Relatório aula pratica 1

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BIOQUÍMICA CLÍNICA- RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS:1 
NOME: Marcia Maria Issa Portinho MATRÍCULA: 01373766 
 
CURSO: Biomedicina POLO: Mercês - Salvador, Ba 
 
PROFESSOR ORIENTADOR: Rene Nabuco Data: 23/04/2022 
 
 
 
DOSAGEM BIOQUÍMICA EM SORO 
 
A bioquímica do sangue, concomitante ao exame clínico é de suma 
importância no auxílio diagnóstico e acompanhamento terapêutico. Os testes 
bioquímicos são utilizados com o objetivo de avaliar as variadas funções 
metabólicas desempenhadas pelos órgãos e tecidos do corpo humano. Estes 
testes oferecem resultados imediatos que são utilizados para posteriores 
análises e interpretações. 
Na aula prática foram utilizados os soros sanguíneos de seis 
colegas, cada soro para cada tipo de dosagem; espectrofotômetro; banho-
maria; cronômetro; tubos de ensaio; cubetas; pipetas de 100 e de 1000μL. 
Foram realizadas apenas as dosagens de Glicose, Ferro Sérico, 
Transaminase TGO e a Transaminase TGP. As dosagens de Ferritina e Transferrina não foram 
realizadas devido à falta de material. 
As dosagens bioquímicas foram realizadas de acordo com as bulas específicas de cada dosagem 
e as análises encontradas seguem descritas no quadro abaixo: 
Análises realizadas Metodologia 
 
Glicose 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Método: Enzimática Colorimétrica - GOD - PAP (Trinder). 
Descrição da metodologia: A Glicose é oxidada enzimaticamente 
pela Glicose Oxidase (GOD) de acordo com a seguinte reação: 
 
O Peróxido de Hidrogênio, em presença da Peroxidase (POD) reage 
com a 4 - Aminoantipirina e Fenol, formando um cromógeno 
vermelho cereja cuja intensidade de cor é proporcional à concentração 
de Glicose. 
Homogeneíza-se e coloca-se em banho-maria 37ºC por 10 minutos. 
Prepara-se as cubetas para serem colocadas no espectro fotômetro, 
cuja absorbância da Amostra e do Padrão foi estabelecida em 505 nm 
(490 - 550 nm), acerta-se o zero com o Branco. 
Para o cálculo dos resultados utilizamos a seguinte equação: 
Glicose = Abs Amostra x 100 
 Abs padrão 
 
Valor de Referência: Glicose entre 65 e 99 mg/d L = Normal 
 
Os valores obtidos no espectrofotômetro foram: 
Branco: 2,0 mL ou 2000 μL 
 
 
 
 
 
 
 
 
Padrão: 0,270 
Teste: 0,242 
 
Resultado: 0,242 x 100 = 89,62 mg/dL 
 0,270 
 
Intercorrências: 
- Validade do reagente vencida; 
- Demora na leitura; 
- Sangue hemolizado ou lipêmico; 
- Preparo do paciente para coleta, o jejum por exemplo. 
 
Alterações na dosagem - aspectos clínicos: 
Níveis elevados de glicose estão associados a diversas condições 
clínicas. A hiperglicemia pode ser resultante de ausência na secreção 
da insulina ou estar associada a outras doenças endócrinas. A elevação 
da glicose também pode estar associada ao uso de fármacos que podem 
reduzir ou bloquear a liberação da insulina. 
A dosagem de glicose é de grande importância para o diagnóstico e 
monitoramento do Diabetes Mellitus, bem como no diagnóstico das 
acidoses metabólicas, hipoglicemias e desidratações. 
 
 
Ferro sérico 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Método: Goodwin modificado (FERROZINE). Técnica Macro. 
 
Descrição da metodologia: Reagentes para a determinação 
quantitativa de ferro em amostras de soro humano. Somente para uso 
diagnóstico in vitro. 
O ferro é liberado da transferrina em meio ácido tamponado e reduzido 
a íons ferrosos por ação do tioglicólico. O ácido 3- (2-piridil)-5,6-
bis(4fenilsufônico)-1,2,4-triazina reage com estes íons, 
desenvolvendo um complexo de coloração rósea, com intensidade 
proporcional à concentração de íons Fe presentes na amostra. Seu pico 
de absorção é em 565 nm. 
Preparar e identificar três tubos de ensaio como: 
Branco: reagente 1 = 1,5 mL 
Padrão: reagente 1 = 1,5 mL + reagente 2 = 0,5 mL 
Teste: reagente 1 = 1,5 mL + soro = 0,5 mL 
 
Homogeneizar e realizar as leituras fotométricas do tubo Teste em 565 
nm, acertando o zero com água deionizada. Esta leitura será A1. 
 
Homogeneizar e incubar a 37 °C por 10 minutos. Efetuar nova leitura 
fotométrica em 565 nm do tubo Teste e do tubo Padrão, acertando o 
zero com o tubo Branco. Esta absorbância da amostra será A2. A 
amostra deve ser lida imediatamente após 10 minutos de incubação. 
 
Cálculo: 
FC = 200/Ap; 
Ferro(µg/dL) = (A2 – A1) x FC; 
A1= Absorbância da amostra; 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A2= Absorbância da amostra; 
Ap= Absorbância do padrão; 
FC= Fator de calibração; 
 
Resultado: 
A1 = 0,162; 
A2 = 0,273; 
Ap = 0,232 FC = 200 / Ap; 
FC = 200 / 0,232; 
FC = 862; 
Ferro (µg/dL) = (A2-A1) x FC 
Ferro (µg/dL) = (0,273-0,162) x 862 
Ferro = 95,7µg/dL 
 
Intercorrências: 
- Validade do reagente vencida; 
- Demora na leitura; 
- Sangue hemolizado ou lipêmico; 
- Preparo do paciente para coleta, o jejum por exemplo. 
 
Alterações na dosagem - aspectos clínicos: O ferro é um íon que tem 
importância fundamental na constituição da hemoglobina e outras 
substâncias tais como citocromo, peroxidase, catalase e outros. 
Também reflete principalmente a quantidade de ferro ligado a 
transferrina. O ferro é armazenado no tecido ligado à uma proteína, a 
ferritina. A hemostasia do ferro é regulada principalmente pela 
absorção e não pela excreção. Nos estados patológicos, as elevações 
do ferro sérico podem ser vistas em: 
- Condições de destruição aumentada de eritrócitos – anemia 
hemolítica; 
- Formação sanguínea diminuída – envenenamento por chumbo ou 
deficiência de piridoxina; 
- Liberação aumentada de ferro dos reservatórios do organismo 
- Armazenamento defeituoso do ferro – anemia perniciosa; 
-Velocidade aumentada de absorção – hemocromatose e siderose 
transfusional. 
A redução de ferro sérico pode ser causada por: 
- Suprimento inadequado; 
- Elevação da demanda (gravidez, crianças até 5 anos); 
- Perda sanguínea ou combinação destes. 
Em condições como infecções e tumores malignos, o ferro também 
está reduzido. 
 
Ferritina Sem material para a realização da dosagem 
Transferrina Sem material para realização da dosagem 
 
Transaminase TGO 
 
Método: Teste Cinético-UV, para determinação de TGO 
Descrição da metodologia: A atividade da aspartado 
aminotransferase ocorre conforme a reação. A Aspartato 
aminotransferase (AST ou TGO) catalisa a transferência do grupo 
amino do aspartato para o cetoglutarato, formando oxalacetato e 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
glutamato. A atividade enzimática é determinada, empregando a 
reação acoplada de malato desidrogenase (MDH), a partir da 
velocidade de desaparecimento no NADH, medido em 340 nm. 
Foram separados três (03) tubos: letras B (branco); P (padrão) e T 
(Teste). No tubo B foi adicionado 1.000ul de água destilada; no tubo 
P foi adicionado + 800ul da substância Tampão + 200ul do substrato 
e no tubo T, teste foi adicionado 800ul da substância tampão + 100ul 
do substrato + 100ul do soro. 
Os tubos foram levados ao banho maria por um tempo de um minuto. 
Após o banho-maria o conteúdo de cada tubo foi despejado nas 
respectivas cubetas que foram acondicionadas em seguida ao 
espectrofotômetro, respeitando a ordem de colocação: em primeiro de 
cima pra baixo, cubeta (B); em seguida cubeta (P) e seguindo a 
sequência (T). 
O branco (B) = 0, mesmo tendo valor de referência como 18; o padrão 
25, e o teste (T) foi observado com intervalo de tempo a cada 3 
minutos obtendo os seguintes valores: 
Branco = 36 
Padrão = 36,4 
Teste = 36,6 
Cálculo: Após efetuadas as leituras das absorbâncias, calcular a média 
de variação das absorbâncias por minuto: 
 ∆A/min = [(A0-A1) + (A1-A2) + (A2-A3)] / 3 
 
Para calcular a atividade da TGO (U/L), deverá ser usado o fator: 
 TGO (U/L) = ∆A/min x 1746 
 
Resultado: 
∆A/min = [(36) + (36,4) + (36,6)] / 3 
∆A/min = 36,33 
 
Valores de referência Valores Normais (37 °C):Mulheres < 31 U/L 
Homens < 37 U/L 
 
Intercorrências: 
- Validade do reagente vencida; 
- Demora na leitura; 
- Sangue hemolizado ou lipêmico; 
- Preparo do paciente para coleta, o jejum por exemplo. 
 
Alterações na dosagem - aspectos clínicos: 
A Enzima AST-TGO Aspatarto Aminotransferase ou Transaminase 
Glutâmico Oxalacética é encontrada no fígado, pâncreas, baço rim, 
cérebro, coração, pulmão e músculo esquelético. Valores elevados são 
encontrados em infarto, cateterismo, angioplastia cardíaca, necrose 
hepática, anemias hemolíticas, pancreatite aguda, cirrose hepática, 
mononucleose, hipotireoidismo, trauma e necrose cerebral e distrofias 
musculares. Podendo ser utilizada também na monitoração de terapias 
que utilizam drogas hepáticas. A elevação do AST-TGO nos casos de 
infarto do miocárdio apresenta pico no intervalo de 24 a 48 horas com 
retorno aos valores de referência com 5 a 6 dias. Nos casos de hepatites 
virais seus valores apresentam-se elevados em até 20 vezes em relação 
aos de referência. 80% da AST-TGO nos hepatócitos está na 
mitocôndria, por isso o dano hepatocelular grave apresenta níveis mais 
elevados de TGO. 
 
Transaminase TGP 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Método: Teste Cinético-UV para a determinação do TGP. 
 
Descrição da metodologia: A atividade da Alanina aminotransferase 
ocorre conforme a reação. A Alanina aminotransferase (ALT ou TGP) 
catalisa a transferência do grupo amino da alanina à cetoglutarato, 
formando piruvato e glutamato. A atividade enzimática é determinada, 
empregando-se a reação acoplada de lactato desidrogenase (LDH). A 
partir da velocidade de desaparecimento no NADH, medido em 340 
nm é determinada a concentração catalítica. 
Procedimentos: 
Preparo do reagente: O reagente para o teste deve ser preparado na 
proporção de 4 partes de R1-TAMPÃO e 1 parte de R2-
SUBSTRATO. Homogeneizar suavemente. O reagente de trabalho é 
estável por até 3 semanas em temperatura de 2 a 8 °C. 
Pipetar na cubeta: Amostra 100μL e o Reagente 1000μL 
Pipetar o reagente em um tubo de ensaio, homogeneizar e 
imediatamente incubar a 37 °C. Acionar o cronômetro. Após 1 minuto 
ler a absorbância inicial (A0). Efetuar novas leituras a cada 60 
segundos, por 03 minutos (A1, A2 e A3). 
 
Cálculos: Após efetuadas as leituras das absorbâncias, calcular a 
média de variação das absorbâncias por minuto (∆A/min). 
∆A/min = [(A0-A1) + (A1-A2) + (A2-A3)] / 3 
Para calcular a atividade da GOT (U/L), deverá ser usado o fator: 
TGP (U/L) = ∆A/min x 1746 
 
Resultado: 19,0 U/L 
 
Valores de referência Valores Normais (37 °C): 
Mulheres < 32 U/L 
Homens < 42 U/L 
 
Intercorrências: 
- Todos os anticoagulantes interferem na dosagem. 
- Soros (amostras) com hemólise, ictéricia, lipemia, triglicérides ≥ 
350mg/dL, hemoglobina ≥ 180mg/dL e bilirrubina ≥ 19mg/dL. 
- Os valores são falsamente elevados com concentração de ceto ácidos 
endógenos elevados. 
- Os valores são falsamente diminuídos com pacientes 
hemodialisados, com hipovitaminose ou outras patologias associadas 
com deficiência de pirodoxal fosfato. 
 
Alterações na dosagem - aspectos clínicos: 
A Enzima ALT-TGP Alanina Aminotransferase ou Transaminase 
Glutâmico Pirúvica é encontrada no fígado, pâncreas, rim, coração e 
músculo esquelético. Valores elevados são encontrados em 
insuficiência cardíaca ou choque com necrose hepática. A TGP é mais 
sensível na detecção da doença hepatocelular. Na hepatite viral, seu 
pico ocorre aproximadamente na primeira ou segunda semana do 
início da infecção, diminuindo a partir da terceira. Valores elevados 
também são encontrados em casos de hepatite e esteatose não 
alcoólica, alcoolismo, hemocromatose, doença pancreática, cirrose, 
icterícia obstrutiva e carcinoma metastático. Em infarto do miocárdio 
os níveis são levemente elevados ou inexistentes. 
 
 
Referências: 
https://www.google.com/search?q=Bula+de+dosagem+de+glicose+significado+cl%C3%ADn
ico&sxsrf=APq-
WBvGeZ6XWyWzbVMrvbs9zKHqZtK04Q%3A1650978141448&ei=Xe1nYrr-
Gq3J5OUPquS_2As&ved=0ahUKEwj6oJzt5LH3AhWtJLkGHSryD7sQ4dUDCA4&uact=5&
oq=Bula+de+dosagem+de+glicose+significado+cl%C3%ADnico&gs_lcp=Cgdnd3Mtd2l6EA
MyBQghEKABMgUIIRCgAToHCAAQRxCwAzoICCEQFhAdEB46BAghEBU6BwghEAo
QoAFKBAhBGABKBAhGGABQ3gtYy0Bg8kVoAXAAeACAAdQBiAHbF5IBBjAuMTgu
MZgBAKABAcgBCMABAQ&sclient=gws-wiz 
https://www.google.com/search?q=bula+de+dosagens+de+ferro+s%C3%A9rico+ferritina+e+
transferrina&sxsrf=APq-WBtf6XKAIvubdDCCd_FbhT7_C7s-
lg%3A1650984031023&ei=XwRoYrWVAcKz5OUP6c2e4AU&oq=bula+de+dosagem+de+f
erro+s%C3%A9rico%2C+ferritina+e+&gs_lcp=Cgdnd3Mtd2l6EAEYAzIFCCEQoAEyBQgh
EKABMgUIIRCgATIICCEQFhAdEB46BwgAEEcQsANKBAhBGABKBAhGGABQrAhY_
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