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DANIELLE CRISTINA GOMES AULA PRÁTICA 01 PIPETAGEM AUTOMÁTICA Governador Valadares 2021 1. INTRODUÇÃO As pipetas automáticas foram criadas em 1940 por George Rigas para recolher amostras de leite para analisar bactérias ali inseridas. Possui a função de transferir quantidades menores e precisas de materiais líquidos com volumes que podem ser ajustados. O material é utilizado em laboratórios de pesquisa e exames onde a precisão é necessária para a realização dos procedimentos, e por possuir ponteiras descartáveis evitam a contaminação de substâncias que irão ser manipuladas, já o líquido a ser estudado é retido na ponteira para que não descalibre o equipamento. Para se ter a efetivação de resultados é necessário selecionar a pipeta adequada para o procedimento, visto que em laboratórios são encontradas modelos entre p-2 a p -5000 no qual o volume a ser transferido deve estar dentro da faixa de volume recomendada para a pipeta. Selecionada a pipeta adequada para o experimento, é necessário ajustar o volume pretendido, assim recomenda-se segurar a pipeta com uma das mãos e girar o botão de ajuste até chegar ao volume desejado. Determinados modelos existem o anel na parte superior que bloqueia o volume e ambos possuem um visor onde é mostrado a quantidade do volume que irá ser adquirido. Deve-se colocar a ponteira na pipeta de forma que fique bem firme, apertar o botão de pipetagem até sentir o primeiro ponto, levar a pipeta com o botão apertado até o recipiente com o líquido a ser transferido. Com a pipeta na posição vertical, deve-se fazer a ponteira imergir na superfície do líquido a ser pipetado e assim o líquido será sugado, e para o expelir é necessário soltar lentamente o botão para a posição inicial. Caso restar gotas na ponteira aperta-se até o segundo ponto para dispensar o restante do liquido. Para a retirar a pipeta do recipiente, mantenha-se o botão apertado no segundo ajuste e desliza-se com cautela a ponta da ponteira pela parede do recipiente, por fim volta-se o botão para a posição inicial lentamente. Para descartar a ponteira, aperta-se o botão ao lado do botão de pipetagem no local reservado para descartes. 2. MATERIAIS, REAGENTES E EQUIPAMENTOS MATERIAIS · 2 Pipetas Monocanal · 1 Frasco de descarte de ponteiras · Béquer · 1 Relógio de Vidro REAGENTES · Água Destilada · Óleo Vegetal EQUIPAMENTOS · Balança Analítica · Espectrofotômetro 3. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Antes de iniciar os procedimentos foi selecionado a pipeta correta de acordo com os volumes necessários para o experimento. Logo, foram iniciadas a aula prática. ETAPA 01: Pipetar 990 µL de água destilada Foi realizado a pipetagem de 990 µL de água destilada na pipeta automática p-1000, pesou-se a quantidade pipetada na balança analítica com o auxílio do vidro de relógio, descartou-se a solução na pia e secou-se a vidraria. Neste procedimento não foi utilizado o óleo vegetal no método de pipetagem. ETAPA 02: Pipetar 550 µL de água destilada Foi realizado a pipetagem de 550 µL de água destilada na pipeta automática p-1000, pesou-se a quantidade pipetada na balança analítica com o auxílio do vidro de relógio, descartou-se a solução na pia e secou-se a vidraria. Neste procedimento não foi utilizado o óleo vegetal no método de pipetagem. ETAPA 03: Pipetar 237 µL de água destilada Foi realizado a pipetagem de 237 µL de água destilada, sendo que a pipetagem ocorreu em duas etapas: na primeira pipetagem foi utilizado 200 µL na pipeta automática p-1000 e na segunda pipetagem utilizou-se 37 µL na pipeta automática p-100, por fim pesou-se a quantidade pipetada na balança analítica com o auxílio do vidro de relógio, descartou-se a solução na pia e secou-se a vidraria. Neste procedimento não foi utilizado o óleo vegetal no método de pipetagem. 4. RESULTADOS ETAPA 01: Pipetar 990 µL de água destilada; Foi encontrado na pesagem o volume de 981 µL, valor considerado abaixo do esperado. ETAPA 02: Pipetar 550 µL de água destilada; Foi encontrado na pesagem o volume de 547 µL, valor considerado abaixo do esperado. ETAPA 03: Pipetar 237 µL de água destilado; Foi encontrado na pesagem o volume de 527 µL, valor considerado muito acima do esperado. 5. DISCUSSÃO ETAPA 01 O valor obtido de 981 µL na pipetagem foi 9 µL abaixo do espero, explica-se que durante a o procedimento o manuseio de apertar a pipeta para sugar o liquido não foi suficiente. ETAPA 02 O valor obtido de 547 µL na pipetagem foi 3 µL abaixo do espero, explica-se que durante a o procedimento o manuseio de apertar a pipeta para sugar o liquido não foi suficiente. ETAPA 03 O valor obtido de 527 µL na pipetagem foi 290 µL a mais do espero, explica-se que durante a o procedimento o manuseio de apertar a pipeta para sugar o liquido foi feito de forma rápida. Foi mostrado o equipamento espectrofotômetro, explicando-se suas características, funções, e utilização em um laboratório. 6. CONCLUSÃO Entende-se que o método de pipetagem é fundamental para a execução de estudos em um laboratório. Diante disso, o método de aplicação do experimento deve ser feito de forma adequada desde a pesagem de medidas como volume afim de efetivar o experimento. 7. REFERÊNCIAS · http://labiq.iq.usp.br/paginas_view.php?idPagina=13&idTopico=65#.YYp5PhrMLU · https://www.ibdciencia.com/pt/pipetas-automaticas-c-181 · https://www.lojaroster.com.br/blog/pipetas-pipetadores-funcoes-tipos