Estudo de Cromossomos e suas Anormalidades

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● É o conjunto cromossômico ou a constante 
cromossômica diplóide (2n) de uma espécie 
● A representação do cariótipo pode ser um 
cariograma (imagem dos cromossomos) ou um 
idiograma (esquema dos cromossomos). 
● Há Cromossomos Autossomos (todos menos os 
sexuais) e Cromossomos sexuais (Alossomos) 
● Para se fazer o estudo dos cromossomos é 
preciso usar cromossomos que estão na fase 
mitótica (células com alta divisão celular) 
(5ª fase- metáfase) 
● O próximo passo é fazer a coloração dos 
cromossomos. Há 3 técnicas principais: 
 Microtécnica/Microcultura: coloração do 
cromossomo de uma mesma cor por ele 
todo 
 Bandeamento cromossômico: coloração 
de regiões claras e escuras 
 Citogenética molecular – FISH: uso de 
sondas de DNA marcadas com 
fluorescência 
 Abortamento recorrente 
 Deficiência mental sem causa conhecida 
 Gestação em mulheres com idade 
avançada 
 Histórico familiar de síndromes 
 Natimortos ou morte neonatal sem causa 
conhecida 
 Problemas de fertilidade 
 Problemas de crescimento e 
desenvolvimento 
I. Cultura de leucócitos- Microcultura 
II. Bandeamento cromossômico 
III. Citogenética molecular – FISH 
 
 
 Coleta de sangue venoso periférico 
 Colocam-se linfócitos em meio de cultura 
específico para células eucarióticas 
humanas com fitoemoaglutinina (mitótico 
que induz divisão celular). Mantido por 
72h a 37ºC 
 Adiciona-se colchicina que impede a 
formação do fuso (divisão da célula) 
 Coloca-se a cultura em solução hipotônica 
(0,075 M KCl) para inchar as células 
 Fixa-se o material em lâmina em solução 
de metanol e acido acético (3:1) 
 Cora-se 
 
 
 
● Cariotipagem por citometria de imagem: se faz 
o cultivo dos linfócitos, coloração, observação 
http://pt.wikipedia.org/wiki/Dipl%C3%B3ide
http://pt.wikipedia.org/wiki/Cariograma
http://pt.wikipedia.org/wiki/Cromossomo
http://pt.wikipedia.org/wiki/Idiograma
miscroscópia, captação fotográfica, mas a 
montagem de fato do cariótipo se faz por um 
software (Ex: Image-Pro Plus), que faz a medição 
dos cromossomos e junta seus pares 
 
 Bandeamento: quando há regiões claras e 
escuras no cromossomo 
 No Bandeamento G (tripsina + Giemsa) 
utiliza-se o corante Giemsa, após pré-
tratamento das preparações com soluções 
proteolíticas (tripsina) que degradam boa 
parte das proteínas 
 Aparecem bandas coradas ao longo de 
todo o cromossomo. 
 Regiões claras são ricas em GC (genes 
ativos) e não coram 
 Regiões escuras-são ricas em AT (genes 
inativos altamente condensados) e coram 
 Bandeamento R - Os cromossomos 
recebem pré-tratamento com calor antes 
da coloração Giemsa 
 Nesse caso, produz a coloração reversa ao 
bandeamento G 
 Regiões ricas em C (citosina) e G (guanina) 
aparecendo como bandas escuras e 
regiões ricas em A (adenina) e T (timina) 
aparecendo como bandas claras 
 No Bandeamento C (hidróxido de sódio + 
Giemsa) utiliza-se o corante Giemsa, após 
pré-tratamento das preparações com 
soluções de pH básico. Aparecem bandas 
coradas nas regiões de heterocromatina 
constitutiva (Centrômeros) 
 No Bandeamento Q (quinacrina) utiliza-se 
o corante fluorescente Quinacrina ou seus 
derivados, aparecem bandas de diferentes 
intensidades luminosas ao longo dos 
cromossomos. 
 Bandeamento T: marcam as regiões 
teloméricas dos cromossomos. 
 Bandeamento NOR: coram as constrições 
secundarias no grupo dos cromossomos 
D 
 
Bandas C (hidróxido de sódio + Giemsa) 
 
Bandas Q (quinacrina): bandas de diferentes 
intensidades luminosas 
 
Bandas G (tripsina + Giemsa): bandas coradas ao 
longo de todo o cromossomo 
 
 
 
Esquerda: cariograma 
Direita: idiograma 
 
 
 
 
 Permite a localização direta através da 
utilização de fluorocromos específicos 
 Permite detectar rápida e 
inequivocamente rearranjos 
cromossômicos complexos (não 
detectados pelo bandeamento tradicional) 
e simples 
 Pode-se caracterizar muitas 
anormalidades cromossômicas que não 
eram detectadas pelas técnicas de 
bandeamento tradicionais 
 
 Medicina diagnóstica: suspeita de 
microdeleções cromossômicas associadas 
a síndromes genéticas; diagnóstico de 
câncer 
 Síndrome de Down (trissomia do 
cromossomo 21) 
 Síndrome de Patau (trissomia do 
cromossomo 13) 
 Síndrome de Edwards (trissomia do 
cromossomo 18) 
 Síndrome de Turner (monossomia do 
cromossomo X) 
 Síndrome de Klinefelter (47,XXY) 
 Síndrome Cri-du-chat (deleção 5p) 
 Síndrome 47, XYY 
 Trissomia do X (47, XXX) 
 Outras alterações cromossômicas raras 
 
● Masculino (15 cromossomos no grupo C e 5 
cromossomos no grupo G) 
 
● Feminino (16 cromossomos no grupo C e 4 
cromossomos no grupo G) 
 
 Padronização internacional da 
nomenclatura de cromossomos 
 São identificados pelo seu tamanho, pela 
posição do centrômero e padrão de 
bandas 
 São arranjados em pares de homólogos, 
em ordem decrescente de tamanho 
 
 
 
 
● 1p22.2: alteração no crom. 1; no P (braço curto) 
na Região 2 (na imagem é possível ver que é na 
região terminal do braço curto do crom 1) na 
Banda 2 e subBanda 2 
 
● Há alguns estudos específicos dos cromossomos x 
e y que podem ser feitos em substituição ao 
cariótipo ou antes deste, mediante a algumas 
situações clínicas: 
 Mulheres com crescimento retardado 
 Homens com problema de fertilidade 
 Gestantes com risco de transmissão de 
doença ligada ao X 
● Uso de células em interfase 
● A cromatina sexual do X aparece nas células 
interfásicas das fêmeas de mamíferos e é 
chamada de Corpúsculo de BARR, sendo uma 
massa fortemente corada 
● Avaliação: Um dos cromossomos X permanece 
espiralado na interfase e tem replicação tardia em 
comparação ao seu homólogo, (tam de 1u e 
aderida à membrana nuclear) 
● Hipótese de Lyon: Estabelece que um 
cromossomo X em cada célula (ao acaso, seja o 
proveniente do espermatozoide ou do óvulo dos 
progenitores) é inativado, no início do 
desenvolvimento embrionário das fêmeas (15º a 
16º dia de vida embrionária), em função da 
Compensação de Dose 
● Compensação de Dose: Alguns autores 
acreditam que a inativação de um cromossomo X 
da mulher seria uma forma de igualar a 
quantidade de genes nos dois sexos 
● Essa inativação é reversível nas células 
germinativa, incompleta e acontece pelo processo 
de metilação (ligação ou substituição de um 
grupo metila sobre vários substratos) 
 nº. C BAAR = nX- 1 
● A inativação do X ocorre através do gene XIST, 
localizado no centro de inativação do X (no braço 
longo do crom. X) 
● No cromossomo inativo, ocorre o silenciamento 
através da metilação geral 
● No cromossomo ativo, o gene XIST está 
inativado (através da metilação) mas o resto de 
seus genes são transcritos e traduzidos