. Quien use esta obra debe consultar diferentes fuentes de información para tener la seguridad de que sus decisiones contengan actualizaciones sobre cambios en procedimientos, contraindicaciones y supresiones o nuevas emisiones de fármacos, además de garantizar las dosificaciones correctas. Por tanto, es el lector (no el autor ni el editor) el responsable del uso de la información aquí publicada y de los resultados que obtenga con ella. Hecho en Colombia/Manufactured in Colombia Corporación para Investigaciones Biológicas Teléfono: +57 (4) 441 08 55. Fax: +57 (4) 441 55 14 Internet: http://www.cib.org.co/fec Correo-e: fondoeditorialcib@cib.org.co Medellín, Colombia. La CIB es una entidad científica y académica creada el 21 de agosto de 1970 en la Universidad de Antioquia. Su primer laboratorio, independiente de la Universidad, inició labores en 1978, en el Hospital Pablo Tobón Uribe de Medellín. En 1995, la institución construyó su propia sede, un edificio de cuatro pisos (3.800 m2), en el cual se alojan el Fondo Editorial, el área administrativa, varios laboratorios de investigación y diagnóstico, un insectario, un bioterio, y las instalaciones requeridas para esterilización y preparación de medios de cultivo y reactivos. Cuando usted adquiere un libro del Fondo Editorial de la Corporación para Investigaciones Biológicas (CIB), contribuye a la investigación científica en las áreas médica y biotecnológica. La CIB es una institución privada, sin ánimo de lucro, dedicada a: Formación de investigadores La CIB trabaja permanentemente en la formación de universitarios interesados en la investigación, que proceden de varias universidades del país, y promueve su desarrollo en la disciplina científica. En programas de posgrado (maestrías y doctorados) tiene acuerdos de sociedad con las siguientes universidades: Pontificia Bolivariana, de Antioquia, del Rosario y Nacional de Colombia. En pregrado, capacita a médicos, biólogos, bacteriólogos, microbiólogos y auxiliares de laboratorio. Difusión del conocimiento Las investigaciones de la CIB se traducen en artículos científicos publicados en revistas indizadas, nacionales e internacionales, lo cual contribuye con el progreso de la ciencia mundial desde el ámbito latinoamericano. Los investigadores de la CIB participan, como autores y editores, en varios de los libros del Fondo Editorial que hoy cuenta con más de 50 títulos. Servicios de diagnóstico La CIB proporciona, a médicos y laboratoristas, ayuda en la ejecución y elaboración de exámenes diagnósticos especializados, en el campo de las enfermedades infecciosas. Además de los exámenes microbiológicos tradicionales, la CIB ofrece pruebas inmunológicas y moleculares, así como nuevas pruebas basadas en tecnologías rápidas (p. ej., PCR) que son de gran utilidad diagnóstica. Igualmente ha desarrollado pruebas rápidas para el aislamiento e identificación de micobacterias, así como para la determinación de la sensibilidad a medicamentos antituberculosos y antifúngicos, únicos en el país por su rapidez y confiabilidad. Investigación En la CIB creemos que la investigación representa un esfuerzo coordinado entre pares investigadores, jóvenes investigadores y estudiantes, auspiciado y coordinado por instituciones interesadas en el avance científico y tecnológico del país. La CIB abre caminos para los jóvenes interesados en la investigación y les ofrece acompañamiento en su trabajo, de manera que hacer ciencia se convierta para ellos en un proyecto de vida. A continuación presentamos las unidades de investigación del área de la salud de la Corporación: Micología médica y experimental. Respaldada por las Universidades de Antioquia y Pontificia Bolivariana, es considerada Centro de Referencia Nacional para el estudio y diagnóstico de las micosis, con más de 30 años de experiencia en el desarrollo de nuevas herramientas para el diagnóstico rápido y oportuno de estas enfermedades, lo que se traduce en beneficios para los pacientes. AcercA de lA ciB Bacteriología y micobacterias. Con el apoyo de la Universidad Pontificia Bolivariana, tiene una trayectoria de trabajo de más 20 años de experiencia, durante los cuales ha implementado métodos que permiten el diagnóstico rápido de la tuberculosis y la determinación de resistencia a Mycobacterium tuberculosis a los medicamentos específicos. Biología celular y molecular. Con más de 15 años de experiencia en programas referentes a la aplicación de la biología molecular y la genética de los agentes causales de micosis sistémicas, incluyendo la participación en el desarrollo del genoma del hongo patógeno humano Paracoccidioides brasiliensis. Cuenta además con una línea de investigación en hipertensión y riesgo cardiovascular, la cual se ha enfocado en el estudio de las causas genéticas de la hipertensión esencial y de los factores de riesgo cardiovascular. Centro clínico y de investigación SICOR. Institución de salud que aplica los conocimientos científicos y desarrollos tecnológicos en el área de la cardiología para la detección temprana, monitorización y tratamiento de los problemas cardiocirculatorios, y para la reducción de sus riesgos y complicaciones. SICOR transfiere a la comunidad los desarrollos de la línea de investigación en Hipertensión y Riesgo Cardiovascular de la Unidad de Biología Celular y Molecular. Unidad clínica y de investigación en micosis y tuberculosis. La Unidad Clínica tiene como objetivo la atención de pacientes con enfermedades producidas por hongos y micobacterias, principalmente, con el fin de optimizar su diagnóstico y tratamiento a través de estudios nacionales e internacionales que conducirán al desarrollo de nuevos medicamentos, nuevos protocolos y nuevas herramientas diagnósticas. El trabajo de la Unidad Clínica se hace en convenio con hospitales como el Hospital La María de Medellín. Desarrollo en biotecnología y biodiversidad La CIB también trabaja en la evaluación de bacterias y hongos utilizados en la producción de bioinsecticidas, así como en el desarrollo de plantas modificadas genéticamente para que se hagan resistentes a plagas y enfermedades. Énfasis especial se da al desarrollo de proyectos que buscan el conocimiento, la conservación y el uso sostenible de la biodiversidad de Colombia. Estos y otros proyectos de investigación, así como la prestación de servicios derivados de estos desarrollos, son adelantados por grupos de investigación en Fitosanidad y Control Biológico, Biotecnología Vegetal, Biodiversidad y el Laboratorio Central de Servicios, que presta apoyo en el área de diagnóstico y control para los sectores agroindustrial y agropecuario. Si desea conocer más sobre las líneas de investigación y los servicios de diagnóstico ofrecidospor la CIB, por favor ingrese a nuestra página web www.cib.org.co coMeNtArio de lA oBrA La Corporación para Investigaciones Biológicas celebra el lanzamiento del texto: Atlas de parasitología, en su primera edición. La CIB felicita a los editores: Martha Nelly Montoya Palacio, Víctor Alfonso Gómez Calderin y Sonia del Pilar Agudelo López. Su intensa labor en la coordinación de la obra permite que la comunidad científica de habla hispana tenga a su disposición un atlas muy bien ilustrado para el diagnóstico de las parasitosis humanas más importantes en Colombia y Latinoamérica. Su preparación académica, experiencia docente, asistencial e investigativa ofrecen al lector alta confiabilidad de los contenidos. Diego Miguel Sierra Botero, MBA. Dirección General Corporación para Investigaciones Biológicas Lina María González Duque, MD., MSc Directora del Fondo Editorial Corporación para Investigaciones Biológicas dedicAtoriA AgrAdeciMieNtos A todos los estudiantes y profesionales del área de la salud Los Editores “Queremos agradecer muy sinceramente a las personas e instituciones que nos acompañaron y apoyaron durante la realizacion de este Atlas: a todos los integrantes del Grupo de Parasitológía de la Universidad de Antioquia y a la Facultad de Medicina de la Universidad de Antioquia. Universidad de Antioquia, nuestra Alma Mater.” Los Editores editores Martha Nelly Montoya Palacio Bacterióloga y Laboratorista Clínica Universidad de Antioquia. Docente titular Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina Universidad de Antioquia. Investigador Grupo de Parasitología Universidad de Antioquia. Medellín, Colombia. Víctor Alfonso Gómez Calderin Microbiólogo y Bioanalista, Universidad de Antioquia. Magister en Ciencias Básicas Biomédicas, Universidad de Antioquia. Profesor de Cátedra, Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina Universidad de Antioquia. Profesor de Cátedra Fundación Universitaria San Martín. Medellín, Colombia. Sonia del Pilar Agudelo López Bacterióloga y Laboratorista Clínica Universidad de Antioquia. PhD en Parasitología de la Universidad de Barcelona, España. Docente Asociada Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina Universidad de Antioquia. Medellín, Colombia. prólogo En general las enfermedades parasitarias han sido vinculadas con el trópico, asociadas en su mayoría a condiciones ambientales poco salubres y muchas veces determinadas por un entorno socioeconómico desfavorable. En particular en las regiones menos desarrolladas, como el determinado por las condiciones de clima tropical- húmedo de nuestro país, lo cual representa una preocupación importante por el fuerte impacto que tiene en lo referente a las condiciones de salud, de amplios sectores de la población en Colombia y Latinoamérica. De acuerdo a los adelantos de la ciencia y la tecnología, se esperaría una reducción importante de la enfermedad parasitaria, no obstante, la sociedad actual está lejos de ser testigo de la desaparición de este tipo de enfermedades, por el contrario, en algunos casos se ha observado un aumento paulatino, favorecido por las facilidades de comunicación, la mayor movilidad, el turismo, la globalización en la distribución mundial de alimentos, además, del incremento de las condiciones que conducen a estados de inmunodeficiencias, como el cáncer, quimioterapia y sida. De esta manera, las parasitosis son responsables de una considerable morbilidad y mortalidad en los seres humanos y animales en todo el mundo, no sólo en países en vía de desarrollo como el nuestro sino en aquellos denominados, industrializados o del primer mundo. En este sentido, los profesionales del área de la salud, deben obtener un adiestramiento apropiado de las características clínicas y el diagnóstico de las parasitosis humanas, con el fin de responder a las demandas y expectativas de la sociedad. El diagnóstico parasitológico preciso, mediante exámenes directos, depende de la idoneidad con que se apliquen las técnicas y métodos especializados, no obstante, es más importante la experiencia del analista en el reconocimiento de la morfología de las diferentes estructuras que caracterizan a los parásitos. Por consiguiente, esta primera edición del Atlas de Parasitología constituye una guía actualizada, ilustrada y didáctica para el diagnóstico de las parasitosis humanas más importantes en Colombia y Latinoamérica, las especies más frecuentes y conocidas, las menos habituales, los parásitos “oportunistas” y las especies zoonóticas, bien sea por la morbi-mortalidad que ocasionan o por la frecuencia con la que se encuentran en la región. Debido a la estructura del Atlas, es de gran utilidad para el progreso de enseñanza-aprendizaje de los estudiantes y como manual de referencia para médicos, parasitólogos y profesionales de laboratorio clínico. Permite al lector y estudioso del tema conocer de manera resumida las características morfológicas más relevantes de las formas parasitarias que permiten hacer el diagnóstico. Debido a su abundante documentación gráfica, este Atlas se convierte en un elemento esencial para el reconocimiento visual de los diferentes estadios parasitarios. Entre las características mas sobresalientes de este Atlas de Parasitología de Montoya MN, Agudelo SP y Gómez V., se resaltan las siguientes: 1. Contiene más de 150 fotos (ilustraciones) extraordinarias en color. 2. Las “claves rápidas” para facilitar el reconocimiento y el diagnóstico correcto de los parásitos, 3. La descripción cuidadosa de la metodología y de los procedimientos diagnósticos en la práctica actual del laboratorio. Finalmente, la calidad fotográfica del Atlas, el valor personal y profesional de cada uno de los autores, así como su interés en profundizar en esta esfera del conocimiento, son motivo de orgullo para el país y en particular para la Facultad de Medicina de la Universidad de Antioquia. Jorge Humberto Botero Garcés Médico con Maestría en Inmunología. Profesor de la Facultad de Medicina de la U. de A. iNtroduccióN En Colombia, las enfermedades infecciosas tienen un alto impacto en la salud de la población siendo la más vulnerable, la que vive en condiciones de pobreza, incluyendo la extrema cuya victima principal es la población infantil. Las diferentes etiologías de estas enfermedades, la variable topografía de nuestro país, las cambiantes condiciones climáticas y ambientales, la presencia de vectores biológicos y mecánicos, los factores sociales y políticos, hacen difícil pensar en el control permanente de estas enfermedades. Por lo tanto, el tratamiento y el control dependen, en gran medida, del diagnóstico acertado que se haga. En este Atlas, se trata de mostrar muy cuidadosamente, mediante imágenes reales y guardando la fidelidad al tamaño y el color, todas las características morfológicas que permiten la identificación de los diferentes géneros parasitarios que infectan a los seres humanos, en algunos casos llegando hasta la identificación de especies. En la primera sección, se enfocan los protozoos que afectan el tracto gastrointestinal, tanto aquellos que se comportan como comensales, pero que cobran importancia epidemiológica, como los responsables de muchos procesos patológicos, asociados principalmente a las diarreas de diferentes características. En la segunda sección, se encuentra la descripción morfológica de los diferentes estadios de los Helmintos que infectan el tracto gastrointestinal y las vísceras asociadas a este. Las imágenes muestran en detalle la evolución y la morfología de huevos, los estadios larvarios y adultos de este grupo de patógenos y recalca los aspectos que muestran mayor relevancia en el diagnóstico. Finalmente, en la tercera sección del Atlas, se encuentra la descripción detallada de las características morfológicas de los diferentes estadios de los parásitos, pertenecientes a los génerosPlasmodium, Toxoplasma, Leishmania y Trypanosoma, se describen los diferentes estadios y las técnicas utilizadas para su identificación y diagnóstico. Víctor Alfonso Gómez Calderin Facultad de Medicina Universidad de Antioquia XIX UNIDAD I - Protozoos intestinales 1. Diagnóstico de los parásitos intestinales por el coprológico ......................................................... 3 2. Entamoeba histolytica/dispar ...................................................................................................... 11 3. Entamoeba coli ............................................................................................................................. 19 4. Entamoeba hartmanni ................................................................................................................. 23 5. Endolimax nana ........................................................................................................................... 27 6. Iodamoeba butschlii ..................................................................................................................... 33 7. Blastocystis hominis .................................................................................................................... .37 8. Balantidium coli .......................................................................................................................... 41 9. Giardia intestinalis, duodenalis o lamblia ................................................................................ 45 10. Chilomastix mesnili...................................................................................................................... 49 11. Cryptosporidium sp. ..................................................................................................................... 53 12. Cyclospora cayetanensis .............................................................................................................. 55 13. Isospora belli................................................................................................................................. 59 14. Microsporidios .............................................................................................................................. 65 UNIDAD II - Helmintos 15. Ascaris lumbricoides .................................................................................................................... 71 16. Trichuris trichiura ........................................................................................................................ 81 17. Uncinarias ...................................................................................................................................... 87 18. Strongyloides stercoralis .............................................................................................................. 95 19. Enterobius vermicularis (oxiuros) ............................................................................................. 105 20. Taenia solium o saginata ........................................................................................................... 111 21. Hymenolepis sp ........................................................................................................................... 117 22. Paragonimus sp .......................................................................................................................... 121 23. Fasciola hepática ........................................................................................................................ 123 24. Schistosoma sp ............................................................................................................................ 127 UNIDAD III - Protozoos tisulares 25. Diagnóstico de los parásitos tisulares ......................................................................................... 131 26. Plasmodium falciparum ............................................................................................................ 135 27. Plasmodium vivax ..................................................................................................................... 139 28. Toxoplasma gondii ..................................................................................................................... 151 29. Leishmania sp. ............................................................................................................................ 155 30. Trypanosoma cruzi ..................................................................................................................... 159 coNteNido UNidAd i Protozoos intestinales 1. Diagnóstico de los parásitos intestinales por el coprológico ........................................... 3 2. Entamoeba histolytica/dispar ......................................... 11 3. Entamoeba coli ................................................................ 19 4. Entamoeba hartmanni .................................................... 23 5. Endolimax nana .............................................................. 27 6. Iodamoeba butschlii ........................................................ 33 7. Blastocystis hominis ....................................................... .37 8. Balantidium coli .............................................................. 41 9. Giardia intestinalis, duodenalis o lamblia .................... 45 10. Chilomastix mesnili ......................................................... 49 11. Cryptosporidium sp. ........................................................ 53 12. Cyclospora cayetanensis .................................................. 55 13. Isospora belli .................................................................... 59 14. Microsporidios .................................................................. 65 D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s in te stin a le s p o r e l c o p ro ló g ic o 3 Atlas de Parasitología 1 1 Diagnóstico de los parásitos intestinales por el coprológico L os parásitos son agentes biológicos que viven a expensas de otro agente bioló- gico de diferente especie denominado hospedero. Están constituidos por agru- paciones moleculares (virus) o por una sola cé- lula (bacterias, ricketsias, hongos y protozoos) o por millones de células agrupadas en órga- nos y sistemas (artrópodos y metazoos). Para facilitar su conocimiento e investigación, el es- tudio de los agentes biológicos se ha separado en disciplinas; la Parasitología se encarga del estudio de los subreinos protozoo y metazoo (artrópodos y helmintos). Los protozoos son organismos unicelulares eucariotas, heterótrofos, de vida libre o pueden ser parásitos de plantas y animales vertebrados e invertebrados. Durante su ciclo biológico pa- san por los estadios de quiste y trofozoíto. Los protozoos que infectan al ser humano se clasi- fican en cuatro phyla: Sarcomastigophora (los que tiene movimiento por seudópodos o flage- los), Ciliophora (movimiento por cilios), Api- complexa (sin estructuras de movimiento pero con complejo apical y fases de reproducción asexual y sexual) y Microspora (sin estructuras para moverse pero con reproducción asexual por esporas). Los helmintos son animales invertebrados de vida libre o parásita, conocidos como gusa- nos. Durante su ciclo biológico pasan por los estadios de huevo, larva y adulto. Los helmintos de importancia para el hombre se clasifican en dos phyla: Phatyhelminthes que incluye todos los gusanos aplanados, sin cavidad corporal y aparato digestivo muy rudimentario. A este phylum pertenecen dos clases la Cestoda que incluye todos los gusanos en forma de cinta y la Digenea o gusanos en forma de hoja con ex- cepción del Schistosoma sp. que es un platel- minto de forma cilíndrica; y el phylum Nemato- da, son gusanos cilíndricos con cavidad corpo- ral y tubo digestivo simple pero completo.Los parásitos de ambos phyla tienen reproducción ovovivípara con excepción de las filarias que se reproducen por microfilarias. Los protozoos y los helmintos pueden tener diferentes hábitats en el hospedero y localizar- se dentro o fuera de las células. Sitios como el tubo digestivo, cavidades abiertas, órganos y te- jidos profundos incluyendo la sangre, pueden ser infectados por parásitos. Cuando los pará- sitos tienen como hábitat el tubo digestivo, el diagnóstico se puede hacer con la observación de cualquiera de sus estadios en las materias fe- cales, (coprológico directo). Es importante te- ner en cuenta que parásitos como Fasciola spp. y Paragonimus spp., que están alojados en el hígado o en pulmón respectivamente, también se pueden observar en las heces. Los protozoos a pesar de ser células peque- ñas de 3 a 100 μm pueden ser identificados a ni- vel de género e incluso de especie, en muestras en fresco con el microscopio óptico, debido a que la morfología de los estadios del ciclo vi- tal, varían de un género a otro y aun dentro de una misma especie. No obstante para llegar a la identificación de especie de algunos parásitos se hace necesario realizar tinciones especiales, que permiten la observación detallada de algu- nas estructuras que no se pueden ver en el co- prológico directo. Los helmintos tienen mayor tamaño que los protozoos y la mayoría de sus adultos se pue- den observar a simple vista; sin embargo, los estadios de huevos y larvas son más pequeños y requieren del microscopio de luz para hacer la identificación de género y en muchos de ellos hasta la especie; aunque en algunos casos para llegar a este último taxón se requiere realizar coloraciones especiales. El coprológico es el método de elección para el diagnóstico de los parásitos intestina- les, es un examen simple y específico que per- mite la visualización de los diferentes estadios 1 4 Atlas de Parasitología D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s in te st in a le s p o r e l c o p ro ló g ic o del ciclo vital que salen en la materia fecal, para el caso de los protozoos son quistes, ooquistes y trofozoítos y para los helmintos, huevos, lar- vas y adultos. La lectura de una sola muestra del paciente tiene una sensibilidad de 30% al 60%, pero ésta puede incrementarse, ya sea haciendo la lectura de varias placas de una misma mues- tra, realizando algún método de concentración o recolectando muestras de materia fecal de días intermedios (coprológico seriado). La eficacia del coprológico para el diagnós- tico de las parasitosis intestinales depende de varios factores: las condiciones que presenta el hospedero en el momento de la recolección de la muestra, la recolección de la muestra, el procesamiento de la misma y la destreza del observador. Condiciones del hospedero Para la recolección de la muestra de materia fecal el paciente no tiene que hacer ayuno ni dieta especial, además no debe haber ingeri- do laxantes aceitosos, ya que estos se eliminan en gotas de grasa que impiden la visualización de los parásitos, tampoco debe haber ingerido antiparasitarios, antibióticos, antiácidos ni sus- tancias utilizadas como medio de contraste. En caso de haberse ingerido cualquiera de las sus- tancias mencionadas, el paciente debe esperar, ocho días en el caso de los antiparasitarios y de tres a cuatro días en los otros casos, para la re- colección de la muestra. Recolección de la muestra Para la recolección de la muestra se recomien- da usar recipientes plásticos de tapa rosca (no es necesario que estén estériles), de boca an- cha, no debe estar contaminado con orina (el pH ácido mata las formas móviles), con agua ni con tierra (en éstas fuentes pueden existir formas de parásitos de vida libre que darían falsos positivos). La mejor muestra es la espontánea, la cual puede recogerse a cualquier hora del día y en caso de tener dificultades para su recolección se puede utilizar laxantes que no sean aceito- sos (laxantes salinos). El examen coprológico debe ser procesado en las dos horas siguientes, pero en caso de que la materia fecal no pue- da ser observada en ese tiempo, se recomienda utilizar conservantes, ya que la supervivencia del parásito fuera del organismo es limitada o puede variar su morfología, puede presentarse proliferación de bacterias y hongos y/o putre- facción de la muestra. El preservante se escoge de acuerdo al análisis que se vaya a realizar, es así como para directo, concentración y algunas coloraciones para coccidias y microsporidios, se puede utilizar la refrigeración a 4°C, máxi- mo por un día, y la formalina al 10%, sin límite de tiempo; el mertiolate-yodo-formol (MIF) se utiliza para cualquier técnica que no incluya ningún tipo de coloración debido a que los es- tadios parasitarios toman el lugol impidiendo la penetración de otro tipo de colorantes. El alcohol polivinílico (PVA), y el fijador de Shau- din, son los preservantes indicados cuando se necesite realizar coloraciones especiales. La cantidad de parásitos que se elimina en las heces, en cualquiera de sus formas, varía enormemente en las muestras de un mismo individuo, incluso de un día para otro, por lo que se requiere antes de informar un resulta- do como negativo, examinar un mínimo de tres muestras, preferiblemente de días alter- nos aunque pueden ser de días consecutivos. Tres muestras suelen ser suficientes, pero de- terminados parásitos con cargas bajas pueden requerir un número superior. En cualquiera de los casos si el paciente continúa con síntomas y persiste la sospecha clínica, deberán recogerse tantas muestras como sea necesario. Procesamiento de la muestra En la realización de un coprológico deben con- siderarse tres fases: aprestamiento, examen ma- croscópico y examen microscópico. Aprestamiento. Consiste en ubicarse cómoda- mente en el lugar asignado para la preparación de la placa y observar las normas de biosegu- ridad. Se debe preparar una sola placa y leerla inmediatamente. Examen macroscópico. Se registra la consis- tencia de la materia fecal, como dura, blanda, diarreica o líquida. Las muestras diarreicas y líquidas pueden contener trofozoítos que son muy lábiles, por lo tanto, deben ser montadas y leídas en un lapso no mayor a una hora de ha- ber llegado la muestra al laboratorio. Las heces duras o blandas pueden contener quiste y hue- vos que son muy resistentes y pueden ser leídas en un lapso mayor de dos horas, pero teniendo en cuenta, la forma de preservar las muestras de acuerdo al procedimiento que se vaya a realizar. D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s in te stin a le s p o r e l c o p ro ló g ic o 5 Atlas de Parasitología 1 También se debe registrar la presencia de restos alimenticios (materia fecal lientérica), sangre, moco o algún parásito macroscópico como adultos de nematodos o proglótides de cesto- dos, además se debe consignar los colores de la muestra que tengan alguna significancia clí- nica como el negro (melenas), blanco (ácolia) o amarilla brillante (esteatorréica). Examen microscópico. Antes de montar la placa para el examen microscópico, la mate- ria fecal debe ser muy bien homogenizada con un palillo de madera o plástico para asegurar una distribución uniforme de los parásitos. Si la muestra presenta varías consistencias se debe hacer una preparación de cada una de las partes de la misma. Seguidamente se prepara la placa con una gota de solución salina isotónica (0,85%) y una gota de lugol, teniendo la precaución de mar- car la placa en un extremo y dejar espacio en el otro extremo para manipularla y evitar con- taminarse. En cada gota se ponen aproximada- mente 2 mg de materia fecal, se homogeniza muy bien para que no queden grumos y se co- loca la laminilla evitando que se formenbur- bujas. Se deben descartar las placas muy grue- sas o muy delgadas porque las primeras impi- den la lectura y las segundas pueden contener escasas formas parasitarias que dan resultados falsos negativos. El extendido debe permitir leer a través de él. La lectura de la placa se hace de abajo a arriba o de derecha a izquierda, en 10X y 40X, tanto en solución salina como en lugol; en solución salina se pueden ver pará- sitos móviles como larvas (10X) o trofozoítos (40X). El lugol mata las formas móviles pero resalta las estructuras internas de los quistes (40X) coloreando los núcleos y resaltando el contenido de glucógeno. La lectura debe in- vertir un mínimo de 15 minutos. El examen coprológico también puede ha- cerse mezclando la materia fecal con una o dos gotas de eosina, la cual permite observar las formas móviles y ofrece un buen contraste para observar los parásitos sobre un fondo rosado. Además de las formas parasitarias en el exa- men microscópico es indispensable informar otras estructuras como leucocitos, eritrocitos, levaduras, grasas, fibras musculares y vegetales, y cristales de Charcot-Leyden, las cuales se aso- cian con estados patológicos del tracto gastroin- testinal. Estas estructuras deben ser informadas de manera cualitativa como cantidad abundante, media o escasa. leucocitos El examen de leucocitos en materia fecal se hace en muestras que no tengan más de media hora de emitidas, de la porción del moco o de la parte líquida y para su mejor observación se monta una preparación con dos gotas de azul de metileno de Loeffler. La identificación de los leucocitos en mate- ria fecal proporciona información muy valiosa con respecto a la ubicación anatómica de la lesión y la extensión o magnitud del proceso inflamatorio; son abundantes en colitis por in- vasión de la mucosa colónica por infecciones bacterianas; las causas más frecuentes de este evento son infecciosas como Shigella, Salmo- nella, Campylobacter, Escherichia coli, Yersi- nia enterocolitica, Clostridium difficile y oca- sionalmente Vibrio parahaemolyticus y causas no infecciosas como la colitis ulcerativa y en- fermedad de Crohn. La ausencia de leucocitos en heces sugiere más la posibilidad de una infección por bacterias enterotoxigénicas, por virus o por parásitos. Se pueden encontrar po- cos leucocitos en los casos de colitis por Enta- moeba histolytica, excepto si existe infección bacteriana sobreagregada, en cuyo caso serian abundantes. La muestra se considera positiva cuando se observan más de diez leucocitos por campo de 40X en al menos cinco campos (fi- gura 1-1), solo se cuentan las células intactas y hay que precisar el predominio de las células, para esto se hace un recuento diferencial en 100 ó 200 células, después de agregar el azul de metileno. eritrocitos Se observan cuando hay disentería bacilar o ame- biana, úlceras sangrantes del tracto gastrointesti- nal inferior, hemorroides o fisuras (figura 1-2). leVAdurAs Las levaduras son un grupo de hongos que for- man estructuras llamadas blastosporos (blas- toconidias) y seudohifas. A este grupo per- 1 6 Atlas de Parasitología D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s in te st in a le s p o r e l c o p ro ló g ic o Figura 1-1. Acúmulo de leucocitos. Solución salina, 400X. Figura 1-2. Eritrocitos. Solución salina, 400X. D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s in te stin a le s p o r e l c o p ro ló g ic o 7 Atlas de Parasitología 1 Figura 1-3. Levaduras. Solución salina, 400X. tenece la Candida spp., Saccharomyces spp., entre otros. De estos hongos los más frecuen- temente encontrados en el hombre son dife- rentes especies de cándida; esta es flora nor- mal del intestino y se pueden encontrar en he- ces de pacientes sanos. En materia fecal puede observarse gran cantidad de blastosporos en personas sin diarrea, que ingieren muchas fru- tas, lácteos y carbohidratos y en pacientes que presentan diarrea, después de tratamientos prolongados con antibióticos por desbalance de la flora intestinal, o en pacientes con de- ficiencia de IgA secretoria, desnutridos o con sida, por ser la Candida spp. un patógeno oportunista. En solución salina los blastoporos se obser- van como estructuras ovaladas de 2 a 4 μm de pared gruesa y definida (figura 1-3). Se deben reportar como blastoporos de levadura. Si es- tos están acompañados de seudohifas con o sin gemaciones, se debe informar como blas- tosporos y seudohifas de Candida spp. Este último hallazgo solo tiene importancia clínica cuando la materia fecal no tiene más de media hora de emitida y no se encuentra ningún otro agente patógeno. grAsAs En la materia fecal se puede observar grasa de- bido al consumo exagerado de la misma en la dieta, a la ingesta de laxantes aceitosos, proce- sos de mala absorción, administración de medi- camentos o a contaminación del recipiente en el que se recolecta la muestra. El aspecto de la grasa en la materia fecal depende del origen de ésta, si es por consumo de laxantes o contami- nación del recipiente, las gotas de grasa se ob- servan transparentes, en los otros casos se ven amarillas brillantes (figura 1-4). cristAles de chArcot-leydeN Se originan de productos de desintegración de eosinófilos, por tanto su hallazgo se asocia con procesos alérgicos producidos por varias causas, entre ellos parasitosis, como helmin- tiasis e isosporosis. En solución salina se ob- servan como estructuras transparentes, en for- ma de rombo con extremos puntiagudos de 10 a 30 μm de longitud (figura 1-5). 1 8 Atlas de Parasitología D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s in te st in a le s p o r e l c o p ro ló g ic o Figura 1-4. Grasa. Solución salina, 400X. Figura 1-5. Cristales de Charcot-Leyden. Solución salina, 400X. D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s in te stin a le s p o r e l c o p ro ló g ic o 9 Atlas de Parasitología 1 Figura 1-6. Fibra muscular. Solución salina, 400X. Figura 1-7. Almidones. Solución salina, 100X. 1 10 Atlas de Parasitología D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s in te st in a le s p o r e l c o p ro ló g ic o fiBrAs MusculAres La presencia de abundantes fibras musculares en las heces se asocia con mala absorción de las carnes consumidas. Son estructuras rectangula- res amarillas, de variado tamaño y con estrías transversales y longitudinales (figura 1-6). VegetAles En las materias fecales se encuentran diversas estructuras vegetales como células de pared gruesa, fibras en forma de espiral, pelos de pa- red gruesa refráctil y un canal central, granos de polen y granos de almidón. Estas estructu- ras pueden confundirse con parásitos y muchas veces no tienen ninguna importancia; los almi- dones pueden aparecer en síndromes de mala absorción y asociarse con diarreas. AlMidoNes Los almidones en la materia fecal se observan muy frecuentemente y esto es independiente de su consistencia. En el examen en fresco se observan fácilmente como estructuras redon- das, ovaladas o de forma irregular, de tamaño y colores variados, transparentes, café o ama- rillos y pueden estar formados por capas con- céntricas (figura 1-7). Su hallazgo puede signi- ficar alto consumo de carbohidratos o proce- sos de mala absorción. En tinciones con lugol se observan de color violeta los almidones no digeridos y de color rojo los parcialmente di- geridos. 11 Atlas de Parasitología 2 E n ta m o e b a h isto ly tic a /d isp a r E Entamoeba histolytica/dispar2 ntamoeba histolytica y Entamoeba dis- par son dos especies del género Enta- moeba, morfológicamente indistingui- bles al microscopio de luz, por lo tan- to el hallazgo de quistes, trofozoítos o ambos debe ser reportado como Entamoeba histolyti- ca/Entamoeba dispar.Se hace diagnóstico de Entamoeba histolytica, únicamente cuando se visualizan en la materia fecal trofozoítos con glóbulos rojos fagocitados. Quiste Solución salina Estructura ovoide o esférica, de 10 a 15 μm de diámetro; pared gruesa y bien definida que le da resistencia a los cambios ambientales (figu- ra 2-1). En fresco se puede observar con cito- plasma liso y sin ningún tipo de estructura citoplasmática, lo que permite llegar sólo a un Figura 2-1. Quiste de Entamoeba spp. Solución salina, 400X. 2 E n ta m o e b a h is to ly ti c a /d is p a r 12 Atlas de Parasitología diagnóstico de género (Entamoeba). Cuando se aprecian uno o más cuerpos cromatoidales de extremos romos o en forma de cigarrillo se llega hasta el diagnóstico de especie, Entamoe- ba histolytica/Entamoeba dispar (figura 2-2). Tinción con lugol Se observan esféricos u ovales con citoplasma ligeramente granuloso y núcleos característicos del género Entamoeaba o sea con membrana definida, tapizada internamente de gránulos de cromatina y un cariosoma pequeño (figura 2-3). El número de núcleos hace el diagnóstico de especie, que para Entamoeba histolytica/Enta- moeba dispar pueden ser de uno a cuatro de- pendiendo del grado de maduración del quiste, mientras más inmaduro menor número de nú- cleos (uno o dos) (figura 2-4) y además pueden presentar una vacuola de glucógeno que se tiñe de café oscuro, la cual desaparece en los quistes maduros. (figura 2-5). trofozoíto El trofozoíto vivo tiene dimensiones variables, que según el grado de actividad y la cepa del organismo, fluctúa entre 10 y 60 μm de diáme- tro mayor, siendo de mayor tamaño el trofo- zoíto de cepas patógenas. Presenta forma inde- finida con clara diferencia entre el ectoplasma hialino y el endoplasma finamente granuloso, membrana plasmática delgada y un núcleo con membrana definida, tapizada internamente de gránulos de cromatina y un cariosoma peque- ño. El citoplasma posee numerosas vacuolas que pueden contener bacterias o detritos y si es Entamoeba histolytica también glóbulos rojos (figura 2-7). El movimiento del trofozoíto, se produce por prolongaciones del ectoplasma que lleva a la formación de seudópodos digitiformes largos o anchos y romos, que se dan uno a Figura 2-2. Quiste de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar con cuerpo cromatoidal. Solución salina, 400X. 13 Atlas de Parasitología 2 E n ta m o e b a h isto ly tic a /d isp a r Figura 2-3. Quiste de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Lugol, 400X. Figura 2-4. Quiste de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Lugol, 400X. 2 E n ta m o e b a h is to ly ti c a /d is p a r 14 Atlas de Parasitología Figura 2-5. Quiste de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Lugol, 400X. Figura 2-6. Trofozoíto de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Solución salina, 400X. 15 Atlas de Parasitología 2 E n ta m o e b a h isto ly tic a /d isp a r Figura 2-7. Trofozoíto de Entamoeba histolytica. Solución salina, 400X. Figura 2-8. Trofozoíto de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Lugol, 400X. 2 E n ta m o e b a h is to ly ti c a /d is p a r 16 Atlas de Parasitología Figura 2-9. Trofozoíto de Entamoeba histolytica. Lugol, 400X. 1. Sin glóbulos rojos. 2. Con glóbulos rojos. 1 2 Figura 2-10. Trofozoíto de Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar. Hematoxilina férrica, 1000X. Sin glóbulos rojos. 17 Atlas de Parasitología 2 E n ta m o e b a h isto ly tic a /d isp a r uno y generan un desplazamiento explosivo y unidireccionado. Solución salina Se observa redondo o de forma indefinida por la presencia de seudópodos. El citoplasma pre- senta numerosas vacuolas y menor número de gránulos. Si el trofozoíto está muerto (sin mo- vimiento) se hace aparente el núcleo, el cual se observa en forma de rueda punteada y refrin- gente (figura 2-6 y 2-7). Tinción con lugol Con esta coloración, el trofozoíto pierde la motilidad, puede adquirir forma redonda o conservar la forma indefinida con clara dife- rencia entre ectoplasma y endoplasma y ade- más observarse con mayor claridad numerosas vacuolas e inclusiones citoplasmáticas como Figura 2-11. Trofozoíto de Entamoeba histolytica. Hematoxilina férrica, 1000X. Con glóbulos rojos fagocitados. gránulos, material fagocitado, que en el caso de Entamoeba histolytica puede ser glóbulos rojos y en algunas oportunidades presencia de vacuola de glucógeno. Puede verse o no, el núcleo característico del género Entamoeba (figura 2-8 y 2-9). Hematoxilina férrica Para un diagnóstico seguro de especie del géne- ro Entamoeba se debe hacer coloraciones espe- ciales que permitan observar las características del núcleo de cada una de ellas. En el caso de Entamoeba histolytica/dispar tiene un núcleo de membrana definida, delicada, con cromatina regularmente distribuida en la parte interna de la membrana y un pequeño cariosoma central; se observa el citoplasma vacuolado con o sin partículas y presencia o no de glóbulos rojos fagocitados (figura 2-10 y 2-11). 19 Atlas de Parasitología 3 E n ta m o e b a c o li Entamoeba coli3 Quiste Solución salina Estructura redonda u ovalada, de pared gruesa y definida, de 10 a 35 μm de diámetro, citoplas- ma liso o con pocas inclusiones, lo cual no per- mite hacer el diagnóstico de especie. La obser- vación de una o más barras cromatoidales que terminan en puntas o puntas astilladas, permi- ten hacer el diagnóstico en fresco de quistes de Entamoeba coli, pero esta característica solo la presentan los quistes inmaduros (figura 3-1). Tinción con lugol El quiste en lugol se caracteriza por tener un citoplasma más granuloso que el de Entamoeba histolytica/ Entamoeba dispar. El diagnóstico lo hace la presencia de cinco o más núcleos ca- racterísticos del género Entamoeba (figuras 3-2 y 3-3). La mayoría de los quistes tienen de cinco Figura 3-1. Quiste de Entamoeba coli. Solución salina, 400X. 3 20 Atlas de Parasitología E n ta m o e b a c o li Figura 3-2. Quiste de Entamoeba coli. Lugol, 400X. Figura 3-3. Quiste de Entamoeba coli. Lugol, 400X. 21 Atlas de Parasitología 3 E n ta m o e b a c o li a ocho núcleos pero pueden alcanzar 16, 32 y hasta 64 en quistes de gran tamaño. Cuando el quiste está inmaduro presenta una vacuola de glucógeno que se tiñe de color café oscuro y uno o dos núcleos repelidos, lo que no permite contar el número de núcleos y por tanto no se hace diagnóstico de especie (figura 3-4). trofozoíto Se observa como una masa ameboide e inco- lora de 15 a 50 μm de diámetro mayor, con citoplasma viscoso, con abundantes vacuolas alimentarias, generalmente llenas de bacterias, nunca eritrocitos. Presenta un endoplasma muy granuloso y una franja pequeña de ectoplasma. El núcleo es esférico, rodeado por una membra- na relativamente gruesa, revestida en el interior de gránulos de cromatina y un cariosoma volu- minoso. El trofozoíto activo forma seudópodos cor- tos, romos y granulosos sin diferencia entre Figura 3-4. Quistes inmaduros de Entamoeba. Lugol, 400X. ectoplasma y endoplasma, que le dan un movi- miento lento y poco direccionado. Solución salina El trofozoíto en fresco se observa como una masa ameboide e incolora con citoplasma lleno de vacuolas y un núcleo que raras veces puede verse como una rueda puntiforme. Tinción con lugol Se observa con iguales características que en fresco o se puede ver completamente redon- deado y con un núcleo característico del género Entamoeba. Hematoxilina férrica El trofozoíto aparece como una masa redon- deada, condensada y gruesa. El citoplasma pre- senta abundantes vacuolas transparente y un núcleo de membrana definida tapizada interna- mente por gránulos de cromatina organizados de forma irregular y un cariosoma de volumen moderado y localización excéntrica.E n ta m o e b a h a r tm a n n i 23 Atlas de Parasitología 4 Entamoeba hartmanni4 Quiste Los quistes de Entamoeba hartmanni y E. histolytica/E. dispar son morfológicamente indistinguibles. La diferencia radica en el ta- maño, por lo tanto, debe hacerse la medición de los quistes utilizando un micrómetro. El quiste de E. histolytica/E. dispar mide más de 10 μm, (10 a 30 μm), mientras que el quiste de E. hartmanni mide menos de 10 μm (5 a 10 μm). Solución salina Presenta iguales características morfológicas que E. histolytica/E. dispar, incluyendo presencia de uno o más cuerpos cromatoidales en forma de cigarrillo, pero un tamaño entre 5 a 10 μm, nun- ca superior a 10 μm de diámetro (figura 4-1). Tinción con lugol Con la tinción de lugol se observan de uno a cuatro núcleos característicos del género En- tamoeba, lo que permite diferenciarlo de los quistes de Endolimax nana (figura 4-2). Figura 4-1. Quiste de Entamoeba hartmanni. Solución salina, 400X. 4 24 Atlas de Parasitología E n ta m o e b a h a r tm a n n i Figura 4-2. Quiste de Entamoeba hartmanni. Lugol, 400X. Figura 4-3. Trofozoíto de Entamoeba hartmanni. Solución salina, 400X. E n ta m o e b a h a r tm a n n i 25 Atlas de Parasitología 4 Figura 4-4. Trofozoíto de Entamoeba hartmanni. Lugol, 400X. trofozoíto Solución salina Son estructuras pequeñas de 5 a 12 μm de diá- metro, de forma redonda o indefinida con clara diferencia entre ectoplasma y endoplasma. Pue- de presentar uno o varios seudópodos globu- losos. Tiene citoplasma ligeramente granuloso, presencia de vacuolas digestivas con bacterias fagocitadas y generalmente no se le observa el núcleo (figura 4-3). Tinción con lugol Presenta las mismas características descritas para el trofozoíto en solución salina. La iden- tificación de especie solo se hace mediante la observación de su único núcleo característico del género Entamoeba (figura 4-4). E n d o lim a x n a n a 27 Atlas de Parasitología 5 Endolimax nana5 Quiste Solución salina Presenta forma esférica, ovoide o elipsoidal, de 5 a 14 μm de diámetro, pared celular del- gada y definida, citoplasma liso y claro, pocas veces presenta cuerpos cromatoidales peque- ños, esféricos o baciliformes y algunas veces se le aprecian de uno a cuatro puntos refrin- gentes que son los cariosomas de los núcleos (figura 5-1). Tinción con lugol Pequeña estructura esférica, ovoide o elipsoi- dal, con pared quística definida, citoplasma ver- de o amarillo pálido y de uno a cuatro núcleos característicos del género Endolimax (figuras 5-2 y 5-3). Figura 5-1. Quiste de Endolimax nana. Solución salina, 400X. 5 28 Atlas de Parasitología E n d o li m a x n a n a Figura 5-2. Quiste de Endolimax nana. Lugol, 400X. Figura 5-3. Quiste de Endolimax nana. Lugol, 400X. E n d o lim a x n a n a 29 Atlas de Parasitología 5 Figura 5-4. Trofozoíto de Endolimax nana. Solución salina, 400X. Figura 5-5. Trofozoíto de Endolimax nana. Solución salina, 400X. 5 30 Atlas de Parasitología E n d o li m a x n a n a Figura 5-6. Trofozoíto de Endolimax nana. Lugol, 400X. Figura 5-7. Trofozoíto de Endolimax nana. Hematoxilina férrica, 1000X. E n d o lim a x n a n a 31 Atlas de Parasitología 5 trofozoíto Mide de 6 a 15 μm de diámetro, puede ser de forma redonda o indefinida debido a la forma- ción rápida de varios seudópodos pequeños, romos, hialinos que le dan un movimiento len- to, progresivo y no direccionado. Se caracteriza por presentar un citoplasma muy vacuolado y un núcleo con membrana definida sin cromati- na y un cariosoma voluminoso e irregular que ocupa casi todo el núcleo, esto hace que al mi- croscopio óptico los núcleos se observen como puntos refringentes que corresponden a los ca- riosomas de los núcleos (figuras 5-4 y 5-5). Solución salina Se observa una estructura pequeña, redonda o indefinida. El citoplasma contiene numerosas vacuolas. El núcleo raramente es visible (figuras 5-4 y 5-5). Tinción con lugol Con esta tinción toma un color amarillo pálido o café claro, resaltando las vacuolas presentes en el citoplasma. El núcleo pocas veces es vi- sible y rara vez presenta vacuola de glucógeno (figura 5-6). Hematoxilina férrica Tinción permanente que resalta las innumera- bles vacuolas en su citoplasma que se obser- van transparentes y la morfología característi- ca de su único núcleo, con membrana nuclear de grosor intermedio, sin cromatina, carioso- ma voluminoso e irregular, de posición cen- tral o excéntrica que ocupa casi todo el núcleo (figura 5-7). Io d a m o e b a b u ts c h lii 33 Atlas de Parasitología 6 Iodamoeba butschlii6 Quiste Solución salina Estructura esférica u ovalada de pared gruesa y definida de 5 a 20 μm de diámetro, citoplasma con abundantes granulaciones de diferentes tamaños y la mayoría de las veces presencia de una o dos vacuolas de bordes definidos, que se observan como opacidades en el citoplasma, (figura 6-1). Tinción con lugol Resalta las granulaciones características del cito- plasma y tiñe las vacuolas de glucógeno de un color café intenso. En algunas ocasiones se visua- liza un núcleo y muy rara vez dos núcleos típicos del género Iodamoeba. El núcleo se caracteriza por presentar una membrana gruesa, definida, sin cromatina y un cariosoma dentado (figura 6-2). A veces no se observa la vacuola y por tanto lo que hace el diagnóstico es el citoplasma con múltiples granulaciones de diferente tamaño. Figura 6-1. Quiste de Iodamoeba butschlii. Solución salina, 400X. 6 34 Atlas de Parasitología Io d a m o e b a b u ts c h li i Figura 6-2. Quiste de Iodamoeba butschlii. Lugol, 400X. Figura 6-3. Trofozoíto de Iodamoeba butschlii. Solución salina, 400X. Io d a m o e b a b u ts c h lii 35 Atlas de Parasitología 6 Figura 6-4. Trofozoíto de Iodamoeba butschlii. Lugol, 400X. trofozoíto Solución salina Tiene las mismas características que el quiste, pero su forma siempre es indefinida con poca diferencia entre ectoplasma y endoplasma, de- bido a la formación de varios seudópodos pe- queños, romos, hialinos que le dan un movi- miento lento no direccionado (figura 6-3). Tinción con lugol Se observa con las mismas características del trofozoíto en solución salina, con citoplasma amarillo lleno de granulaciones irregulares, va- cuolas de forma definida de color café intenso y se puede observar un núcleo característico del género Iodamoeba (figura 6-4). Hematoxilina férrica Se visualizan muy bien las granulaciones cito- plasmáticas, la o las vacuolas no toman la co- loración. Se observa claramente el núcleo, de membrana gruesa y definida, con un cariosoma grande compuesto de gránulos acromáticos (no toman la coloración) localizados en su periferia que le dan un aspecto de rueda dentada, y mu- chos gránulos de cromatina dispersos entre el cariosoma y la membrana nuclear. B la sto c y stis h o m in is 37 Atlas de Parasitología 7 Blastocystis hominis7 Blastocystis spp. Es un protozoo polimórfico que durante su ciclo biológico pasa por seis diferentes estadios: ame- boide, avacuolar, vacuolar o de cuerpo central, multivacuolar, granular y quística, que varían de forma y de tamaño (2 a 200 μm). Los estadios más frecuentemente reportados en la materia fecal de los pacientes son las formas ameboide, vacuolar o de cuerpo central y la granular. Solución salina Forma vacuolar o de cuerpo central. Es la más frecuentemente observada en cultivos y en materia fecal de diferente consistencia. Es una estructura esférica con una gran variación Figura 7-1. Formas de Blastocystis. Solución salina, 400X. 7 38 Atlas de Parasitología B la st o c y st is h o m in is Figura 7-2. Formas de Blastocystis. Solución salina, 400X. Figura 7-3. Formas de Blastocystis. Lugol, 400X. B la sto cy stis h o m in is 39 Atlas de Parasitología 7 Figura 7-4. Formas de Blastocystis. Lugol, 400X. de tamaño de 2 a 200 μm y rodeada por una cu- bierta gruesa. Se caracteriza por tener una gran vacuola central, que ocupa aproximadamente el 90% del volumen de la célula, que desplaza el citoplasma y las organelas a la periferia, lo que dificulta la visualización de los núcleos (en- tre uno y cuatro) y las mitocondrias. La vacuola puede estar vacía o llena de material floculante, (figura 7-1). Forma granular. Es semejante a la forma va- cuolar excepto que los gránulos están presentes dentro del citoplasma o más comúnmente den- tro de la vacuola central, por lo tanto, ha sido descrita más como forma vacuolar que contiene gránulos que como un estadio diferente del pa- rásito (figura 7-2). Forma ameboide. Es raramente reportada y se observan generalmente en materia fecal diarrei- ca. Posee características típicas de la forma va- cuolar pero de tamaño muy pequeño (10 a 15 μm) y uno o dos seudópodos. Se sugiere que este estadio tiene un papel importante en la patogénesis del parasito, sin embargo, no hay claridad en la existencia de esta forma, se con- sidera que puede ser una forma irregular del estadio vacuolar. Forma quística. Es la forma más reciente- mente descrita y por su pequeño tamaño (2 a 5 μm) es difícil de visualizar. Tiene forma va- riable pero generalmente es ovoide o esférico rodeado por una pared celular. El citoplasma puede contener de uno a cuatro núcleos, mito- condrias, depósitos de glucógeno y pequeñas vacuolas. La forma quística representa el esta- dio infectante y es la forma que sobrevive fuera del hospedero, pero no se sabe si puede haber infección mediante otros estadios. Tinción con lugol Todas las formas conservan las mismas carac- terísticas morfológicas que en solución salina. Algunas veces toman una coloración amarilla pálida o café (figuras 7-3 y 7-4). 41 Atlas de Parasitología 8 B a la n tid iu m c o li Balantidium coli8 Quiste Solución salina Es el protozoo más grande que parasita al hom- bre. El quiste tiene forma redondeada de 40 a 60 μm de diámetro, doble pared, seguida por los cilios; inmediatamente debajo se encuentra el citoplasma lleno de vacuolas digestivas con partículas fagocitadas, que conserva desde su estadio de trofozoíto, ya que este no expulsa los productos alimenticios no digeridos, para llevar a cabo el proceso de enquistamiento (fi- gura 8-1). Se aprecia en el extremo posterior una o dos vacuolas contráctiles y en raras oca- siones un orificio denominado citopigio o ano. Tinción con lugol Se observa con iguales características que en solución salina, pero se dificulta el diagnósti- Figura 8-1. Quiste de Balantidium coli. Solución salina, 400X. 8 42 Atlas de Parasitología B a la n ti d iu m c o li Figura 8-2. Quiste de Balantidium coli. Lugol, 400X. Figura 8-3. Trofozoíto de Balantidium coli. Solución salina, 400X. 43 Atlas de Parasitología 8 B a la n tid iu m c o li Figura 8-4. Trofozoíto de Balantidium coli. Lugol, 400X. Figura 8-5. Trofozoíto de Balantidium coli. Hematoxilina férrica, 1000X. 8 44 Atlas de Parasitología B a la n ti d iu m c o li co con Lugol, por la gran cantidad de vacuolas llenas de productos alimenticios que toman una coloración café oscura, lo que no permite la vi- sualización de ninguna estructura citoplasmática (figura 8-2). trofozoíto Estructura ovoide, cuyo extremo anterior es puntiagudo y el extremo posterior ancho y re- dondeado, mide de 50 a 200 μm de longitud por 40 a 70 μm de ancho, está rodeado por una membrana delgada llena de cilios unifor- mes, que le dan al organismo movimientos constantes y sincronizados que hacen avanzar vigorosamente el protozoario. En el extremo anterior, a uno de los lados del eje longitudi- nal del parásito, se observa una depresión có- nica invertida que corresponde al citostoma, rodeado de cilios de mayor longitud que los del resto del parásito y en el extremo posterior se encuentra el citopigio o ano. En el citoplas- ma se observan numerosas vacuolas digestivas, una o dos vacuolas contráctiles, el macronú- cleo grande y arriñonado y un micronúcleo, pequeño localizado en la curvatura del macro- núcleo que solo se visualiza con microscopia electrónica. Solución salina Se observan muy móviles con el cuerpo cubier- to de cilios y un citostoma en el extremo ante- rior. El citoplasma presenta abundantes vacuo- las que pueden estar vacías o llenas de material fagocitado. En raras ocasiones puede observar- se el macronúcleo (figura 8-3). Tinción con lugol El trofozoíto pierde la movilidad, pero se hace más aparente el citoplasma con abundantes va- cuolas que contienen múltiples partículas fago- citadas, tales como partículas de almidón, que se tiñen de color café oscuro, lo que impide apreciar otras estructuras citoplasmáticas (figura 8-4). Dependiendo de su posición puede obser- varse el citostoma y el macronúcleo arriñonado. Coloración de hematoxilina férrica Se observa un trofozoíto grande cubierto de ci- lios con un citostoma en el extremo anterior. El citoplasma presenta numerosas vacuolas di- gestivas, una o dos vacuolas contráctiles y un macronúcleo grande y arriñonado (figura 8-5). G ia r d ia in te s tin a lis , d u o d e n a lis o la m b lia 45 Atlas de Parasitología 9 9 Giardia intestinalis, duodenalis o lamblia Quiste Solución salina El quiste de Giardia intestinalis es una estruc- tura ovalada, incolora de 10 a 12 μm de diáme- tro, con citoplasma liso, claramente separado de la pared quística fina. En la mayoría de los casos se observa el axonema o axostilo, estruc- tura donde se encuentran retraídos los flagelos (figura 9-1). Los núcleos raramente son visibles. Tinción con lugol Se observan de un tamaño y coloración varia- ble de acuerdo al estado de maduración del quiste, Los quistes inmaduros son más peque- ños y de color azul, gris o verde azules (figura 9-2), difícilmente se les visualizan las estructu- ras citoplasmáticas y rara vez se puede ver el axostilo. Los quistes maduros tienen una pa- red quística fina, separada del citoplasma, que es finamente granular y contiene los núcleos y el axostilo o axonema (figura 9-3). Los quistes Figura 9-1. Quiste de Giardia intestinalis. Solución salina, 400X. 9 46 Atlas de Parasitología G ia r d ia i n te s ti n a li s , d u o d e n a li s o l a m b li a Figura 9-2. Quistes de Giardia intestinalis. Lugol, 400X. Figura 9-3. Quiste de Giardia intestinalis. Lugol, 400X. G ia r d ia in te s tin a lis , d u o d e n a lis o la m b lia 47 Atlas de Parasitología 9 Figura 9-4. Trofozoíto de Giardia intestinalis. Solución salina, 400X. Figura 9-5. Trofozoíto de Giardia intestinalis. Lugol, 400X. 9 48 Atlas de Parasitología G ia r d ia i n te s ti n a li s , d u o d e n a li s o l a m b li a recién formados tienen dos núcleos los cuales tienen cariosoma central y los maduros poseen cuatro núcleos que se localizan en un extremo del organismo. trofozoíto Su tamaño es variable de 9.5 a 21 μm de largo por 5 a 15 μm de ancho, es redondeado en su porción anterior y afilado en la posterior, lo que le da forma de cuchara o de raqueta, es con- vexo dorsalmente y en su porción ventral está provisto de una concavidad superficial y ligera- mente ranurada, denominada disco suctorio, que ocupa casi toda la mitad anterior del cuer- po del parásito. A cada lado del disco suctorio, se encuentra un núcleo con cariosoma central formado por una masa densa de cromatina o un número moderado de granos finos, los cuales a veces están dispersos en el nucleoplasma. Posee un axostilo que lo divide en dos partes iguales y le da simetría bilateral, cuatro pares de flagelos, que le permiten un desplazamiento rápidoy un par de cuerpos parabasales ligeramente curvos y en forma de salchicha, muy próximos entre sí, de situación oblicua o transversal. Solución salina El trofozoíto en solución salina se observa con su forma característica. La mayoría de las veces se le observa el disco suctorio con los núcleos a cada lado y en contadas ocasiones se visualiza el axostilo (figura 9-4). Si el trofozoíto está en mo- vimiento fácilmente se le observan los flagelos. Tinción con lugol En lugol el trofozoíto pierde el movimiento y se hace más aparente la presencia del axostilo, del disco suctorio y de sus núcleos (figura 9-5). De acuerdo a la posición en que quede, se podrían observar algunos flagelos y en raras ocasiones los cuerpos parabasales. Hematoxilina férrica Se observan muy claramente todas las estruc- turas citoplasmáticas descritas anteriormente, destacándose la presencias de los cuerpos pa- rabasales que en raras ocasiones se ven con la coloración de lugol (figura 9-6). Figura 9-6. Trofozoíto de Giardia intestinalis. Hematoxilina férrica, 1000X. C h ilo m a s tix m e s n ili 49 Atlas de Parasitología 10 Chilomastix mesnili10 Quiste Solución salina Estructura incolora, de 7 a 10 μm de largo por 4,5 a 6 μm de ancho, de pared gruesa y resis- tente. Tiene forma de pera o de limón, con uno de los extremos ancho y redondeado, al- gunas veces algo cónico y romo (figura 10-1). El citoplasma es densamente granulado y se encuentra por lo general separado de la pared quística en el extremo más delgado de éste, po- see un solo núcleo la mayoría de las veces no aparente en fresco pero muy visible con tinción de lugol o con coloraciones especiales. Tinción con lugol El quiste con la tinción de lugol se ve de co- lor amarillo o café claro; presenta un citoplas- ma densamente granulado, un núcleo grande y vesicular, situado en la parte media del ex- tremo anterior (parte delgada), rodeado por Figura 10-1. Quiste de Chilomastix mesnili. Solución salina, 400X. 10 50 Atlas de Parasitología C h il o m a s ti x m e s n il i Figura 10-2. Quiste de Chilomastix mesnili. Lugol, 400X. Figura 10-3. Trofozoíto de Chilomastix mesnili. Solución salina, 400X. C h ilo m a s tix m e s n ili 51 Atlas de Parasitología 10 una membrana nuclear revestida con placas de cromatina características y un cariosoma central bien definido. Al lado del núcleo se en- cuentra el citostoma rodeado por un pequeño flagelo, no siempre visible con esta coloración (figura 10-2). trofozoíto Es una estructura asimétrica, piriforme debido al surco espiral que se extiende en la parte me- dia del cuerpo. De acuerdo a su actividad pue- de medir de 10 a 20 μm de largo por 3 a 10 μm de ancho. El citoplasma tiene granulacio- nes finas, numerosas vacuolas alimentarías, un núcleo con las características descritas previa- mente y un citostoma redondeado, con una es- trangulación media, situado a uno de los lados Figura 10-4. Trofozoíto de Chilomastix mesnili. Lugol, 400X. del núcleo. Presenta cuatro flagelos, tres libres (dos cortos y uno largo) y uno en el interior del citostoma. Solución salina En solución salina solo se visualiza una estruc- tura con abundantes vacuolas, por lo tanto, el diagnóstico del trofozoíto en fresco se hace observando su movimiento progresivo en for- ma de tirabuzón, que consiste en un adelga- zamiento de la parte posterior formando un cono alargado (figura 10-3). Tinción con lugol El diagnóstico en lugol es difícil, porque pier- de el movimiento característico y su citoplas- ma es tan vacuolado que no permite visuali- zar en detalle las estructuras del citoplasma (figura 10-4). 53 Atlas de Parasitología 11 C r y p to sp o r id iu m sp . Cryptosporidium sp.11 ooQuiste Es un parásito ácido alcohol resistente, el ooquiste tiene forma esférica de 4 a 6 μm de diámetro con pared gruesa y definida. En el citoplasma se encuentran cuatro esporozoítos desnudos (no forma esporoquistes), una vacuo- la y un cuerpo residual. El estudio de la materia fecal con solución salina no permite la observación de los ooquis- tes de Cryprosporidium spp., debido a que son estructuras muy pequeñas y refringentes, por lo tanto, se requiere de coloraciones espe- ciales como la de Zielh Neelsen para llegar al diagnóstico. Coloración de Zielh Neelsen Toma la coloración de manera diferencial des- de rojo intenso (figura 11-1), pasando por la gama de rosados y en algunas ocasiones no toma la coloración y se observa transparente (figura 11-2). En su citoplasma se le pueden observar entre uno y cuatro puntos que corres- ponden a los esporozoítos, también se visua- liza la vacuola y el cuerpo residual como un gránulo de mayor tamaño que los esporozoí- tos. En contadas ocasiones los esporozoitos se observan en forma de media luna (figura 11-3). Figura 11-1. Ooquistes de Cryptosporidium spp. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. 11 54 Atlas de Parasitología C r y p to sp o r id iu m s p . Figura 11-2. Ooquistes de Cryptosporidium spp. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. Figura 11-3. Ooquistes de Cryptosporidium spp. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. C y c lo sp o r a c a y e ta n e n sis 55 Atlas de Parasitología 12 12 Cyclospora cayetanensis ooQuiste Estructura esférica con doble pared, de 8 a 10 μm de diámetro, de color grisáceo. El citoplas- ma puede contener de seis a ocho gránulos refringentes y un cuerpo residual. La esporula- ción del ooquiste ocurre en materia fecal vieja o al colocarla en dicromato de potasio al 2,5% y al cabo de dos o tres días se visualiza con dos esporoquistes, en cada uno de ellos dos espo- rozoítos, que no son visibles al microscopio de luz, pero claramente observables con micros- copio electrónico. Solución salina En una materia fecal recién emitida, los ooquis- tes se observan esféricos de doble pared, de color gris y con los seis a ocho gránulos refrin- gentes y el cuerpo residual (figuras 12-1 y 12-2). Figura 12-1. Ooquiste de Cyclospora cayetanensis. Solución salina, 400X. 12 56 Atlas de Parasitología C y c lo sp o r a c a y e ta n e n si s Figura 12-2. Ooquiste de Cyclospora cayetanensis. Solución salina, 400X. Figura 12-3. Ooquiste de Cyclospora cayetanensis. Lugol, 400X. C y c lo sp o r a c a y e ta n e n sis 57 Atlas de Parasitología 12 Tinción con lugol Toman muy poco la coloración de lugol y se ven amarillo pálido o claros, con iguales ca- racterísticas que en solución salina (figura 12-3). Coloración de Zielh Neelsen Ooquiste ácido alcohol resistente con caracte- rísticas semejantes al ooquiste de Cryptospo- ridim spp., la diferencia radica en el tamaño, siendo más grande el ooqusite de Cyclospora cayetanensis (figura 12-4). Figura 12-4. Ooquistes de Cyclospora cayetanensis. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. Iso sp o r a b e lli 59 Atlas de Parasitología 13 Isospora belli13 ooQuiste Es ovalado de 20 a 33 μm de largo por 10 a 19 μm de ancho, pared quística delgada e incolora con uno de los polos más angosto, donde se encuen- tra una abertura denominada micrópilo; en el interior se presenta una masa esférica de gránu- los, denominada esporoblasto, donde se sitúa el núcleo y al lado de éste un cuerpo residual. El desarrollo ulterior del ooquiste tiene lugar en las heces después de ser eliminadas; razón por la cual los ooquistes con dos esporoblastos rara- mente se encuentran en la materia fecal fresca. Con el tiempo, o colocando la materia fecal en dicromato de potasio al 2,5%, el núcleo se divi- de en dos porciones y la masa granular se divi- de más tarde en dos esporoblastos, los cuales una vez secreten una pared quística doble y su núcleo tenga dos divisiones sucesivas (dando lugar a cuatro esporozoítos en forma de media luna), se transformaran en esporoquistes de 12 a 14 μm de diámetro, convirtiéndose así en la forma infectantedel parásito (figura 13-1). Figura 13-1. Ooquiste de Isospora belli. Solución salina, 400X. 13 Is o sp o r a b e ll i 60 Atlas de Parasitología Figura 13-2. Ooquiste de Isospora belli. Solución salina, 400X. Figura 13-3. Ooquiste de Isospora belli. Solución salina, 400X. Iso sp o r a b e lli 61 Atlas de Parasitología 13 Figura 13-5. Ooquiste de Isospora belli. Lugol, 400X. Figura 13-4. Ooquiste de Isospora belli. Solución salina, 400X. 13 Is o sp o r a b e ll i 62 Atlas de Parasitología Figura 13-6. Ooquiste de Isospora belli. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. Figura 13-7. Ooquiste de Isospora belli. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. Iso sp o r a b e lli 63 Atlas de Parasitología 13 Solución salina En la materia fecal recién emitida se obser- va el ooquiste incoloro, con un esporoblasto y el cuerpo residual (figura 13-1). Cuando el ooquiste está inmaduro, el esporoblasto no se ha formado, por lo tanto, se observa un gran número de gránulos dispersos en el citoplasma (figura 13-2). Solo en materia fecal vieja se pue- de observar el ooquiste con dos esporoblastos, (figura 13-3), que posteriormente madura y se transforman en dos esporoquistes para dar lu- gar a la forma infectante ( un ooquiste con ocho esporozoitos) (figura 13-4). Figura 13-8. Ooquiste de Isospora belli. Ziel-Nielsen modificado, 1000X. Tinción con lugol Ooquiste de color amarillo pálido, porque toma muy poco la coloración de yodo, conserva las mismas características descritas para el ooquiste en solución salina (figura 13-5). Coloración de Ziel Neelsen Por ser un parásito ácido alcohol resistente los esporoblasto se tiñen de color rojo intenso y la pared del ooquiste se ve delimitada por un precipitado azul del colorante (figuras 13-6, 13-7 y 13-8). M ic ro sp o rid io s 65 Atlas de Parasitología 14 Microsporidios14 S e denominan así a los parásitos intra- celulares que pertenecen al phylum Microsporidia. Existen aproximada- mente 140 géneros y más o menos 1.200 especies. A la fecha se han reportado sie- te géneros infectando al hospedero humano siendo Enterocytozoon bieneusi y Encephali- tozoon intestinalis, las especies más importan- tes en el hombre (figura 14-1). Estas especies habitan el intestino delgado y por lo tanto, su diagnóstico se hace con la observación de las esporas en materia fecal. No obstante, se pueden encontrar en materia fecal esporas de Encephalitozoon cuniculi y Encephalitozoon hellem pero son poco frecuentes (figura 14-2). Las esporas de estos microsporidios miden 1 a 5 μm, siendo las de menor tamaño las de E. bieneusi (1,5 por 0,5 μm) (figura 14-3). Presen- tan una pared gruesa compuesta por tres capas, la externa denominada exospora, interna o endos- Figura 14-1. Esporas de Microsporidios (Encephalitozoon intestinalis). QHGC, 1000X. 14 M ic ro sp o ri d io s 66 Atlas de Parasitología Figura 14-3. Esporas de Microsporidios (Enterocytozoon bieneusi). QHGC, 1000X. Figura 14-2. Esporas de Microsporidios (Encephalitozoon hellem). QHGC, 1000X. M ic ro sp o rid io s 67 Atlas de Parasitología 14 pora y una membrana plasmática que rodea el citoplasma, en éste se encuentra el esporoplasma que es la parte infectante del parásito, el cual pue- de tener uno o dos núcleos. Presenta ribosomas, una vacuola posterior, un polaroplasto (membra- nas dispuestas en capas laxas o densas) y el túbulo polar, filamento que se enrolla en el interior del parásito y se desenrolla en el momento de inocu- lar el esporoplasma a la célula invadida. Para visualizar las esporas en materia fecal se requiere de coloraciones especiales como la tricrómica o Quick-Hot-Gram-Cromotropo (QHGC). Coloración de Quick-Hot-Gram-Cromotropo Con esta coloración, las esporas se observan como estructuras muy pequeñas, ovaladas o alargadas de color rosado o fucsia con un septo o punto de color fucsia intenso que co- rresponde al filamento o túbulo polar, y un espacio claro que corresponde a la vacuola posterior. A s c a r is lu m b r ic o id e s 69 Atlas de Parasitología 15 UNidAd ii Helmintos 15. Ascaris lumbricoides ......................................................... 71 16. Trichuris trichiura ............................................................. 81 17. Uncinarias .......................................................................... 87 18. Strongyloides stercoralis ................................................... 95 19. Enterobius vermicularis (oxiuros) ................................. 105 20. Taenia solium o saginata ............................................... 111 21. Hymenolepis sp ............................................................... 117 22. Paragonimus sp ............................................................... 121 23. Fasciola hepática ............................................................ 123 24. Schistosoma sp ................................................................ 127 A s c a r is lu m b r ic o id e s 71 Atlas de Parasitología 15 Ascaris lumbricoides15 Adulto Es el nemátodo más grande que parásita al hombre, las hembras miden de 20 a 35 cm de longitud por 3 a 6 mm de diámetro y su ex- tremo posterior termina en punta (figura 15- 1), los machos miden 15 a 30 cm de largo por 2 a 4 mm de diámetro y el extremo posterior es curvo hacia la porción ventral (figuras 15-2 y 15-3). Es un gusano redondo y alargado, de extremo anterior romo y extremo posterior más delgado, de color carne o blanquecino. La cabe- za está provista de tres labios bien diferenciados y en el centro una cavidad bucal pequeña de forma triangular (figura 15-4). Figura 15-1. Adulto hembra de Ascaris lumbricoides. 15 A s c a r is l u m b r ic o id e s 72 Atlas de Parasitología Figura 15-2. Adulto macho de Ascaris lumbricoides. Figura 15-3. Adulto macho de Ascaris lumbricoides. Extremo posterior. A s c a r is lu m b r ic o id e s 73 Atlas de Parasitología 15 Figura 15-4. Adulto de Ascaris lumbricoides. Extremo anterior. Figura 15-5. Huevo fértil de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. 15 A s c a r is l u m b r ic o id e s 74 Atlas de Parasitología Figura 15-6. Huevo fértil de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. Figura 15-7. Huevo embrionado de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. A s c a r is lu m b r ic o id e s 75 Atlas de Parasitología 15 Figura 15-8. Huevo embrionado decorticado de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. Figura 15-9. Huevo infértil de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. 15 A s c a r is l u m b r ic o id e s 76 Atlas de Parasitología Figura 15-10. Huevo infértil de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. Figura 15-11. Huevo fértil decorticado de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. A s c a r is lu m b r ic o id e s 77 Atlas de Parasitología 15 Figura 15-12. Huevo infértil decorticado de Ascaris lumbricoides. Solución salina, 400x. Figura 15-13. Huevo fértil de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. 15 A s c a r is l u m b r ic o id e s 78 Atlas de Parasitología Figura 15-14. Huevo fértil de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. Figura 15-15. Huevo embrionado de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. A s c a r is lu m b r ic o id e s 79 Atlas de Parasitología 15 Figura 15-16. Huevo fértil decorticado de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. Figura 15-17. Huevo embrionado decorticado de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. 15 A s c a r is l u m b r ic o id e s 80 Atlas de Parasitología hueVo En la materia fecal se pueden encontrar tanto huevos fértiles como infértiles. Huevo fértil Se ven de color café intenso porque toman la bilis, son anchos y ovoides, miden de 45 a 70 μm de longitud por 35 a 50 μm de ancho, están cubiertos por una cápsula gruesa y transparente, constituida por tres membranas: la membrana internao vitelina relativamente impermeable y de naturaleza lipoide, la media que es transpa- rente y gruesa (derivada de glucógeno) y la ex- terna mamelonada, constituida por albumina y generalmente teñida de un color café dorado. Cuando están recién eliminados en las heces contienen en su interior una masa de gránulos de lecitina muy uniformes, denominado blastó- mero (figuras 15-5 y 15-6). Dependiendo de las condiciones climáticas (p. ej., en climas cálidos y Figura 15-18. Huevo infértil decorticado de Ascaris lumbricoides. Lugol, 400x. húmedos) y cuando la materia fecal no se proce- sa el mismo día, el blastómero puede desarrollar la larva móvil de primer estadio, dando lugar a un huevo larvado o embrionado que es la forma infectante del parásito (figuras 15-7 y 15-8). Huevo infértil Son producidos por hembras no fertilizadas, son ovoides de 88 a 94 μm de diámetro, solo tienen dos membranas porque carece de mem- brana vitelina y en su interior se observa una masa de gránulos de diferentes tamaños, desor- ganizados y refringentes (figuras 15-9 y 15-10). Tanto los huevos fértiles, embrionados o lar- vados y los infértiles, en ocasiones carecen de la capa mamelonada albuminoide convirtiéndose en huevos decorticados (figuras 15-8, 15-11 y 15-12). En solución salina y en la tinción con lugol, todos los huevos muestran las mismas caracte- rísticas, solo que en lugol se tornan más oscu- ros, (figuras 15-10, 15-13 a 15-18). T r ic h u r is tr ic h iu r a 81 Atlas de Parasitología 16 Trichuris trichiura16 Adulto Es un nematodo blanquecino cuyo nombre deriva del griego thrikhos, que significa pelo, por ser un gusano en forma de látigo, con sus tres quintas partes anteriores delgadas y sus dos quintas partes posteriores gruesas. En el extremo anterior se encuentra el orificio bu- cal y el estilete que le sirve para fijarse a la mucosa del intestino grueso del hospedero. La hembra mide de 3,5 a 5 cm de longitud y su extremo posterior es romo (figuras 16-1 y 16-3), el macho más pequeño que la hembra mide de 3 a 4,5 cm, extremo posterior enrolla- do hasta 360° o más y una espícula lanceolada, que sobresale a través de una vaina retráctil peneana de extremo bulboso, y cubierta de muchas espinas pequeñas y curvas (figuras 16-2 y 16-4). Figura 16-1. Adulto hembra deTrichuris trichiura. 16 T r ic h u r is t r ic h iu r a 82 Atlas de Parasitología Figura 16-2. Adulto macho de Trichuris trichiura. Figura 16-3. Adulto hembra de Trichuris trichiura. Aceto-Carmin de Semichon. T r ic h u r is tr ic h iu r a 83 Atlas de Parasitología 16 Figura 16-4. Adulto macho de Trichuris trichiura. Aceto-Carmin de Semichon. Figura 16-5. Huevo de Trichuris trichiura. Solución salina, 400X. 16 T r ic h u r is t r ic h iu r a 84 Atlas de Parasitología Figura 16-6. Huevo embrionado de Trichuris trichiura. Solución salina, 400X. Figura 16-7. Huevo de Trichuris trichiura. Lugol, 400X. T r ic h u r is tr ic h iu r a 85 Atlas de Parasitología 16 Figura 16-8. Huevo embrionado de Trichuris trichiura. Lugol, 400X. hueVo Solución salina Tiene forma de barril, mide de 50 a 54 μm de largo por 20 a 23 μm de ancho, posee mem- brana vitelina, que alimenta el embrión, y una cubierta triple cuya capa más externa suele impregnarse de bilis que le da un color café. Presenta dos prominencias intralaminares bipo- lares sin teñir, que tienen la apariencia de tapo- nes mucoidales (figura 16-5). Por lo general, al ser expulsado en las heces no están segmenta- dos y necesitan condiciones de temperatura y humedad para que se desarrolle la larva dando como resultado un huevo embrionado e infec- tante para el hospedero (figura 16-6). Tinción con lugol Se tiñe de café oscuro con el yodo y sigue con- servando iguales características que el huevo en solución salina (figuras 16-7 y 16-8). U n c in a ria s 87 Atlas de Parasitología 17 L Uncinarias17 as uncinarias pertenecen a la familia An- cylostomatidae que se caracteriza por la presencia de órganos cortantes, las dos especies que parasitan el intestino del- gado del hombre son: Ancylostoma duodenale y Necator americanus cuyos huevos excretados en la materia fecal son morfológicamente indis- tinguibles. Adulto Gusanos cilíndricos, blanquecinos con su extre- midad anterior curvada hacia el dorso en forma de gancho, de ahí el nombre uncinaria que vie- ne de la palabra griega uncus que quiere decir gancho. El macho mide 8 mm de longitud por 0,5 mm de ancho y el extremo posterior termi- na en una prolongación digitiforme de la cutí- cula, denominada bursa copulatriz (figuras 17-1 y 17-2). La hembra mide 12 mm de longitud por 0,5 mm de ancho y el extremo posterior termi- na en punta (figuras 17-1 y 17-3). El extremo anterior del parásito adulto se ca- racteriza por presentar una cápsula bucal con órganos cortantes, que le sirven para fijarse a la mucosa y permiten la diferenciación de es- pecies, el Ancylostoma duodenale tiene dos pares de dientes (figura 17-4) y el Necator ame- ricanus un par de placas (figura 17-5). Figura 17-1. Adultos macho y hembra de Uncinarias, en fresco. 17 U n c in a ri a s 88 Atlas de Parasitología Figura 17-2. Adulto macho de Uncinaria, extremo posterior. Aceto-Carmin de Semichon, 400X. Figura 17-3. Adulto hembra de Uncinaria, extremo posterior. Aceto-Carmin de Semichon, 400X. U n c in a ria s 89 Atlas de Parasitología 17 Figura 17-4. Boca de Ancylostoma duodenale. 400X. Figura 17-5. Boca de Necator americanus. Aceto-Carmin de Semichon, 400X. 17 U n c in a ri a s 90 Atlas de Parasitología Figura 17-6. Huevo de Uncinaria. Solución salina, 400X. Figura 17-7. Huevo embrionado de Uncinaria. Solución salina, 400X. U n c in a ria s 91 Atlas de Parasitología 17 Figura 17-8. Huevo de Uncinaria. Lugol, 400X. Figura 17-9. Huevo embrionado de Uncinaria. Lugol, 400X. 17 U n c in a ri a s 92 Atlas de Parasitología Figura 17-11. Larva rhabditiforme de Uncinaria. Figura 17-10. Larva rhabditiforme de Uncinaria, detalle de la boca. U n c in a ria s 93 Atlas de Parasitología 17 hueVo Solución salina Huevo de color grisáceo, ovalado, de 60 a 70 μm de longitud por 30 a 40 μm de ancho, cubierto por una sola membrana delgada y bien defini- da. En su interior se encuentra una blástula con numerosos blastómeros que dependiendo del estado de maduración se puede apreciar un es- pacio claro entre la blástula y la membrana o puede verse completamente lleno (figura 17-6). En raras ocasiones y dependiendo del tiempo Figura 17-12. Larva filariforme de Uncinaria. de permanencia de los huevos en el contenido intestinal, es posible observar una larva en el interior del huevo y aún eclosionar en las heces recién emitidas (figura 17-7). Tinción con lugol Los huevos se observan con las mismas carac- terísticas que en solución salina, sólo que el blastómero toma una coloración entre amarilla y café (figuras 17-8 y 17-9). Las figuras 17-10, 17-11 y 17-12 se describen en el capítulo 18. S tr o n g y lo id e s ste r c o r a lis 95 Atlas de Parasitología 18 Strongyloides stercoralis18 lArVA rhABditiforMe Es el estadio del parásito que hace diagnóstico de strongiloidiosis en la mayoría de los casos; sin embargo, en pacientes con inmunodeficiencias, pueden encontrarse en la materia fecal todos los estadios del parásito (larvas rhabditiforme y filariforme, huevos y hembras parásitas). Solución salina La larva rhabditiforme en materia fecal recién emitida, se observa móvil, mide 250 μm de longitud por 17 μm de ancho, su faringe se extiende hasta el tercio anterior del cuerpo y es de características rhabditiforme, esto es con un esófago muscular dividido en tres partes: el procorpus (forma cilíndrica), el ist- mo (angosto) y el bulbo. Posee una cavidad bucal muy pequeña y un primordio genitalgrande (4 μm) (figura 18-1), características que permiten diferenciarla de la larva rha- bditiforme de uncinaria, la cual tiene boca grande y no se le observa el primordio geni- tal (figuras 17-10 y 17-11). Figura 18-1. Larva rhabditiforme de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 400X. 18 S tr o n g y lo id e s st e r c o r a li s 96 Atlas de Parasitología Tinción con lugol Todas las estructuras antes mencionadas se ha- cen más visibles al teñir la larva con lugol, pero pierde su movimiento (figura 18-2). lArVA filAriforMe Solución salina Es el estadio infectante del parásito y en solu- ción salina presenta un movimiento muy rápido y direccionado, mide 400 a 700 μm de longitud por 12 a 20 μm de ancho. Su extremo anterior tiene una boca demasiado pequeña y cerrada que no le permite alimentarse, seguida por un esófago tubular que se extiende hasta el 40% de la longitud del cuerpo del parásito (figura 18-3). El extremo posterior termina en mues- ca (figura 18-4), característica morfológica que permite diferenciarla de la larva filariforme de uncinaria, cuyo extremo posterior termina en punta (figura 17-12). Tinción con lugol En tinciones con lugol la larva filariforme pier- de la movilidad, se observan las estructuras des- critas anteriormente y resalta la muesca caracte- rística del parásito (figura 18-5). heMBrA pArásitA Es transparente y delgada como un hilo, por lo que ha sido denominado “gusano de hilo.” Mide entre 2,0 y 2,8 mm de longitud por 37 μm de ancho, la porción anterior es aguzada y allí se encuentra la boca hexagonal que contiene seis papilas, ésta se continua con la faringe forma- da por dos glándulas faríngeas y una glándula dorsal, seguido por el esófago de característica rhabditiforme, o sea dividido en una parte ante- rior muscular (25%) y una posterior glandular (75%), separadas por una constricción llamada istmo. El esófago recorre hasta la cuarta parte del cuerpo del parásito y se continúa con el in- testino, para terminar en el recto, que se abre al exterior a través del ano, localizado sobre la lí- nea media ventral cerca de la cola (figura 18-6). Lo más prominente es el sistema reproduc- tor en el cual se puede apreciar los huevos en el útero extendidos en una sola fila, estos ocu- pan la mayor parte del cuerpo del gusano y sa- len a través de la vulva, localizada en el tercio posterior del cuerpo en la línea ventral medía (figura 18-7). heMBrA de VidA liBre Más pequeña que la hembra parásita (1,0 a 1,5 mm por 85 μm) pero con características morfo- lógicas similares, es transparente y aguzada en ambos extremos. Tiene esófago de caracterís- ticas rhabditiforme (figura 18-9) que ocupa el tercio anterior del cuerpo, el cual se continúa con el intestino y termina en el orificio anal. Lla- ma la atención la gran cantidad de huevos en el útero, que salen por la vulva, situada en la parte ventral entre los tercios posterior y medio (figura 18-8). MAcho de VidA liBre Es más pequeño que la hembra de vida libre, mide de 1,0 a 1,2 mm de longitud por 55 μm de ancho (figura 18-10). Tiene las mismas ca- racterísticas morfológicas que la hembra, pero su extremo posterior termina enroscado (figura 18-11). Posee sistema reproductor masculino completo y alrededor de la cloaca se encuen- tran las espículas que le sirven para la copula. hueVo Los huevos de la hembra parásita y de vida li- bre son morfológicamente indistinguibles y son semejantes a los huevos de uncinaria. El huevo puede salir de manera individual o en fila pega- dos por una mucosidad. Solución salina En solución salina se observa como una estruc- tura de color grisáceo, forma elipsoidal, de 70 por 40 μm, rodeado por una membrana delga- da que algunas veces es indefinida debido al moco adherido a ella. Puede presentar en su interior un blastómero transparente e irregular o la larva de primer estadio (figuras 18-12, 18- 13 y 18-14). Tinción con lugol Con lugol se tiñen de amarillo pálido y conser- van las mismas características descritas anterior- mente (figuras 18-15, 18-16 y 18-17). S tr o n g y lo id e s ste r c o r a lis 97 Atlas de Parasitología 18 Figura 18-2. Larva rhabditiforme de Strongyloides stercoralis. Lugol, 400X. Figura 18-3. Larva filariforme de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 100X. 18 S tr o n g y lo id e s st e r c o r a li s 98 Atlas de Parasitología Figura 18-4. Larva filariforme de Strongyloides stercoralis, extremo posterior, 400X. Figura 18-5. Larva filariforme de Strongyloides stercoralis. Lugol, 100X. S tr o n g y lo id e s ste r c o r a lis 99 Atlas de Parasitología 18 Figura 18-6. Hembra parasita adulta de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 100X. Figura 18-7. Hembra parasita adulta de Strongyloides stercoralis, detalle vulva. Solución salina, 400X. 18 S tr o n g y lo id e s st e r c o r a li s 100 Atlas de Parasitología Figura 18-9. Hembra de vida libre de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 100X. Figura 18-8. Hembra de vida libre, extremo anterior. Solución salina, 400X. S tr o n g y lo id e s ste r c o r a lis 101 Atlas de Parasitología 18 Figura 18-10. Macho de vida libre de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 100X. Figura 18-11. Macho de vida libre, extremo posterior. Solución salina, 400X. 18 S tr o n g y lo id e s st e r c o r a li s 102 Atlas de Parasitología Figura 18-12. Huevo de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 400X. Figura 18-13. Huevo embrionado de Strongyloides stercoralis. Solución salina, 400X. S tr o n g y lo id e s ste r c o r a lis 103 Atlas de Parasitología 18 Figura 18-14. Huevos en cadena de Strongyloides stercoralis. solución salina, 400X. Figura 18-15. Huevo de Strongyloides stercoralis. lugol, 400X. 18 S tr o n g y lo id e s st e r c o r a li s 104 Atlas de Parasitología Figura 18-16. Huevo embrionado de Strongyloides stercoralis. lugol, 400X. Figura 18-17. Huevos en cadena de Strongyloides stercoralis. lugol, 400X. E n te r o b iu s v e r m ic u la r is (o x iu r o s) 105 Atlas de Parasitología 19 Enterobius vermicularis (oxiuros)19 Adulto Gusano más o menos fusiforme, pequeño, blan- quecino y con envoltura externa muy transpa- rente (figuras 19-1 y 19-2). El extremo oral no tiene cápsula bucal verdadera, pero está provis- ta de tres labios y un ensanchamiento bilateral de la cutícula a manera de aletas cefálicas (figu- ras 19-3, 19-4 y 19-5). A través de su envoltura transparente se puede observar el esófago con un bulbo prominente que se continúa con el in- testino, el cual termina cerca de la cloaca. Tanto el macho como la hembra tienen un aparato ge- nital muy desarrollado. La hembra mide alrededor de 1 cm de lon- gitud por 0,3 a 0,5 mm de ancho, con un ex- tremo posterior marcadamente afilado y trans- parente por lo que recibe el nombre popular de “gusano en alfiler”. En estado de gravidez el útero está muy distendido y el cuerpo se llena de huevos (figura 19-5). Figura 19-1. Adulto hembra de Enterobius vermicularis en fresco. 19 E n te r o b iu s v e r m ic u la r is ( o x iu r o s) 106 Atlas de Parasitología Figura 19-2. Adultos de Enterobius vermicularis en fresco. Figura 19-3. Adulto de Enterobius vermicularis, extremo anterior, 400X. E n te r o b iu s v e r m ic u la r is (o x iu r o s) 107 Atlas de Parasitología 19 Figura 19-4. Adulto de Enterobius vermicularis, extremo anterior, 400X. Figura 19-5. Adulto de Enterobius vermicularis, extremo anterior. Aceto-Carmin de Semichon, 400X. 19 E n te r o b iu s v e r m ic u la r is ( o x iu r o s) 108 Atlas de Parasitología Figura 19-6. Huevo de Enterobius vermicularis. Test de Graham, 400X. Figura 19-7. Huevo en materia fecal de Enterobius vermicularis. Solución salina, 400X. E n te r o b iu s v e r m ic ula r is (o x iu r o s) 109 Atlas de Parasitología 19 Figura 19-8. Huevo embrionado en materia fecal de Enterobius vermicularis. Solución salina, 400X. Figura 19-9. Huevo en materia fecal de Enterobius vermicularis. Lugol, 400X. 19 E n te r o b iu s v e r m ic u la r is ( o x iu r o s) 110 Atlas de Parasitología El macho raramente se encuentra, pues muere después de la copula. Mide de 2 a 5 mm de lon- gitud por 0,1 a 0,2 mm de ancho. El extremo posterior termina en curva hacia la parte ventral del parásito, con una sola espícula copulatriz. hueVo El diagnóstico de los huevos se hace frecuen- temente con la técnica de Graham o de la cin- ta engomada, por esta técnica se observa una estructura translucida, alargada, con una cara plana y otra convexa que le da la forma de la letra D si se observa en la posición que mues- tra el lado plano, de lo contrario se ve ovalada (figura 19-6). El huevo mide 50 a 60 μm de lon- gitud por 30 μm de ancho, está recubierto por dos membranas, una externa albuminoidea, transparente, relativamente gruesa y una inter- Figura 19-10. Huevo embrionado en materia fecal de Enterobius vermicularis. Lugol, 400X. na, formada de dos capas de quitina y una capa embrionaria interna lipoide. En el interior del huevo se puede observar o no la larva. Los huevos no son depositados comúnmen- te dentro del intestino, sin embargo, en raras ocasiones pueden encontrarse en la materia fecal y ser diagnosticados por medio del co- prológico. Solución salina El huevo observado con solución salina tiene las mismas características morfológicas descri- tas anteriormente y en su interior se observa el blastómero o la larva (figuras 19-7 y 19-8). Tinción con lugol Toma la coloración del yodo, se torna de un color amarillo y conserva iguales características morfológicas descritas anteriormente (figuras 19-9 y 19-10). T a e n ia so liu m o sa g in a ta 111 Atlas de Parasitología 20 S Taenia solium o saginata20 e puede llegar al diagnóstico de espe- cie, ya sea mediante la observación de los proglótides grávidos en fresco o te- ñidos con colorantes especiales, o por la identificación del escolex. proglótide Los proglótides grávidos son rectangulares, los de Taenia saginata miden de 1,5 a 2,2 cm de largo por 1 cm de ancho y tiene una fuerte mus- culatura, mientras que los de Taenia solium miden 0,7 a 2,2 cm de largo y con menos mus- culatura (figura 20-1). Los proglótides grávidos contienen tanto el sistema reproductor mascu- lino como femenino completos, por lo tanto, se puede llegar al diagnóstico de especie, me- diante el conteo de las ramificaciones uterinas, lo cual puede hacerse poniendo el proglótide entre dos portaobjetos y observarlo contra luz, si tiene menos de 12 ramificaciones uterinas es Taenia solium y más de 12 Taenia saginata. La observación puede mejorase agregándole un Figura 20-1. Proglotides de Taenia en fresco. 20 T a e n ia s o li u m o s a g in a ta 112 Atlas de Parasitología Figura 20-2. Proglotide de Taenia solium. Aceto-Carmin de Semichon. Figura 20-3. Proglotide de Taenia saginata. Aceto-Carmin de Semichon. T a e n ia so liu m o sa g in a ta 113 Atlas de Parasitología 20 Figura 20-4. Escolex de Taenia solium. Aceto-Carmin de Semichon, 400X. Figura 20-5. Huevo de Taenia. Solución salina, 400X. 20 T a e n ia s o li u m o s a g in a ta 114 Atlas de Parasitología Figura 20-6. Huevo de Taenia. Lugol, 400X. Figura 20-7. Cisticercos obtenidos de carne. T a e n ia so liu m o sa g in a ta 115 Atlas de Parasitología 20 poco de ácido acético, con el fin de aclararlo, o coloreándolo con Áceto Carmín de Semichón (figuras 20-2 y 20-3). escolex Debido a su pequeño tamaño es difícil encon- trar el escolex en la materia fecal, pero su ha- llazgo, además de servir para hacer diagnóstico de especie, es prueba fehaciente de la curación del paciente. El escolex generalmente es cuadrangular de 1 mm de diámetro, con cuatro ventosas mus- culosas y en forma de copa. Taenia solium po- see un rostelo más o menos redondeado, hiali- no y armado con una doble corona de ganchos grandes y pequeños en número de 22 a 32 (fi- gura 20-4) y Taenia saginata tiene un rostelo sin ganchos (Taenia desarmada). hueVo El huevo de Taenia solium y de Taenia sa- ginata observados al microscopio óptico en Figura 20-8. Carne de cerdo con cisticercos de Taenia solium. muestras de materia fecal, son morfológica- mente indistinguibles, por lo tanto, no ha- cen diagnóstico de especie y deben ser in- formados como huevos de Taenia solium o saginata. Solución salina El huevo es redondo o ligeramente ovalado, de color café intenso y de 30 a 40 μm de diá- metro. Está cubierto por una membrana grue- sa y radiada, que le da la apariencia de llanta. Internamente el huevo está provisto de una delgada membrana hialina de origen embrio- nario, seguido por una oncosfera o embrión hexacanto con tres pares de ganchos. El núme- ro de ganchos que se observa depende de la posición del huevo (figura 20-5). Tinción con lugol Presenta las mismas características descritas anteriormente, se observa de un color café muy intenso que dificulta la visualización de sus estructuras (figura 20-6), por lo que la identificación del huevo es mucho más clara en solución salina. cisticerco Los cisticercos (figura 20-7), son el estadio infec- tante para el hospedero definitivo de la Taenia. El cisticerco de Taenia solium (figura 20-8), es ovalado, posee un escolex invaginado con gan- chos y ventosas, mientras que el de Taenia sa- ginata no tiene ganchos en su escolex. Ambos cisticercos pueden vivir por varios años en los tejidos del hospedero intermediario. H y m e n o le p is sp . 117 Atlas de Parasitología 21 Hymenolepis sp.21 hyMeNolepis NANA Huevo Solución salina. Una vez los proglótides grávi- dos se desintegran en el intestino, liberan en la materia fecal, huevos que se observan hialinos en solución salina porque no toman la bilis, son esféricos u ovalados, de 30 a 50 μm de diámetro, rodeados por dos membranas, una externa del- gada y bien definida, muy separada de la segun- da membrana interna. En el interior del huevo se encuentra el embrión hexacanto u oncosfera, que está cubierta por una gruesa envoltura con dos engrosamientos polares, de los cuales salen cuatro filamentos y dentro de la oncosfera tres pares de ganchos, dispuestos de forma paralela, que no siempre son visibles en su totalidad, por- que dependiendo de la posición del huevo se puede ver uno, dos y en algunas ocasiones hasta los seis ganchos (figura 21-1). Figura 21-1. Huevo de Hymenolepis nana. Solución salina, 400X. 21 H y m e n o le p is s p . 118 Atlas de Parasitología Figura 21-2. Huevo de Hymenolepis nana. Lugol, 400X. Figura 21-3. Huevo de Hymenolepis diminuta. Solución salina, 400X. H y m e n o le p is sp . 119 Atlas de Parasitología 21 Tinción con lugol. El huevo se ve de color amarillo pálido u oscuro y conserva las carac- terísticas descritas anteriormente (figura 21-2). hyMeNolepis diMiNutA Huevo Solución salina. Es un huevo grande de 60 a 79 μm de longitud por 72 a 86 μm de ancho, casi esféricos y de un color café intenso, debi- do a la bilis que toma, está cubierto por dos Figura 21-4. Huevo de Hymenolepis diminuta, lugol, 400X. membranas muy pegadas y entre la membrana interna y la oncosfera se encuentra una matriz gelatinosa. La oncosfera central o excéntrica está cubierta por una membrana, que tiene dos engrosamientos sin filamentos polares y en la parte central de la oncosfera presenta seis gan- chos lanceolados dispuestos en forma de aba- nico los cuales no siempre son todos visibles (figura 21-3). Tinción con lugol. El huevo se ve de color café intenso u oscuro y conserva las características descritas anteriormente (figura 21-4).P a r a g o n im u s sp . 121 Atlas de Parasitología 22 22 Paragonimus sp. hueVo Existen varias especies que parasitan al hombre, siendo el Paragonimus westermani, la especie más conocida; el hábitat natural en el hombre es el pulmón, sin embargo, los huevos pasan al sistema digestivo y salen en la materia fecal. Solución salina El huevo es ovoide, pero con uno de sus extre- mos más ancho. En el polo más delgado se en- cuentra una tapa u opérculo ligeramente apla- nado. Mide de 80 a 160 μm de largo por 50 a 60 μm de ancho; es de color café, la membrana que lo recubre es delgada y presenta depresio- nes y elevaciones dándole aspecto ondulado (fi- gura 22-1). En su interior se observa una masa de gránulos debido a que sale sin madurar y aún no ha formado el embrión. Tinción con lugol Tiene las mismas características descritas para solución salina, pero con lugol se tiñe tan in- tensamente que es difícil hacer el diagnóstico, (figura 22-2). Figura 22-1. Huevo de Paragonimus spp. Solución salina, 400X. 22 P a r a g o n im u s sp . 122 Atlas de Parasitología Figura 22-2. Huevo de Paragonimus spp. Lugol, 400X. F a sc io la h e p á tic a 123 Atlas de Parasitología 23 Fasciola hepática23 P arásito cuyo hospedero definitivo es el ganado vacuno; sin embargo, en algu- nas ocasiones, el parásito adulto puede habitar el hígado del humano donde pone sus huevos que salen por los conductos biliares y se excretan con la materia fecal. hueVo Solución salina Es grande de forma elíptica, operculado y de color pardo amarillento, mide de 130 a 140 μm de largo por 63 a 90 μm de ancho y está cu- bierto por una membrana gruesa y definida. En su interior se observa una masa granulosa y el embrión no se observa porque a la materia fecal llega el huevo sin madurar (figuras 23-1 y 23-2). Tinción con lugol Tiene las mismas características descritas para solución salina, pero con lugol se tiñe tan in- tensamente que es difícil hacer el diagnóstico. Adulto Gusano plano en forma de hoja lanceolada, con un cono cefálico bien diferenciado y un extremo posterior redondeado. Es un parásito Figura 23-1. Huevo de Fasciola hepatica. Solución salina, 400X. 23 F a sc io la h e p á ti c a 124 Atlas de Parasitología Figura 23-2. Huevos de Fasciola hepatica. Solución salina, 400X. Figura 23-3. Adulto de Fasciola hepatica en fresco. F a sc io la h e p á tic a 125 Atlas de Parasitología 23 Figura 23-4. Adulto de Fasciola hepatica. Aceto-Carmin de Semichon. carnoso de 30 mm de longitud por 13 mm de ancho, que en fresco es de color blanquecino o grisáceo (figura 23-3). En el extremo anterior hay una proyección cónica visible y se aprecia la ventosa bucal y la ventosa ventral. Posee una fa- ringe bien desarrollada, esófago corto, sistema digestivo compuesto por dos tubos cerrados y sistema reproductor masculino y femenino completo. Coloreando el parásito con Áceto-Carmín de Semichón, todas las estructuras descritas ante- riormente se hacen muy visibles (figura 23-4). S c h is to s o m a sp . 127 Atlas de Parasitología 24 E Schistosoma sp.24 xisten tres especies importantes como agentes de enfermedad para el hombre: Schistosoma haematobium cuyo hábi- tat son las vénulas vesicales, el Schisto- soma mansoni y Schistosoma japonicum que habitan las vénulas mesentéricas y los plejos he- morroidales, por lo tanto, los huevos caen a la luz del colon y salen en la materia fecal de los hospederos humanos infectados. La infección por S. japonicum está confina- da a áreas de extremo oriente mientras que el S. mansoni tiene una amplia distribución geo- gráfica y ha sido reportado en países de África, Europa y América del norte, central y del sur. En Colombia no ha sido informado hasta la fe- cha, sin embargo, existe en los países vecinos y tenemos los hospederos intermediarios, para que éste desarrolle el ciclo biológico, por lo que es importante conocer las características morfo- lógicas del huevo de S. mansoni por la posibi- lidad de encontrarlo en las materias fecales de inmigrantes o de pacientes colombianos. hueVo Solución salina El huevo de Schistosoma mansoni es una es- tructura grande y ovalada, de 114 a 175 μm de longitud por 45 a 68 μm de ancho, está cubierto por una membrana de color marrón amarillento y como característica presenta una espina lateral. Los huevos salen maduros en la materia fecal del hospedero infectado (figuras 24-1, 24-2 y 24-3). Tinción con lugol Conserva las mismas características descrita para el huevo en solución salina, pero se ve amarillo porque toma la coloración de yodo del lugol. Figura 24-1. Huevo de Schistosoma mansoni. Solución salina, 400X. 24 S c h is to s o m a s p . 128 Atlas de Parasitología Figura 24-2. Huevo de Schistosoma mansoni. Solución salina, 400X. Figura 24-3. Huevo de Schistosoma mansoni. Solución salina, 400X. D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s tisu la re s 129 Atlas de Parasitología 25 UNidAd iii Protozoos tisulares 25. Diagnóstico de los parásitos tisulares .............................131 26. Plasmodium falciparum .................................................135 27. Plasmodium vivax ..........................................................139 28. Toxoplasma gondii ..........................................................151 29. Leishmania sp. ................................................................155 30. Trypanosoma cruzi .........................................................159 D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s tisu la re s 131 Atlas de Parasitología 25 25 Diagnóstico de los parásitos tisulares MAlAriA El diagnóstico de malaria se hace en el labo- ratorio, por la identificación de la especie de Plasmodium presente en la sangre, mediante examen microscópico de gota gruesa, que es el procedimiento más eficiente y con el exten- dido de sangre periférica, que complementa el estudio de la morfología de los parásitos y de los eritrocitos. Es indispensable hacer el re- cuento parasitario, el cual es necesario para la evaluación clínica. La muestra se obtiene por punción principalmente del dedo anular, pero también puede utilizarse el lóbulo de la oreja y en niños pequeños el dedo gordo del pie o el talón. La búsqueda del parásito circulante se pue- de realizar en cualquier momento de la enfer- medad, aunque algunos recomiendan el pe- riodo afebril cuando está ocurriendo el ciclo eritrocítico, ya que en esta etapa es más fácil encontrar los parásitos en los glóbulos rojos. En las infecciones por P. falciparum, es posible que transcurran algunas horas sin que se vean formas jóvenes en la circulación periférica, por- que la esquizogonia se completa en los vasos capilares de órganos profundos, por lo tanto, el momento ideal para la toma de la muestra es después del paroxismo. En las infecciones por P. vivax y P. malariae, el desarrollo de las formas parasitarias asexuadas es continuo en la sangre periférica, después de haberse liberado los merozoítos del esquizonte maduro. Las formas parasitarias que se pueden obser- var son trofozoitos jóvenes, trofozoitos madu- ros, trofozoitos ameboides, gametocitos, y es- quizontes. La observación de únicamente trofo- zoitos pequeños (anillos) orientan la infección a P. falciparum, mientras que la presencia de formas maduras y esquizontes orientan hacia el diagnostico de otras especies. Gota Gruesa Permite hacer un diagnóstico rápido y eficaz de malaria ya que debido a la cantidad de san- gre que se utiliza se pueden observar mayor cantidad de parásitos que en el extendido. Una gota gruesa no debe tener un grosor excesivo, los portaobjetos que se utilizan deben estar nuevos, limpios y desengrasados. El procedimiento para hacer una gota grue- sa es el siguiente: directamente del dedo poner una gota de sangre (0,05 mL)en el extremo del portaobjeto, y de la misma forma poner una se- gunda gota a 1,5 cm de la primera. Con el extre- mo de otro portaobjetos limpio y seco extender la sangre en forma de zig zag desde el centro de la gota hacia arriba, luego pasa hacia abajo y nuevamente al centro sin levantar y de forma rápida. Dejar secar a temperatura ambiente y colorear con Field. Para la mejor visualización de los parásitos es necesario lisar los glóbulos rojos. En aumento de 1000X buscar las formas parasitarias. Extendido de sangre periférica En parasitemias bajas este examen puede estar negativo mientras la gota gruesa estar positiva. Este método facilita la observación del detalle morfológico de los parásitos. El procedimien- to para un buen extendido es el siguiente: poner una pequeña gota de sangre (0,05 mL) a 1cm de un extremo del portaobjetos. Si se emplean portaobjetos de extremo esmerila- do, la sangre se pone cerca de este. Dejar el portaobjetos sobre una superficie plana con la gota de sangre al lado derecho. Invertir la orientación si es zurdo. Utilizar un segundo portaobjetos para empujar la gota de sangre, ponerlo delante de la gota en ángulo de 45°, deslizar el portaobjetos de empuje hacia atrás, hacia la gota de sangre. Permitir que la gota se extienda únicamente hasta tres cuartas partes 25 D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s ti su la re s 132 Atlas de Parasitología del bisel del portaobjetos de empuje. Deslizar de forma rápida, suave y continua el portaobje- tos hacia adelante (lejos de la gota). Dejar secar a temperatura ambiente y colorear con Wright. toxoplAsMosis Hasta la aparición de las técnicas de biología molecular, el diagnóstico etiológico de la toxo- plasmosis se ha basado, casi exclusivamente, en la detección de anticuerpos específicos en suero, reservándose las técnicas de inocula- ción en ratón y el cultivo celular para las infec- ciones graves en pacientes inmunodeficientes con toxoplasmosis cerebral y en infección ver- tical, por la infección aguda en la mujer ges- tante. La demostración directa de las formas parasitarias de T. gondii, es posible al obte- ner diferentes tipos de muestras del paciente, según la expresión clínica de la enfermedad, pero raramente se observan en sangre perifé- rica, dado su corto tiempo en sangre, aún du- rante la fase aguda y por su tropismo a otros tejidos. Para la observación de los parásitos es ne- cesario hacer coloraciones derivadas de Ro- manosky (Giemsa o Wright), que permiten evidenciar las características morfológicas del taquizoíto y de células parasitadas (seudo- quistes) en diferentes tipos de muestras del paciente, como el sedimento del líquido ce- falorraquideo, líquido amniótico, frotis o ma- cerado del tejido afectado; así mismo, dichas muestras podrían ser utilizadas para aislar el parasito en animales de laboratorio o en culti- vos celulares. leishMANiosis El diagnóstico definitivo de las diferentes formas clínicas de leishmaniosis requiere la demostra- ción del parásito por alguna prueba de labora- torio. Ninguno de los métodos de diagnóstico parasitológico logra diagnosticar el 100% de los casos, por lo tanto, para incrementar la pro- babilidad del diagnóstico se hace necesario la combinación de varias técnicas, sobre todo en aquellos casos crónicos de leishmaniosis cutá- nea y mucosa, donde muchas veces el diagnós- tico es complicado debido a la poca cantidad de parásitos en las lesiones. Diagnóstico parasitológico Varios procesos de laboratorio y varios tipos de muestra son usados para el diagnóstico pa- rasitológico de leishmaniosis, estos incluyen: la observación de amastigotes en tejido cutá- neo o mucoso para la leishmaniosis cutánea y mucosa ó en aspirado de médula ósea o bazo para leishmaniosis visceral; el cultivo de teji- dos o de concentrados de células blancas para la observación de promastigotes: y el uso de herramientas moleculares para la detección del parásito. Diagnóstico de la leishmaniosis cutánea. En la leishmaniosis cutánea para la identificación de los parásitos en tejido podemos utilizar el frotis para examen directo o el aspirado para cultivo. El frotis es un procedimiento muy fá- cil, económico y rápido de realizar. Este méto- do presenta una muy variada sensibilidad, pero cuando se tiene buena experiencia en la técnica de toma, procesamiento y lectura de la mues- tra, se logra alcanzar una sensibilidad mayor del 90%. El examen consiste en obtener tejido, ya sea del borde activo de la lesión o del centro de la úlcera, extenderlo en láminas portaobjetos y colorearlo con el colorante de Giemsa. El culti- vo de los parásitos contribuye al diagnóstico de la enfermedad y en la identificación de la espe- cie que está causando la patología. El porcentaje de positividad varía dependiendo del tiempo de evolución de las lesiones y de la especie de Leis- hmania. Para el cultivo de Leishmania se han utilizado medios axénicos monofásicos o bifá- sicos, sin embargo, el medio más idóneo es el conocido como NNN (del inglés, Novy-Nicolle- McNeal). La técnica consiste en aspirar material del borde de la lesión con ayuda de una aguja fina y una jeringa de tuberculina que contiene solución tamponada de fosfatos y antibióticos. El material obtenido al aspirar se coloca en el medio de cultivo y se lleva a incubar a 26°C y se observa cada semana al microscopio invertido en busca de las formas promastigotes. Diagnóstico de leishmaniosis mucosa. A todo caso sospechoso de leishmaniosis muco- sa se le debe realizar biopsia de mucosa na- sal, la cual debe ser practicada por personal entrenado o por otorrinolaringólogos con experiencia en éste procedimiento. Con este material se puede realizar un examen directo, cultivo o ambos. La escasa cantidad de parási- D ia g n ó stic o d e lo s p a rá sito s tisu la re s 133 Atlas de Parasitología 25 tos en las lesiones mucosas hace a veces impo- sible la demostración parasitológica de la en- fermedad, por lo tanto, el diagnóstico de caso de leishmaniosis mucosa puede hacerse si el paciente presenta un cuadro clínico compati- ble, una cicatriz característica secuela de una lesión cutánea, una prueba de Montenegro positiva y un título de anticuerpos anti Leish- mania mayor o igual a 1:32. Diagnóstico de leishmaniosis visceral. Los signos y síntomas (síndrome febril prolonga- do, hepatoesplenomegalia, anemia y poliade- nopatías) observados en la leishmaniosis visce- ral no son lo suficientemente específicos como para diferenciarla entre otros de infecciones generalizadas o malaria, por lo tanto, la de- mostración del parásito en aspirado de médu- la ósea o bazo es requisito indispensable para instaurar el tratamiento. El aspirado de bazo lo debe realizar únicamente personal entrena- do, bajo condiciones de rigurosa asepsia. Con los aspirados se obtiene el material para hacer examen directo o cultivo. tripANosoMiAsis El diagnóstico de la enfermedad de Chagas debe elaborarse con base en el estudio clini- coepidemiológico y los datos aportados por el laboratorio, dado que los síntomas y signos son inespecíficos. En lo referente al laborato- rio, los exámenes a realizar dependerán de la etapa clínica, al inicio de la infección los estu- dios van a centrarse en la búsqueda del agente, puesto que en ésta etapa se encuentran parasi- temias importantes, mientras que en las etapas latente y crónica el diagnóstico se realiza fun- damentalmente por los métodos serológicos debido a que la parasitemia va disminuyendo hasta hacerse mínima. Etapa aguda Los estudios estarán centrados en la búsqueda de T. cruzi en sangre. La sensibilidad de los mis- mos es variable, por lo que se aconseja mante- ner la siguiente rutina diagnóstica de acuerdo a protocolos establecidos: Métodos directos. Búsqueda de tripomasti-gotes metaciclicos de T. cruzi en sangre peri- férica. Son métodos 100% específico, pero de muy baja sensibilidad, ya que la observación de los mismos depende del tamaño de la gota y la cantidad de parásitos circulantes. La mues- tra se obtiene por punción principalmente del dedo anular, pero también puede utilizarse el lóbulo de la oreja y en niños pequeños el dedo gordo del pie o el talón. Sujetar firmemente el dedo sin tocar el área limpia y con la punta de la lanceta punzar el costado del dedo, limpiar la primera gota de sangre con un algodón seco y presionar suavemente el dedo para que apa- rezca otra gota de sangre. Sangre fresca entre lámina y laminilla. To- mar una gota de sangre, ponerla entre lámina y laminilla y observar al microscopio en au- mento de 400X. La movilidad de los tripomas- tigotes facilita su observación. Gota gruesa. Directamente del dedo poner una gota de sangre (0,05 mL) en el extremo del por- taobjeto, que debe estar nuevo y desengrasado, y seguir las mismas instrucciones dadas para el examen de gota gruesa para el diagnóstico de malaria. Dejar secar a temperatura ambiente y colorear. En aumento de 400X buscar los tripo- mastigotes metaciclicos de forma alargada, en C o S, con núcleo, kinetoplasto, flagelo y mem- brana ondulante. Extendido de sangre periférica. Poner una pequeña gota de sangre (0,05 mL) a 1 cm de un extremo de la lámina portaobjeto. Si se emplean portaobjetos de extremo esmerilado, la sangre se pone cerca de éste. Se siguen las instruccio- nes dadas para hacer el extendido de sangre pe- riférica para el diagnóstico de la malaria. Dejar secar a temperatura ambiente y colorear con Giemsa o Wright. En aumento de 400X buscar los tripomastigotes metacíclicos con las mismas características descritas en la gota gruesa. Método de Strout. Este método concentra los elementos parasitarios mediante centrifuga- ción. La sensibilidad es del 95%. Tomar sangre venosa en tubo seco. Dejar retraer el coagulo y centrifugar a baja velocidad (200 g), tomar el sobrenadante y centrifugar este a 600 g. Ana- lizar el sedimento entre lámina y laminilla y observar al microscopio en aumento de 400X. También se puede hacer extendido y colorear para buscar los tripomastigotes con la caracte- rísticas ya descritas. 25 D ia g n ó st ic o d e l o s p a rá si to s ti su la re s 134 Atlas de Parasitología Microhematocrito. Este método es recomen- dado en los recién nacidos, por la escasa canti- dad de sangre utilizada. Su sensibilidad es del 95%. Tomar sangre en un capilar, centrifugar- la a 3000 g por 40 segundos. Al terminar la centrifugación se puede observar al microsco- pio la interfase entre los glóbulos rojos y los blancos, o se puede cortar el tubo capilar en la zona donde está la capa de leucocitos. Esta capa se pone entre lámina y laminilla y se ob- serva al microscopio en aumento de 400X en busca de tripomastigotes móviles. Igual que en el método de Strout, también se pueden hacer coloraciones. Métodos indirectos. El xenodiagnóstico y el hemocultivo son los métodos parasitológicos indirectos clásicos, cuya sensibilidad depende del grado de parasitemia del paciente. Estos métodos son posibles de realizar en los labora- torios especializados. En la etapa aguda el xe- nodiagnóstico tiene una sensibilidad cercana a 100%. Etapa latente y crónica En estas etapas, las parasitemias son transito- rias, por lo que la detección del parásito en sangre es totalmente aleatoria. El diagnóstico se basa en el hallazgo de anticuerpos circulan- tes anti T. cruzi, los que pueden ser detecta- dos desde las primeras semanas de infección. Se recomienda utilizar al mismo tiempo, por lo menos dos técnicas complementarias para identificar a un paciente como chagásico, sien- do una de ellas, en lo posible, la inmunofluo- rescencia indirecta (IFI) (pautas recomenda- das por OMS), que tiene una sensibilidad del 100% en estas etapas, y su especificidad es cer- cana a 100%. Otra técnica recomendada es la Hemaglutinación indirecta (HAI) y el análisis de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA, por su sigla en inglés). P la sm o d iu m fa lc ip a r u m 135 Atlas de Parasitología 26 E Plasmodium falciparum26 n sangre periférica solamente se observan anillos y cuando cursa una malaria grave se pueden encontrar esquizontes. Los ga- metocitos se observan cuando el paciente ha sido tratado y está en fase de recuperación. ANillos Son estructuras pequeñas que ocupan una sexta parte del eritrocito. Están constituidos por citoplasma regular sin pigmento malárico y una sola cromatina. En algunas ocasiones se observan en forma de candelabro aparente- mente con dos gránulos de cromatina, pero es un anillo que posee una única cromatina alargada de la que sólo se evidencia los extre- mos, por tener en el centro diferente punto de refracción, lo que origina un puente cromatí- nico que no es visible al microscopio de luz (figura 26-1). Figura 26-1. Anillos de Plasmodium falciparum en gota gruesa. Giemsa, 1000X. 26 P la sm o d iu m f a lc ip a r u m 136 Atlas de Parasitología Figura 26-2. Anillos y Esquizonte de Plasmodium falciparum en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 26-3. Gametocito de Plasmodium falciparum en gota gruesa. Giemsa, 1000X. P la sm o d iu m fa lc ip a r u m 137 Atlas de Parasitología 26 Figura 26-4. Gametocito de Plasmodium falciparum en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 26-5. Gametocito y anillos de Plasmodium falciparum en extendido delgado. Giemsa, 1000X. 26 P la sm o d iu m f a lc ip a r u m 138 Atlas de Parasitología esQuizoNte Raras veces sale a sangre periférica. Es una estructura con citoplasma único, segmentado o independiente con dos o más gránulos de cromatina y presencia de pigmento malárico (figura 26-2). Figura 26-6. Gametocito y anillos de Plasmodium falciparum en extendido delgado. Giemsa, 1000X. gAMetocito Estructura con citoplasma generalmente elonga- do que le da forma de semiluna o salchicha, y en algunas ocasiones de forma irregular, presenta un gránulo de cromatina laxa y pigmento malári- co de aspecto grueso alargado, ubicado sobre o alrededor de la cromatina (figuras 26-3 a 26-6). P la s m o d iu m v iv a x 139 Atlas de Parasitología 27 Plasmodium vivax E 27 n sangre periférica podemos observar todos los estadios de Plasmodium. Anillos Semejante a los anillos de Plasmodium falcipa- rum, pero en algunas ocasiones el citoplasma tiende a deformarse (figura 27-1). Trofozoíto ameboide Es una estructura grande de forma anillada con citoplasma un poco irregular, un solo gránulo de cromatina compacta o condensada y sin pig- mento malárico (figuras 27-2 a 27-6). Trofozoíto maduro Forma grande que ocupa las dos terceras par- tes del eritrocito, con citoplasma ameboide e irregular, presentan una cromatina compacta o condensada y presencia de pigmento malárico (figuras 27-7 a 27-11). Esquizonte Estructura grande, ameboide, con citoplasma único, segmentado o independiente, con dos o más gránulos de cromatina compacta y pre- sencia de pigmento malárico (figuras 27-12 a 27-16). Gametocito Forma grande esférica, con citoplasma irregular y presencia de granulaciones azul intenso, con una sola cromatina laxa y abundante pigmento malárico de aspecto fino o delgado, ubicado en el citoplasma (figuras 27-17 a 27-23). Figura 27-1. Anillos de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 140 Atlas de Parasitología Figura 27-2. Anillos y trofozoítos ameboides de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 27-3. Trofozoíto ameboide de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. P la s m o d iu m v iv a x 141 Atlas de Parasitología 27 Figura 27-4. Trofozoíto ameboide de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura27-5. Trofozoíto ameboide de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 142 Atlas de Parasitología Figura 27-6. Trofozoíto ameboide de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura 27-7. Trofozoíto maduro de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. P la s m o d iu m v iv a x 143 Atlas de Parasitología 27 Figura 27-8. Trofozoíto maduro de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 27-9. Trofozoíto maduro de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 144 Atlas de Parasitología Figura 27-10. Trofozoíto maduro de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura 27-11. Trofozoíto maduro de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. P la s m o d iu m v iv a x 145 Atlas de Parasitología 27 Figura 27-12. Esquizonte de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 27-13. Esquizonte de Plasmodium vivax y anillos en gota gruesa. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 146 Atlas de Parasitología Figura 27-14. Esquizonte de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 27-15. Esquizonte de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. P la s m o d iu m v iv a x 147 Atlas de Parasitología 27 Figura 27-16. Esquizonte de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura 27-17. Gametocitos de Plasmodium vivax y anillos en gota gruesa. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 148 Atlas de Parasitología Figura 27-18. Gametocito de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. Figura 27-19. Gametocitos de Plasmodium vivax en gota gruesa. Giemsa, 1000X. P la s m o d iu m v iv a x 149 Atlas de Parasitología 27 Figura 27-20. Gametocito de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura 27-21. Gametocito de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. 27 P la s m o d iu m v iv a x 150 Atlas de Parasitología Figura 27-22. Gametocito de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. Figura 27-23. Gametocito de Plasmodium vivax en extendido delgado. Giemsa, 1000X. T o x o p la sm a g o n d ii 151 Atlas de Parasitología 28 Toxoplasma gondii28 tAQuizoíto Es la forma del parásito que se reproduce con mayor rapidez, mide alrededor de 6 μm de lar- go por dos de ancho, es alargado y en forma de arco, con un extremo puntiagudo y el otro romo. Con las coloraciones de Romanowsky el citoplasma se colorea de azul y el núcleo ubica- do en el centro de la célula se colorea de rojo (figuras 28-1 y 28-2). Cuando se realiza la inmunofluorescencia indirecta para detectar anticuerpos anti-Toxo- plasma, los taquizoitos se observan de color verde manzana cuando la prueba es positiva, (figura 28-3). pseudoQuiste Se llama pseudoquiste a la célula monocítica hospedera, que alberga en su interior taquizoí- tos en división. En el pseudoquiste se eviden- cia el núcleo de la célula hospedera, su cito- plasma y una vacuola parasitófora donde se multiplican los taquizoítos de manera rápida (figuras 28-4 y 28-5). Figura 28-1. Taquizoíto de Toxoplasma gondii. Giemsa, 1000X. 28 152 Atlas de Parasitología T o x o p la sm a g o n d ii Figura 28-2. Taquizoítos de Toxoplasma gondii. Giemsa, 1000X. Figura 28-3. Inmunofluorescencia indirecta (IFI) positiva, 400X. T o x o p la sm a g o n d ii 153 Atlas de Parasitología 28 Figura 28-4. Pseudoquiste de Toxoplasma gondii. Giemsa, 1000X. Figura 28-5. Pseudoquiste de Toxoplasma gondii. Giemsa, 1000X. 155 Atlas de Parasitología 29 L e is h m a n ia sp . Leishmania sp.29 AMAstigote El amastigote se localiza y divide en el interior de los macrófagos del hospedero vertebrado; presenta una forma ovalada o redondeada y mide de 2 a 5 μm de diámetro mayor, posee núcleo, generalmente excéntrico, y adyacen- te a éste se encuentra el kinetoplasto (figuras 29-1 a 29-4). proMAstigote El promastigote se desarrolla extracelularmente en el intestino del hospedero invertebrado, es fusiforme y móvil gracias a la presencia del fla- gelo que emerge de su cuerpo; tiene un núcleo que se sitúa en el centro del parásito y un kineto- plasto en la parte anterior, mide de 15 a 20 μm de diámetro mayor. Es el estadio que se encuen- tra en los medios de cultivo (figuras 29-5 y 29-6). Figura 29-1. Amastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. 29 L e is h m a n ia s p . 156 Atlas de Parasitología Figura 29-2. Amastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. Figura 29-3. Amastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. 157 Atlas de Parasitología 29 L e is h m a n ia sp . Figura 29-4. Amastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. Figura 29-5. Promastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. 29 L e is h m a n ia s p . 158 Atlas de Parasitología Figura 29-6. Promastigotes de Leishmania. Giemsa, 1000X. 159 Atlas de Parasitología 30 T r y p a n o so m a c r u z i Trypanosoma cruzi30 trypoMAstigote Aspecto fusiforme, mide de 20 a 25 μm de longitud, es curvado en forma de C o S, tie- ne un citoplasma poco granuloso y un núcleo central vesiculoso. Posee un kinetoplasto sub- terminal, posterior al núcleo (que es una mi- tocondria modificada), del cual emerge una membrana ondulante que recorre al parásito, en cuyo borde libre lleva un flagelo (figuras 30-1 a 30-3). Se lo encuentra en la sangre de mamíferos y en el intestino posterior de los triatomas. Si bien no se multiplica, constituye la forma infectiva circulante para los mamíferos y el vector. epiMAstigote También de aspecto fusiforme y de 20 a 25 μm de longitud. Presenta un kinetoplasto localiza- do por delante y muy cerca del núcleo, con una corta membrana ondulante y un flagelo libre (figura 30-4). Es la forma no infectiva, replicati- va por división binaria longitudinal dentro del intestino del triatoma y predominante en los medios de cultivo. Figura 30-1. Trypomastigote. Giemsa, 1000X. 30 160 Atlas de Parasitología T r y p a n o so m a c r u z i Figura 30-2. Trypomastigote. Giemsa, 1000X. Figura 30-3. Trypomastigote. Giemsa, 1000X. 161 Atlas de Parasitología 30 T r y p a n o so m a c r u z i Figura 30-4. Epimastigote. Giemsa, 1000X. 163 lecturAs recoMeNdAdAs Alarcón de Noya B, Torres J, Suárez JA, Nara- njo L, Noya O, Ruiz R. 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In: Technical Report Series No. 793 Control of the leishmaniases. Geneva; 1990: p. 47-50. 165 A alcohol polivinílico, 4 almidones, 9f, 10 Ancylostoma duodenale, 87 boca de, 89f Ancylostomatidae, 87 Apicomplexa, 3 aprestamiento, 4 artrópodos, 3 Ascaris lumbricoides, 71 adulto, 71, 71f-73f huevo de, 73f-79f, 80, 80f azul de metileno de Loeffler, 5 B bacterias, 3 Balantidium coli, 41 quiste de, 41, 41f, 42f trofozoíto del, 42f, 43f, 44 Blastocystis hominis, 37, 37f, 38f formas del, 37-39 blastoconidias, 5 blastosporos, 5 C Campylobacter, 5 Candida spp., 7 Cestoda, 3 Chilomastix mesnili, 49 quiste de, 49, 49f, 50f trofozoíto de, 50f, 51, 51f Ciliophora, 3 cisticercos, 114f, 115f, 116 Clostridium difficile, 5 colitis ulcerativa, 5 íNdice ANAlítico coloración Romanosky, de 130 Quick-Hot-Gram-Cromotropo, de, 67 Zielh Neelsen, de, 54 coloraciones especiales, 4 coprológico directo, 3 cristales de Charcot-Leyden, 5, 7, 8f Cryptosporidium, 53 ooquiste de, 53, 53f, 54f Cyclospora cayetanensis, 55 ooquiste de, 55, 55f-57f D Digenea, 3 E Encephalitozoon cuniculi, 65 hellem, 65 intestinalis, 65 Endolimax nana, 27 quiste de, 27, 27f, 28f trofozoíto de, 29f, 30f, 31 enfermedad Chagas, de, 133 Crohn, de, 5 Entamoeba coli, 19, quiste de, 19, 19f-21f trofozoíto de, 21 hartmanni, 23 quiste de, 23, 23f, 24f trofozoíto de, 24f, 25, 25f histolytica, 5, 11, quiste de, 11, 11f-14f trofozoíto de, 12, 14f-17f 166 Enterocytozoon bieneusi, 65 Enterobius vermicularis, 105 adulto, 105, 105f-107f huevo de, 108f, 109f, 110, 110f eritrocitos, 5, 6f Escherichia coli, 5 extendido de sangre periférica, 129, 133 F Fasciola spp., 3 hepatica, 123 adulto, 123, 124f, 125f huevo de, 123, 123f, 124f fibras musculares, 9f, 10 filarias, 3 formalina, 4 G Giardia intestinalis, 45 quiste de, 45, 45f, 46f trofozoíto de, 47f, 48, 48f gota gruesa, 129, 133 grasas, 7, 8f gusanos, 3 H helmintos, 3 hematoxilina férrica, 17, 17f Hymenolepis, 117 diminuta, 119 huevo de, 118f, 119, 119f nana, 117 huevo de, 117, 117f, 118f hongos, 3 hospedero, 3 I Iodamoeba butschlii, 33 quiste de, 33, 33f, 34f trofozoíto de, 34f, 35, 35f Isospora belli, 59 quiste de, 59, 59f-63f L Leishmania, 132, 155 amastigote de, 155, 155f-157f promastigote de, 155, 157f, 158f leishmaniosis, 132 cutánea, 132 mucosa, 132 visceral, 133 leucocitos, 5, 6f levaduras, 5, 7f lugol, 4, 5, 12, 16 M malaria, 129 diagnóstico de, 129 materia fecal, almidones en, 9f, 10 cristales de Charcot-Leyden en, 5, 7, 8f eritrocitos en, 5, 6f fibras musculares en, 9f, 10 fibras vegetales en, 10 grasas en, 7, 8f leucocitos en, 5, 7f levaduras en, 5, 6f muestra de, 4 lectura de la, 5 procesamiento de la, 4 mertiolate-yodo-formol, 4 metazoos, 3 microhematocrito, 134 Microspora, 3 Microsporidios, 65 esporas de, 65, 65f, 66f MIF, v. mertiolate-yodo-formol N Necator americanus, 87 Nematoda, 3 nemátodo, 71, 81 NNN, v. Novy-Nicolle-McNeal Novy-Nicolle-McNeal, 132 O oxiuros, 105 167 P Paragonimus spp., 3, 121 huevo de, 121, 121f parásitos, 3 tisulares, 129 Phatyhelminthes, 3 Plasmodium, 129 falciparum, 129, 135 anillos de, 135, 135, 136f-138f esquizonte de, 136f, 138 gametocito de, 136f, 137f, 138, 138f malariae, 129 vivax, 129, 139 anillos de, 139, 139f, 140f esquizonte de, 139, 145f-147f gametocito de, 139, 147f-150f trofozoíto, 139, 140f-144f preservantes, 4 protozoos, 3, 129 PVA, v. alcohol polivinílico R riketsias, 3 S Saccharomyces spp., 7 Salmonella, 5 Sarcomastigophora, 3 Schistosoma, 3, 127 haematobium, 127 japonicum, 127 mansoni, 127 huevo de, 127, 127f, 128f seudohifas, 5 Shaudin, fijador de, 4 Shigella, 5 sida, 7 strongiloidiosis, 95 Strongyloides stercoralis, 95 hembra de vida libre de, 96, 100f hembra parásita de, 96, 99f huevo de, 96, 102f-104f larva filariforme de, 96, 97f, 98f larva rhabditiforme de, 95, 95f, 97f macho de vida libre de, 96, 101f Strout método de, 133 T Taenia, 111 huevos de, 113f, 114f, 115 saginata, 111 proglótide de, 111, 112f solium, 111 escolex de, 113f, 115 proglótide de, 111, 112f Toxoplasma gondii, 130, 151 pseudoquiste, 151, 152f, 153f trofozoíto de, 151, 151f, 152f toxoplasmosis, 130 Trichuris trichiura, 81 adulto, 81, 81f, 82f, 83f huevo de, 83f, 84f, 85, 85f Tripanosoma cruzi, 133, 159 trypomastigote de, 159, 159f, 160f epimastigote de, 159, 161f tripanosomiasis, 133 U Uncinarias, 87 adulto, 87, 87f, 88f huevo, 90f, 91f, 93 larva de, 92f, 93f V vegetales, 10 virus, 3 Vibrio parahaemolyticus, 5 Y Yersinia enterocilitica, 5 169 orgANizAcióN pANAMericANA de lA sAlud distriBuidores eN coloMBiA OPS Argentina (54-11) 431 31578 OPS Bolivia (591-2) 241 2303/ (591-2) 339 2177 OPS Colombia (54) 314 41 41 OPS Costa Rica (506) 258 5810/257 5930 OPS Chile (56-2) 264 9300 OPS Ecuador (593-2) 2460 330/2460 332 OPS El Salvador (503) 298 3491 OPS Guatemala (011-502) 332 2032 OPS Honduras (504) 221 6091 OPS Nicaragua (505) 289 4200 OPS México (5255) 509 908 60 OPS Panamá (507) 262 00 30 OPS Paraguay (595-21) 450 495 OPS Perú (51-1) 421 30 30 OPS República Dominicana (1-809) 562 15 19 OPS Uruguay (598-2) 707 35 90 OPS Venezuela (58-211) 206 50 54 En los puntos de venta en las Facultades de Medicina a través del programa PALTEX de la Organización Panamericana de la Salud, OPS. Visite: www.paho.org/spanish/PAHEF/PALTEX/paltex-home.htm Barranquilla • Librería Nacional Ltda. (5) 368 89 88 Bogotá • Editorial Educativa (1) 338 31 10 • Librería Médica Celsus (1) 214 40 20 • Librería Nacional Ltda. (1) 213 98 42 • Hipertextos Librería de La U. (1) 481 0505 http://www.libreriadelau.com Bucaramanga • Librería Médica Universitas (7) 645 1216 Cali • Librería Nacional Ltda. (2) 884 1765 Cartagena • Librería Médica ABC Ltda. (5) 664 61 51 • Librería Nacional Ltda. (5) 664 14 48 • Iván Pérez Martínez Cra. 17 No. 69-28 Daniel Lemaitre. 666 46 55 / 312 684 59 15 Huila • Luis Bernardo Patiño 312 415 04 92 Ibagué • Mario William Barreto 312 378 64 93 Manizales • Hoyos Editores E.U. (6) 880 20 02 Medellín • Editorial Educativa (4) 235 96 07 • Librería Académica (4) 511 50 17 • Librería Nacional Ltda. 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Daniel Garza C.P: 11830 - Tel.: (0155) 5276 28 08 Fax: (0155) 5276 30 02 hector.ruiz@dinsamex.com PANAMá Distribuna Editorial y Librería Médica S.A Tel.: (507) 832 63 37 / 832 63 38 panama@libreriamedica.com gerencia@libreriamedica.com www.libreriamedica.com PERú Fundación del Libro Universitario - LIBUN Av. Petit Thouars 4799 - Miraflores Lima - Perú Tel.: (51-1) 446 50 48 www.libun.edu.pe / servcliente@libun.edu.pe Librería Científica del Perú http://www.Icdelperu.com / Icdelperu@yahoo.com Av. Aviación 3152 Of. 203 San Borja - Lima 41 Perú. Tels: 224-8691 9847-5191 - Telefax: 226-1164 REPúBLICA DOMINICANA International Books Av. 27 de Febrero Esquina Abraham Lincoln Tel.: (809) 381 10 43 interbooks@codetel.net.co / www.inter-books.com VENEZUELA Disinlimed C.A. Av. Los Ilustres - Edif. Doña Rosa (frente a la Facultad de Ciencias de la UCV) R.B. Loc. 1 y 2 Apdo. Postal 47237 Los Chaguaramos - Caracas 1041 D.F. Venezuela Tels: (58212) 693 23 57 - 661 72 49 (Master 693 10 03) Fax. 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Generalidades y Neonatología Tomo II. Infectología y Neumología Tomo III. Card. Gast. Endoc. y Derm. Tomo IV. Hemat. Oncolog, Nefrol. Oftal. y Genética Tomo V. Neur. Alergol. Inmun. Reumatol, Otor. Ortop. y Urgencias. III. Fundamentos de Salud Pública Tomo I. Salud Pública Tomo II. Admón. de Servicios de Salud Tomo III. Epidem. Básica y Ppios. de Invest. IV. Fundamentos de Cirugía Coloproctología Ortopedia y Traumatología Urología V. Fundamentos de Odontología Manual Básico de Endodoncia Odontología Pediátrica Ortodoncia: Teoría y Clínica VI. Fundamentos Básicos de Medicina Biología Molecular: principios y aplicaciones Patología Microbiología de las Infecciones Humanas VII. Fundamentos de Enfermería Infecciones Asociadas al Cuidado en la Práctica Clínica: Prevención y Control VIII. Fundamentos Medicina Veterinaria Terapéutica Veterinaria XI. 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