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QUESTÕES DE FIXAÇÃO Questão 1 Existe ainda no mundo muita controvérsia em relação a patente de genes. A França, por exemplo, que baniu as patentes de genes, está batalhando contra uma diretiva da Comunidade Europeia, que é a favor. Nos EUA, a patente de alguns genes já vem sendo realizada há alguns anos, mas ainda há controvérsia entre os estados. Em relação à legislação brasileira, existe um consenso sobre esse tema? a) Ainda não, no Brasil os genes relacionados a doenças são passíveis de serem patenteados, apesar de grande resistência por parte de membros do governo. b) Não, os especialistas no assunto continuam o debate entre quais genes poderiam ser liberados para patentes, principalmente por indústria farmacêuticas. c) Sim, no Brasil é permitida qualquer patente genética, desde que seja regulamentada com base na Lei de Patentes Brasileira em vigor. d) Sim, no Brasil é permitida a patente de genes relacionados a doenças humanas. e) Sim, no Brasil os genes humanos não são patenteáveis de acordo com o Art. 18 da Lei de Patentes Brasileira em vigor. Nela, é vedada a concessão de patentes e, portanto, exclusividade a quem quer que seja, para qualquer parte dos seres vivos. Questão 2 A definição de ética é complexa e varia bastante entre os autores, sendo discutida desde a época de Sócrates e Aristóteles. O filósofo, escritor e professor Mário Sergio Cortella afirma que: “A ética é a concepção dos princípios que eu escolho e a moral é a sua prática”. De acordo com a definição de Cortella, em outras palavras, essa frase quer dizer que: a) A ética e a moral são sinônimos. b) A ética é a parte da filosofia que se ocupa dos deveres dos indivíduos em uma sociedade. c) A ética é constituída pelos valores e comportamentos previamente aceitos em um contexto. d) A moral é convenção e a ética, reflexão. e) Quando se trata de moral, o que é certo ou errado, independe do lugar que se está. Questão 3 As patentes genéticas foram fundamentais no desenvolvimento da biotecnologia nos anos 80 e 90 do século passado. Existem hoje empresas de biotecnologia que exploram plantas, animais e até seres humanos em busca de genes que possam ser manipulados com valor comercial. Qual foi a primeira patente genética e em que ano ela foi realizada? a) A patente do gene humano codificador da insulina, realizada em 1981. b) A patente do gene humano codificador do hormônio do crescimento, realizada em 1981. c) A patente do gene humano codificador do hormônio do crescimento, realizada em 1978. d) A patente do gene humano codificador da melatonina, realizada em 1978. e) A patente do gene humano codificador da insulina, realizada em 1985. Questão 4 “Por Julie Steenhuysen CHICAGO (Reuters) - Pesquisadores norte-americanos utilizaram uma controversa técnica de clonagem para fazer novas, mais saudáveis e perfeitamente combináveis células-tronco a partir da pele de pacientes com doenças mitocondriais, em um primeiro passo em direção ao tratamento para estas condições incuráveis e que podem até matar. Um estudo sobre a técnica, publicado na revista científica Nature, mostrou o mais recente avanço no uso de transferência nuclear de células somáticas, a fim de fazer células-tronco específicas para pacientes que poderiam ser utilizadas para tratar doenças genéticas. “Este trabalho permite a geração de um ilimitado - e livre de mutação - fornecimento de células substitutas para pacientes com doenças mitocondriais”, disse Robert Lanza, chefe-científico da Advanced Cell Technology, que não esteve envolvido na pesquisa. Transferência nuclear é tipicamente o primeiro passo na clonagem reprodutiva - utilizando células adultas para fazer uma cópia genética de um indivíduo. Desde que a técnica foi primeiramente utilizada, em 1996, para criar a ovelha clonada Dolly, a Organização das Nações Unidas (ONU) pediu aos países que a proibissem por motivos éticos e morais. Em 2013, Shoukhrat Mitalipov, da Universidade de Saúde e Ciência do Oregon, foi o primeiro a ter sucesso na utilização do método para fazer células-tronco embrionárias humanas a partir de células cutâneas de pacientes. Essas células são valiosas por serem “pluripotentes”, o que significa que têm a capacidade de se transformar em qualquer tipo de célula no corpo. No mais recente estudo, Mitalipov e colegas utilizaram o método para fazer células substitutas para pacientes com mutações em genes mitocondriais, que são cruciais para produzir energia nas células.” Com base no quadrinho, na reportagem e nos seus conhecimentos sobre clonagem, qual das assertivas abaixo está correta? a) Os clones só podem ser produzidos de forma artificial dentro de um laboratório. b) A clonagem passou a existir na década de 70 quando pesquisadores inseriram um fragmento de DNA em um vetor de bactéria. c) A clonagem só passou a existir com a descoberta das enzimas de restrição. d) A clonagem é um processo que pode ser natural e que ocorre em alguns organismos decorrente de sua reprodução assexuada. e) A clonagem é um processo artificial advindo da descoberta das bactérias e vírus. Questão 5 A amplificação de ácidos nucléicos é uma ferramenta molecular importante não só na ciência básica, mas também no desenvolvimento de estratégias clínicas que envolvem o diagnóstico de doenças infecciosas, clonagem de genes e controle de qualidade industrial. O PCR (polymerase chain reaction) é uma ferramenta chave nesses processos de amplificação. Qual das seguintes afirmativas melhor representa a etapa de anelamento na metodologia de PCR? a) A enzima DNA polimerase gera um primer que anela ao DNA complementar. b) Os primers se anelam ao DNA molde pelo aumento de temperatura. c) O DNA molde é aquecido pra quebrar as pontes de hidrogênio entre as bases complementares. d) Os primers formam pares de bases complementares com os nucleotídeos do DNA molde e anelam. e) A Taq polimerase se liga a cada primer de PCR e inicia a adição dos nucleotídeos. Questão 6 O corpo de um homem de 32 anos foi encontrado em uma casa abandonada nos arredores de Aracaju com suspeita de estrangulamento. A polícia científica, ao vasculhar a casa e examinar a vítima em busca de impressões digitais e/ou algum material biológico do suspeito, encontra sob as unhas da vítima um pouco de grumos de pele, provavelmente do suspeito e também alguns fios de cabelo na roupa da vítima. Esse material foi coletado e levado para análise forense. Por meio da técnica de DNA fingerprint e também do PCR, os peritos identificaram os seguintes padrões genéticos: Adaptado de: <https://infograph.venngage.com/p/89437/dna-fingerprinting-used- in-forensic-science>. Qual dos suspeitos é o verdadeiro criminoso? a) Suspeito 1. V í m a A m o st ra d o c ri m e Su sp e it o s b) Suspeito 2. c) Suspeito 3. d) A amostra está com uma resolução ruim. e) A amostra parece ser da vítima. Questão 7 Algumas características intrínsecas das células-tronco as tornam bastante especiais e as diferenciam das demais células do organismo. Cientistas ao redor do mundo tentam elucidar os mecanismos pelos quais essas células agem no nosso corpo. Analise as afirmações abaixo. I) Uma célula-tronco pode, em teoria, originar milhões de células- tronco. II) Uma célula-tronco pluripotente pode se diferenciar em uma célula muscular cardíaca ou uma célula epitelial. III) A célula-tronco embrionária é chamada de célula multipotente, ou seja, pode originar múltiplos tipos de células diferentes. IV) Nos dias atuais ainda não é possível retirar células-tronco embrionárias sem a destruição do embrião. Dentre as afirmações abaixo, quais são verdadeiras? Assinale a alternativa correta. a) I, II e IV. b) I, III, IV. c) II, III, IV. d) I e III. e) II e IV. Questão 8 A insulina é um hormônioproduzido pelo pâncreas, permitindo a entrada de glicose nas células. Pessoas diabéticas podem necessitar de injeções de insulina por diferentes fatores, como a não produção de insulina suficiente e não conseguirem usá-la adequadamente. No passado, a única forma de obter insulina era extraí-la de pâncreas de animais, como porco e boi. Atualmente, a insulina é fabricada por bactérias. A tecnologia que permitiu esse avanço é: a) A terapia gênica. b) A reação da polimerase em cadeia. c) O DNA recombinante. d) O emprego de células-tronco. e) A codificação do genoma. Questão 9 Existem mais de 200 tipos de células no corpo humano colaborando entre si para formar os tecidos. As células têm uma vida dinâmica no organismo, surgindo pela divisão de uma célula precursora, desenvolvendo-se e morrendo. Mesmo após concluído o período de crescimento, quando o número de células necessariamente aumenta, o organismo deve continuar a produzir novas células. Para a maioria das células do organismo, a renovação ocorre a partir de células tronco que existem nos diferentes tecidos. Quais são as características que diferenciam uma célula-tronco das demais células do organismo? a) Elas são células de pluripotência, podendo gerar todas as células especializadas do nosso organismo. b) Todas as células-tronco, tanto embrionárias quanto as de adulto, têm a característica de totipotência, ou seja, podem se proliferar e se diferenciar em quaisquer células do nosso organismo. c) Elas são capazes de se proliferar originando duas células filhas exatamente iguais entre si e iguais à célula original e elas são capazes de se diferenciar, gerando células especializadas. d) As células-tronco podem se reproduzir artificialmente nos laboratórios, gerando células filhas exatamente iguais entre si, mas mais especializadas do que a célula original. e) São células de multipotência, ou seja, podem Questão 10 Há pouco mais de uma década, os cientistas descobriram uma maneira de produzir um novo tipo de célula-tronco no laboratório. Eles descobriram que podiam transformar células epiteliais de camundongos em células que se comportavam como células-tronco embrionárias. Assinale a alternativa que contém o nome, o método de obtenção e a importância desse tipo de célula. a) Células de pluripotência induzida. Essas células foram obtidas por clonagem reprodutiva e são importantes para tratamento de doenças que necessitam de células transplantadas, visto que são obtidas do próprio indivíduo, evitando quadros de rejeição. b) Células-tronco teciduais. Essas células foram criadas por um processo chamado de reprogramação genética e são importantes, pois podem gerar quaisquer tipos de células especializadas. c) Células-tronco embrionárias artificiais. Essas células foram obtidas por clonagem reprodutiva e são importantes, pois podem gerar quaisquer tipos de células especializadas. d) Células-tronco teciduais. Essas células foram obtidas por clonagem terapêutica e são importantes para o estudo de doenças neuro-degenerativas. e) Células de pluripotência induzida. Essas células foram criadas por um processo chamado de reprogramação genética e são importantes para tratamento de doenças que necessitam de células transplantadas, visto que são obtidas do próprio indivíduo, evitando quadros de rejeição. Questão 11 Existem na área biológica e médica diversos dilemas éticos, que apesar de muitas discussões, continuam assombrando os profissionais. Independente da sociedade, costumes ou religião, determinados assuntos necessitam de reflexões sobre a sua necessidade e utilidade. Dentre os exemplos abaixo, em quais se aplicam a necessidade de julgamentos éticos? a) Clonagem humana, reprodução assistida, plantio em larga escala. b) Uso de transgênicos, uso de medicamentos genéricos, manipulação da informação genética individual. c) Aborto, campanhas de vacinação, plantio em larga escala. d) Aborto, terapia com células-tronco embrionárias, manipulação da informação genética individual. e) Clonagem humana, uso de medicamentos genéricos, terapia com células-tronco embrionárias. Questão 12 Biotecnologia significa qualquer aplicação ______________ que utilize sistemas _____________, organismos vivos ou seus derivados, para fabricar ou modificar _________ ou processos para utilização específica. De acordo com a afirmação, qual das alternativas contém as palavras que completam o texto? a) biológica, tecnológicos, pessoas; b) tecnológica, biológicos, produtos; c) tecnológica, informatizados, pessoas; d) biológica, analíticos, produtos; e) tecnológica, informatizados, produtos. Questão 13 A discussão a respeito do uso de células-tronco é bastante fervorosa. A legislação a respeito do uso de células tronco embrionárias na pesquisa varia bastante entre os países, sendo que não existe hoje um consenso mundial a respeito da sua padronização. De acordo com a legislação brasileira, as células-tronco embrionárias podem ser utilizadas na pesquisa se forem respeitadas as seguintes condições: a) Embriões fruto de inseminação artificial que seriam descartados ou que estão congelados há mais de 5 anos. b) Embriões fruto de fertilização in vitro que são inviáveis ou que estão congelados há mais de 5 anos. c) Embriões inviáveis ou que seriam descartados e que estão congelados há mais de 3 anos. d) Embriões fruto de fertilização in vitro que não foram utilizados no procedimento, que são inviáveis ou que estão congelados há mais de 3 anos. e) Embriões fruto de inseminação artificial ou embriões inviáveis congelados há mais de 5 anos. Questão 14 A insulina humana foi a primeira droga oficialmente produzida utilizando a tecnologia do DNA recombinante, em 1978. Em 1979, foi a vez do hormônio de crescimento (GH). Atualmente existem mais de 300 biofármacos disponíveis no mercado, incluindo proteínas terapêuticas e anticorpos, e as vendas já superam os 100 bilhões de dólares. Dados de 2003 a 2014 mostram que a maior parte dos biofármacos aprovados por agências reguladoras americanas e europeias eram derivados de células de mamíferos (56%), E. coli (24%), S. Cerevisae (13%); animais transgênicos, plantas (3%) e células de inseto (4%). A insulina é prioritariamente produzida em E. coli e em S. cerevisae para o tratamento de indivíduos diabéticos. Para que a produção de insulina fosse possível algumas etapas relacionadas a clonagem foram necessárias. As sentenças abaixo enumeram algumas dessas etapas, entretanto nem todas são verdadeiras: 1. Identificar o gene de interesse e extraí-lo de uma célula eucariótica. 2. Isolar o plasmídeo da célula bacteriana. 3. Isolar o plasmídeo da célula eucariótica. 4. Clivar o gene e o plasmídeo com a mesma enzima de restrição. 5. Clivar o gene e o plasmídeo com enzimas de restrição diferentes. 6. Unir o plasmídeo e o gene usando enzimas de restrição. 7. Unir o plasmídeo e o gene usando DNA ligase. 8. Inserir o DNA recombinante na bactéria pelo processo de transformação. 9. Inserir o DNA recombinante na bactéria pelo processo de transdução. 10. Isola-se o gene da insulina produzida pela bactéria para tratar o paciente. 11. Purifica-se a proteína produzida pela bactéria e ela será usada para tratar o paciente. Assinale a alternativa que apresenta, na ordem correta, as etapas verdadeiras e necessárias para a produção da insulina humana: a) 1, 3, 5, 6, 9, 10 b) 1, 2, 5, 7, 9, 11 c) 1, 3, 4, 6, 8, 10 d) 1, 2, 4, 7, 8, 10 e) 1, 2, 4, 7, 8, 11 Questão 15 O processo de “transformação” consiste na alteração do genoma de uma bactéria pela introdução de pedaços de DNA exógeno. Entretanto, para que esse processo seja possível, é necessário que a bactéria que irá receber esse DNA externo esteja apta para tal, ou seja, esteja “competente”.Em laboratório, isso ocorre por diferentes métodos, tais como por choque de temperatura ou por meio de corrente elétrica. A ideia é gerar pequenos poros na membrana que permitam a entrada desse DNA externo na bactéria. Nas imagens abaixo, qual(is) colônias representadas na placa indica(m) que a transformação foi eficaz? Adaptado de <www.quia.com/jg/2516629list.html> e <http://highered.mheducation.com>. ampicilina Gene do lac Z reanela Gene do lac Z separado Fragmento de DNA mRNA mRNA Beta-galactosidase Sem Beta-galactosidase Enzima de restrição a) B e C b) A e D c) A, E, D d) A, B, C e) E Questão 16 Nós temos diferentes tipos de células-tronco no nosso organismo. Elas desempenham um trabalho árduo todos os dias na manutenção das células que estão sendo usadas, danificadas ou que morrem. Existem células-tronco do sangue gerando células sanguíneas, células-tronco musculares gerando células musculares, células-tronco _________ gerando todos os tipos de células no cérebro e outros tipos de células-tronco no organismo como um todo. As células-tronco que temos em nosso organismo são chamadas de células-tronco __________ ou células-tronco teciduais. As células-tronco embrionárias são bastante interessantes, pois podem gerar todos os tipos de células do seu organismo. Elas são encontradas apenas no início do estágio embrionário chamado____________, que contém de 50-100 células. Recentemente, cientistas descobriram uma maneira de gerar células-tronco a partir da pele ou de células nervosas. Essas células-tronco criadas artificialmente são chamadas de_________________. Elas são iguais as células-tronco __________ e podem gerar todos os diferentes tipos de células do organismo. Assinale a alternativa que preenche os espaços adequadamente. a) Neurais ou nervosas, mesenquimais, trofoblasto, células de pluripotência induzida, embrionárias. b) Mesenquimais, de adulto, blastocisto, células-tronco embrionárias artificiais, de adulto. c) Neurais ou nervosas, de adulto, trofoblasto, células-tronco embrionárias artificiais, embrionárias. d) Neurais ou nervosas, de adulto, blastocisto, células de pluripotência induzida, embrionárias. e) de adulto, Neurais ou nervosas, células de pluripotência induzida, blastocisto, embrionárias. Questão 17 A obtenção de células-tronco é um procedimento difícil de ser realizado, tanto do ponto de vista técnico quanto do ponto vista ético. As células-tronco de adulto são raras no organismo e não apresentam características que permitam sua fácil identificação. As células-tronco embrionárias necessitam da destruição do embrião, processo controverso em vários aspectos éticos e religiosos. Recentemente os pesquisadores conseguiram produzir em laboratório as células de pluripotência induzidas, ou seja, a partir de uma célula somática obtém-se uma célula-tronco pluripotente. Esse procedimento é essencial para o futuro das pesquisas na área. Analise as informações a seguir: I) As células pluripotentes são assim chamadas por possuir a capacidade de se transformar em qualquer tipo de célula adulta. II) As células-tronco adultas são chamadas de multipotentes por serem mais versáteis que as embrionárias e encontram-se principalmente na medula óssea. III) As células-tronco multiplicam-se através do processo de divisão celular chamado mitose. IV) As células-tronco de adultos são originárias apenas de organismos adultos. Assinale a alternativa que contém as informações verdadeiras. a) I e II. b) I e III. c) II e IV. d) I e IV . e) Apenas I. Questão 18 O primeiro relato de pesquisa em células-tronco, também conhecidas como células- mãe, utilizando células embrionárias humanas foi publicado em 1998. A partir daí, as células-mães são portadoras de várias promessas terapêuticas. I - Pode se recorrer a células-tronco em caso de lesões de paralisia na medula óssea ou do Mal de Parkinson. II – A pele pode ser uma fonte de células autólogas, células que permitem tratar o doente com suas próprias células, sem recorrer a células embrionárias. III – As terapias celulares de implante são muito promissoras para o sistema nervoso através do uso de células embrionárias. Quais das afirmações são verdadeiras com relação às células-tronco? Assinale a alternativa correta. a) I e II. b) I e III. c) II e III. d) I, II e III. e) Apenas a III. Questão 19 O desenvolvimento de plantas transgênicas também tomou grandes proporções com os estudos envolvendo a biotecnologia e a tecnologia do DNA recombinante. A Agrobacterium tumefaciens é uma bactéria que infecta plantas (tabaco). Ela apresenta um DNA extracromossomal que é capaz de migrar da bactéria para a célula da planta durante um processo de infecção. A engenharia genética pode manipular esse DNA extracromossomal para que os genes sejam transferidos para a planta e integrem seu genoma. A seguir, descrevemos as etapas necessárias (fora de ordem cronológica) para se produzir uma planta transgênica, como a planta do tabaco com um gene de resistência a um pesticida usando o método de transformação pela Agrobacterium: 1. Plantar no solo após algumas semanas. 2. Cortar a folha e esterelizá-la. 3. Coletar as sementes. 4. Induzir a formação de raízes por meio de hormônios. 5. Preparar um experimento em cultura celular. 6. Incubar com a Agrobacterium contendo o plasmídeo. 7. Matar a Agrobacterium. 8. Analisar a presença do gene de interesse. Ordene corretamente as etapas para que esse processo seja possível: a) 2, 6, 5, 7, 4, 1, 3, 8 b) 2, 3, 1, 6, 4, 5, 7, 8 c) 3, 2, 1, 6, 5, 4, 8, 7 d) 8, 6, 5, 4, 1, 2, 3, 7 e) 5, 1, 2, 7, 3, 4, 8, 6 Questão 20 O PCR em tempo real é uma técnica que permite a quantificação e amplificação simultâneas de um fragmento alvo de DNA. Apesar de essa técnica permitir uma quantificação absoluta da quantidade inicial de cópias do fragmento, o processo de quantificação deve ser sempre relativo a uma amostra controle ou a outra sequência que sirva de parâmetro para que se tenha uma ideia de aumento ou redução do produto esperado. A especificidade de sondas fluorescentes utilizadas no PCR em tempo real é importante, uma vez que evita, entre possíveis resultados indesejados da reação: a) a interferência pela detecção da reação de polimerase em tempo real. b) a interferência por formação de dímeros de primers. c) a reação de polimerase tradicional. d) interferência pela detecção de DNA. e) interferência pela detecção de RNA. RESPOSTA COMENTADA Questão 1 Resposta correta: E Resolução comentada: No Brasil existe consenso sobre esse tema: os genes humanos não são patenteáveis de acordo com o Art. 18 da Lei de Patentes Brasileira em vigor desde maio de 1996. Nela, é vedada a concessão de patentes e, portanto, exclusividade a quem quer que seja, para qualquer parte dos seres vivos. Questão 2 Resposta correta: D Resolução comentada: Cortella afirma que a ética é a concepção dos princípios que alguém ou uma sociedade escolhe como corretos e a moral é a prática desses princípios, ou seja, a moral é uma convenção da sociedade, enquanto a ética é uma reflexão da sociedade sobre esses princípios. Questão 3 Resposta correta: C Resolução comentada: Atualmente as empresas de biotecnologia têm interesse em diversos tipos de patentes genéticas. No caso de genes humanos, basicamente, os cientistas patenteiam genes relevantes para o tratamento de doenças. A primeira patente obtida em 1978 foi do gene humano codificador do hormônio do crescimento. Questão 4 Resposta correta: D Resolução comentada: Dá-se o nome de clonagem ao processo natural de produção de cópias idênticas de uma célula doadora ou de um indivíduo. Os clones existem naturalmentequando uma célula ou organismo se reproduz assexuadamente como, por exemplo, por mitose, fissão binária, esporulação, partenogênese e assim por diante. Outra possibilidade é no caso de gêmeos. Atualmente o termo clone também é aplicado a uma técnica desenvolvida pelo ser humano de se construir cópias geneticamente idênticas de células, tecidos, órgãos ou indivíduos. Esse termo tem sido usado desde a década de 70 para contextualizar a prática da clonagem de DNA na biologia molecular. Questão 5 Resposta correta: D Resolução comentada: Uma reação de PCR se inicia pela desnaturação das fitas duplas de DNA em uma temperatura elevada em torno de 94-95ºC por aproximadamente 5-10 minutos dependendo da quantidade de G+C na composição da amostra. Após isso, tem-se um ciclo de temperaturas que se inicia pela redução a aproximadamente 50-60ºC que favorece o anelamento dos primers às fitas 5’- 3’ (sense) e 3’- 5’(anti-sense). Em seguida, a temperatura é novamente elevada para 72ºC para a fase de extensão da fita simples. Esses ciclos se repetem entre 28 a 40 ciclos para obtenção de uma quantidade suficiente de produto ou os chamados amplicons. Questão 6 Resposta correta: A Resolução comentada: O padrão de bandas de um determinando segmento de DNA encontrado na amostra do local do crime deve ser igual ao encontrado em amostras coletadas do suspeito. Uma vez que a amostra apresentará cromossomos do mesmo indivíduo, o padrão de bandas gerados por uma digestão enzimática deve ser correspondente ao suspeito e diferente do que foi encontrado em amostras da vítima. Questão 7 Resposta correta: A Resolução comentada: Uma célula-tronco é capaz de originar milhões de cópias de si mesma; as células- tronco pluripotentes ou totipotentes podem se diferenciar em quaisquer tipos de células, incluindo células musculares cardíacas e células epiteliais. Células-tronco embrionárias são exemplos de células pluripotentes ou totipotentes. Infelizmente, nos dias atuais não é possível a coleta de células-tronco do blastocisto sem a destruição do embrião. Questão 8 Resposta correta: C Resolução comentada: A técnica do DNA recombinante pode ser descrita, de uma forma simples, como o conjunto de técnicas que permitem a manipulação de moléculas de DNA específicas, considerando as propriedades do DNA. Questão 9 Resposta correta: C Resolução comentada: As células-tronco se diferenciam das demais células do organismo por duas características importantes: capacidade de se auto renovar originando, por mitose, duas células filhas exatamente iguais entre si e iguais à célula original e capacidade de diferenciação, gerando outros tipos de células. Questão 10 Resposta correta: E Resolução comentada: As células de pluripotência induzida foram criadas por um processo chamado de reprogramação genética e são importantes para o tratamento de doenças que necessitam de células transplantadas, visto que são obtidas do próprio indivíduo, evitando quadros de rejeição. Questão 11 Resposta correta: D Resolução comentada: Dentre os exemplos citados no enunciado, os que necessitam de julgamentos éticos são: aborto, suicídio assistido, terapia com células-tronco embrionárias, uso de transgênicos e manipulação da informação genética. A alternativa que contém todos os corretos é a D. Questão 12 Resposta correta: B Resolução comentada: Biotecnologia significa qualquer aplicação tecnológica que utilize sistemas biológicos, organismos vivos ou seus derivados, para fabricar ou modificar produtos ou processos para utilização específica. Questão 13 Resposta correta: D Resolução comentada: De acordo com a legislação brasileira, as CTEs podem ser usadas para pesquisa desde que sejam obtidas de fertilização in vitro e não utilizadas no respectivo procedimento. Para seu uso, os embriões devem ser considerados inviáveis ou estarem congelados há três anos ou mais. Em qualquer caso, é necessário o consentimento dos genitores. Questão 14 Resposta correta: E Resolução comentada: Uma vez que a sequência responsável pela codificação da insulina humana (célula eucariótica) foi identificada, cientistas da Genentech (empresa do EUA) foram capazes de ligar o fragmento humano ao plasmídeo bacteriano previamente isolado desse organismo. Essa manipulação genética acontece fora dos organismos vivos, sendo um procedimento, portanto, in vitro. O uso da mesma enzima de restrição, tanto para isolar o fragmento humano quanto para abrir o plasmídeo e permitir a ligação do novo fragmento ao vetor, é importante uma vez que as extremidades ficam compatíveis para o anelamento entre os respectivos pares de base por meio da ação de uma DNA ligase. O processo de inserção de um vetor na célula hospedeira é chamado de transformação. A bactéria irá então transcrever e traduzir a informação genética contida no plasmídeo, levando assim à produção do hormônio. A proteína produzida pela bactéria sofre alguns processos pós-traducionais e por isso precisam ser extraídas da bactéria, filtradas e purificadas para só então serem utilizadas pelos pacientes. Questão 15 Resposta correta: E Resolução comentada: O vetor plasmídeo e o fragmento de DNA de interesse serão clivados utilizando a mesma enzima de restrição. Ao serem misturados, incubados juntos, nem todas as moléculas irão se juntar e formar recombinantes. Alguns plasmídeos reanelarão sem a presença do inserto. Uma forma de se identificar somente clones positivos recombinantes é adicionar à estrutura do plasmídeo alguns genes marcadores. Normalmente, um dos marcadores confere resistência à um antibiótico, ou seja, somente colônias que apresentam o gene para o antibiótico crescem no meio; outro marcador pode ser o gene do lacZ que codifica a beta-galactosidase capaz de clivar um composto de açúcar mais corante azul chamado X-gal. No caso apresentado, foi inserida à sequência do lacZ, um sítio de restrição igual ao usado para se isolar o fragmento de interesse. Sendo assim, os vetores que incorporaram o novo DNA à sua sequência interromperam o gene do lacZ impedindo que ele codificasse a beta- galactosidase. Em consequência, as colônias crescem mas têm cor branca. Questão 14 Resposta correta: D Resolução comentada: Nós temos diferentes tipos de células-tronco no nosso organismo. Elas desempenham um trabalho árduo todos os dias na manutenção das células que estão sendo usadas, danificadas ou que morrem. Existem células-tronco do sangue gerando células sanguíneas, células-tronco musculares gerando células musculares, células-tronco neurais ou nervosas gerando todos os tipos de células no cérebro e outros tipos de células-tronco no organismo como um todo. As células-tronco que temos em nosso organismo são chamadas de células-tronco de adulto ou células- tronco teciduais. As células-tronco embrionárias são bastante interessantes, pois podem gerar todos os tipos de células do seu organismo. Elas são encontradas apenas no início do estágio embrionário chamado blastocisto, que contém de 50-100 células. Recentemente, cientistas descobriram uma maneira de gerar células-tronco a partir da pele ou de células nervosas. Essas células-tronco criadas artificialmente são chamadas de células de pluripotência induzida. Elas são iguais as células-tronco embrionárias e podem gerar todos os diferentes tipos de células do organismo. Questão 17 Resposta correta: B Resolução comentada: As células pluripotentes ou totipotentes são assim chamadas pois têm a capacidade de se diferenciar em quaisquer células do organismo. São exemplos de células pluripotentes as células-tronco embrionárias e as células de pluripotência induzida. As células-tronco multiplicam-se através do processo de divisão celular chamado mitose. Questão 18 Resposta correta: C Resoluçãocomentada: As células-tronco são portadoras de várias promessas terapêuticas, como em caso de lesões de paralisia na medula óssea ou do Mal de Parkinson. A pele pode ser uma fonte de células autólogas, células que permitem tratar o doente com suas próprias células sem recorrer à clonagem terapêutica. Questão 19 Resposta correta: A Resolução comentada: Os métodos para desenvolvimento de transgênicos não varia muito da clonagem realizada para produção de insulina e outros produtos. Algumas etapas a mais são necessárias uma vez que estamos trabalhando com organismos eucarióticos e mais “complexos”. Antes de mais nada é importante definir a característica que desejamos adicionar à nossa planta. Para isso precisamos desenhar e preparar um construto de gene, ou seja, o plasmídeo, que deverá ter basicamente uma origem de replicação, um terminador (indica o sítio de parada da leitura do DNA), um gene de resistência, além do gene de interesse. A Agrobacterium possui uma capacidade natural de infectar plantas e integrar o seu DNA ao das plantas; e a engenharia genética utiliza essa propriedade a seu favor. Para que seja possível transformar uma folha, deve-se primeiro cortar a folha em pequenos pedaços e danificá-la bem, esterilizá-la e incubá- la com a Agrobacterium que já contém o plasmídeo de interesse. Normalmente, esse tempo de incubação é curto, em torno de 10 minutos. O macerado de folhas é removido e colocado em um meio de cultura contendo antibiótico. Nesse momento, as células das folhas eficientemente transformadas começam a se diferenciar formando um grande conjunto de grumos celulares espalhados pela placa da cultura. O uso de hormônios auxilia na diferenciação celular e na formação de caule e raiz nas pequenas plantas ainda em cultura. Em seguida, quando ele já apresenta raiz e caule mais desenvolvidos, ela é transplantada para a terra. Após alguns dias coletam-se as sementes para realizar ensaios de PCR e confirmar se de fato a sequência gênica esperada foi incorporada à planta. Questão 20 Resposta correta: B Resolução comentada: O PCR em tempo real combina a tecnologia do PCR tradicional com o uso de moléculas fluorescentes de forma a monitorar a amplificação de produtos ao longo de cada ciclo do PCR. Durante a reação de PCR, produtos não específicos, bem como a dimerização de primers (anelamento entre 2 primers) podem ser gerados. Para detectar esses “erros”, utiliza-se a chamada curva de “melting”. Nesse procedimento pode-se aumentar a temperatura até 95ºC e monitorar a emissão de fluorescência durante o processo. A temperatura de desnaturação do DNA é observada pela queda abrupta do sinal de fluorescência gerado pelo desligamento da sonda fluorescente do DNA. Produtos considerados não específicos ou mesmo a dimerização de primers apresentam temperaturas de desnaturação menores do que os produtos específicos.
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