LB (Quantificação de Bactérias)

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PRÉ-TESTE 
 
1) A microbiologia de alimentos é o estudo dos microrganismos que 
habitam, crescem e contaminam os alimentos, sendo os de maior 
importância aqueles que causam a deterioração dos alimentos. Contudo, 
microrganismos benéficos, tais como os probióticos, estão se tornando 
importantes na ciência dos alimentos. 
A quantificação bacteriana é importante na microbiologia de alimentos 
para detectar possíveis contaminações com: 
 
a) coliformes fecais, coliformes totais; 
RESPOSTA CORRETA 
Os coliformes fecais e totais são bactérias patogênicas que infectam os 
alimentos e causam doenças se esses alimentos forem ingeridos. 
 
b) probióticos; 
 
c) leveduras. 
 
2) Na natureza, os microrganismos encontram-se formando populações 
mistas (vários tipos de microrganismos que pertencem a um 
mesmo habitat). Por sua vez, o desenvolvimento da microbiologia, assim 
como todos os procedimentos laboratoriais para o diagnóstico, depende 
da obtenção de biomassa microbiana na forma de populações puras, que, 
quando desenvolvidas/crescidas em meios de cultura, são 
denominadas culturas puras ou axênicas (populações homogêneas quanto 
ao tipo de microrganismo, cultivadas em meios de cultura sem a presença 
de outras formas de vida contaminantes). A obtenção de uma cultura 
pura a partir de uma cultura mista denomina-se isolamento, que é 
conseguido por meio da semeadura dos microrganismos na superfície de 
meios de cultura sólidos em placas de Petri, o que permitirá a formação de 
colônias (que são populações isoladas que crescem na superfície desses 
meios). 
São exemplos de semeaduras para quantificação de bactérias em meios 
sólidos: 
 
a) sementeira por espalhamento (spread plate), sementeira por 
incorporação (pour plate); 
RESPOSTA CORRETA 
Estas são as duas técnicas de semeadura mais relevantes para a 
quantificação de bactérias. 
 
b) sementeira por espalhamento (spread plat) e difusão; 
 
c) sementeira por incorporação (pour plate) e difusão. 
 
3) Como todos os seres vivos, os microrganismos necessitam de nutrientes 
apropriados ao seu desenvolvimento, assim como de condições físicas ou 
ambientais favoráveis. Quando eles são cultivados em laboratório, essas 
necessidades devem ser respeitadas. 
Indique a alternativa que aponta para semeadura por incorporação. 
 
a) O volume de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada é pipetado em cima de 
meio de cultura e, após, espalhado com uma vareta de vidro por toda a 
superfície do ágar; 
 
b) É a mistura de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada com o meio de 
cultura em estado líquido. A amostra é diluída antes de ser semeada, para 
obter placas com número de colônias não superior a 300. Após o período de 
incubação, as placas devem apresentar de 25 a 250-300 colônias, de modo 
que possam ser contadas; 
RESPOSTA CORRETA 
Esta é a semeadura por incorporação. 
 
c) Uma alçada da colônia (ágar em placa) ou da cultura (de outro meio ou 
líquido) é introduzida no meio líquido, com agitação da alça, para maior 
difusão dos microrganismos (da alça para o meio e homogeneização no 
meio). Pode-se inclinar o tubo a 30° e esfregar o inóculo na parede deste; 
quando o tubo retornar à posição original, o inóculo se difundirá no meio. 
 
4) A obtenção de uma cultura pura a partir de uma cultura mista 
denomina-se isolamento, conseguido por meio da semeadura dos 
microrganismos na superfície de meios de cultura sólidos em placas de 
Petri, o que permitirá a formação de colônias (populações isoladas que 
crescem na superfície desses meios). 
Indique a alternativa que aponta para semeadura por espalhamento. 
 
a) O volume de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada é pipetado em cima de 
meio de cultura e, após, espalhado com uma vareta de vidro por toda a 
superfície do ágar; 
RESPOSTA CORRETA 
Esta é a semeadura por espalhamento. 
 
b) É a mistura de 1mL ou 0,1mL da amostra analisada com o meio de 
cultura em estado líquido. A amostra é diluída antes de ser semeada, para 
obter placas com número de colônias não superior a 300. Após o período de 
incubação, as placas devem apresentar de 25 a 250-300 colônias, de modo 
que possam ser contadas; 
 
c) Transferir uma alçada da cultura para meio sólido em placa e estriar 
com a alça bacteriológica sobre o meio. A estria pode ser realizada em 
movimento de zigue-zague (estria sinuosa) ou como uma linha reta sobre 
o meio (estria reta). 
 
 
5) No momento do experimento, inicialmente acenda a chama do bico de 
Bunsen para criar a zona de segurança para poder trabalhar na sua 
experiência. Essa zona de segurança que é feita quando se acende a 
chama do bico de Bunsen é necessária para: 
 
a) esterilizar a área de outros microrganismos que possam existir ao redor 
e não prejudicar o experimento; 
RESPOSTA CORRETA 
Em um laboratório em que vários outros experimentos podem ocorrer, é 
necessário nos preocuparmos com a esterilização. 
 
b) inserir a chama na alça para retirarmos as impurezas, podendo ser 
desligada depois; 
 
c) A zona de segurança não é necessária para o laboratório virtual. 
 
PÓS-TESTE 
 
1) As soluções formadas por líquidos com sólidos dissolvidos são as mais 
comuns no cotidiano das pessoas. Água com sal ou água com açúcar são 
exemplos clássicos desse tipo de solução. Mas existem soluções, como os 
sucos concentrados adquiridos em supermercados, que necessitam 
receber certa quantidade de solvente no seu preparo. Trata-se das 
chamadas soluções concentradas. Elas apresentam grande quantidade de 
soluto em pouco solvente e, ao receberem quantidade extra de água 
(solventes), têm seu volume final aumentado. 
Ao adicionarmos solvente a determinada solução, estamos realizando 
uma diluição. Nesse procedimento, a quantidade de solvente é 
aumentada, e a quantidade de soluto permanece a mesma, o que leva a 
diminuição da concentração da solução. 
Tendo em vista o conceito de diluição, qual o objetivo da técnica de 
diluição para o diagnóstico laboratorial? 
 
a) A maioria dos laboratórios tem as soluções armazenadas em 
concentração mais alta, seja por conveniência, seja para evitar a 
contaminação. Por isso, faz as diluições de acordo com a demanda e a 
necessidade para determinado exame; 
RESPOSTA CORRETA 
Os laboratórios realizam a diluição para diagnóstico, tendo em vista que 
suas concentrações são altas para armazenamento. 
 
b) A maioria dos laboratórios tem as soluções armazenadas em 
concentração mais baixa, seja por conveniência, seja para evitar a 
contaminação. Por isso, faz as diluições de acordo com a demanda e a 
necessidade para determinado exame; 
 
c) Não são feitas diluições nos laboratórios, já que as concentrações mais 
altas só são condicionadas por conveniência, o que não acontece mais. 
 
2) Os meios de cultura são insumos preparados em laboratório que 
fornecem os nutrientes para o crescimento e o desenvolvimento de 
microrganismos (como bactérias e fungos) fora do seu habitat. Existe uma 
variedade enorme desses meios, os quais são utilizados para análises 
laboratoriais e estudos científicos em diversas áreas, principalmente em 
alimentos, água, cosméticos e microbiologia clínica. 
Qual das alternativas apresenta a característica de um meio de cultura 
sólido? 
 
a) A presença do ágar bacteriológico, utilizado como agente gelificante 
em meio de cultura ou para determinar motilidade e crescimento de 
anaeróbios e microaerófilos; 
RESPOSTA CORRETA 
O ágar é um componente característico do meio de cultura sólido. 
 
b) São também conhecidos como caldos, e seu acondicionamento é feito 
em tubos de ensaio. São utilizados para ativação das culturas, repiques de 
microrganismos, provas bioquímicas etc.; 
 
c) Contém grande suprimento de nutrientes que promovem o 
crescimento dos microrganismos fastidiosos. É geralmente preparado pela 
adição de nutrientes extras a um meio denominado ágar nutriente. 
 
3) Os meios de cultura em microbiologia para o cultivo de bactérias são 
conhecidos comomeios artificiais ou meios sintéticos, pois não ocorrem 
naturalmente, ou seja, eles são preparados no laboratório. Existem várias 
maneiras de se classificar os meios de cultura. 
Qual das alternativas apresenta um meio de cultura líquido e o seu 
respectivo objetivo? 
 
a) A presença do ágar bacteriológico, utilizado como agente gelificante 
em meio de cultura ou para determinar motilidade e crescimento de 
anaeróbios e microaerófilos; 
 
b) São também conhecidos como caldos, e seu acondicionamento é feito 
em tubos de ensaio. São utilizados para ativação das culturas, repiques de 
microrganismos, provas bioquímicas etc.; 
RESPOSTA CORRETA 
Caldos são um meio de cultura líquido. 
 
c) Contém grande suprimento de nutrientes que promovem o 
crescimento dos microrganismos fastidiosos. É geralmente preparado pela 
adição de nutrientes extras a um meio denominado ágar nutriente. 
 
4) Além dos nutrientes e condições ambientais favoráveis para o cultivo 
de microrganismos, muitos critérios devem ser considerados. Diferentes 
microrganismos apresentam diferentes necessidades, e, por isso, o meio de 
cultura é adaptado para satisfazer essas necessidades, utilizando 
nutrientes específicos dependendo do microrganismo de interesse. 
Quando o meio de cultura é adequado e a bactéria cresce, realizamos uma 
leitura de placas. A unidade de medida é o UFC, que significa: 
 
a) unidade formadora de colônias por mL; 
RESPOSTA CORRETA 
Esta é a medida para a quantificação de bactérias. 
 
b) unidade formadora de patógenos; 
 
c) unidade formadora das bactérias. 
 
5) Segundo a Anvisa, para secreção vaginal, endocervical, uretral e na 
urina, na cultura para Neisseria gonorrhoeae, é suficiente ágar-
chocolate; para melhorar o isolamento, semear material endocervical e 
uretral, utilizando o meio seletivo de Thayer Martin. 
Qual a importância de utilizar o meio seletivo correto dependendo da 
amostra biológica utilizada? 
 
a) Cada meio seletivo é apropriado para um tipo de microrganismo; assim, 
é necessário que, dependendo da amostra biológica, o meio seletivo seja 
adequado para crescimento do microrganismo de que se queira fazer o 
diagnóstico; 
RESPOSTA CORRETA 
Cada microrganismo crescerá em um meio seletivo diferente devido às 
diferentes necessidades nutricionais de cada tipo de microrganismo. 
 
b) A escolha do meio seletivo não prejudicará o diagnóstico, já que 
existem muitos microrganismos no nosso corpo; então, será possível 
observar a colônia que se queira analisar no meio de outras; 
 
c) A amostra biológica deve ser colocada em um meio seletivo único 
adotado pelo laboratório de análise.