Safari - 25 de mai. de 2022 2020

Prévia do material em texto

a)
 
 
b)
 
 
c)
 
 
d)
 
 
e)
Exercícios de Biologia Molecular e Biotecnologia
 
1. A reação em cadeia da polimerase (PCR) se tornou em
pouco tempo umas das ferramentas mais utilizadas no estudo
dos ácidos nucléicos. Quais os componentes de uma reação
típica de PCR?
a) Água deionizada, tampão, DNA polimerase, sonda de DNA
e plasmídeos
b) Água deionizada, tampão, sondas, DNA polimerase e DNA
molde
c) Água, tampão, nucleotídeos (DNTPs), primers, DNA
polimerase, magnésio e DNA molde
d) Enzima de restrição, nucleotídeos (DNTPs), DNA
polimerase, magnésio e sonda
e) Enzima de restrição, tampão, nucleotídeos (DNTPs),
magnésio e sonda
 
2. São características das endonucleases (enzimas) de
restrição:
a) Cortar o DNA exógeno em seqüências especificas, os
chamados sítio de clivagem
b) Foram inicialmente isoladas de organismos geneticamente
modificados
c) Facilitam a amplificação do material estudado
d) Ligam DNAs de diferentes seres
e) Não existem em seres vivos, sendo exclusivamente
produtos da indústria química
 
3. Considera-se, na seguinte ordem de execução, as etapas do
Southern blot:
a) Fragmentação do DNA; Eletroforese em gel; transferência
para membrana; marcação da sonda; hibridização.
b) Fragmentação do DNA; hibridização; Eletroforese em gel;
transferência para membrana; marcação da sonda.
c) Fragmentação do DNA; transferência para membrana;
Eletroforese em gel; marcação da sonda; hibridização.
d) Eletroforese em gel; Fragmentação do DNA; transferência
para membrana; marcação da sonda; hibridização.
e) Fragmentação do DNA; marcação da sonda; Eletroforese
em gel; transferência para membrana; hibridização.
 
4. A detecção de sinal fluorescente por SybrGreen ou pelo
sistema TaqMan é feita em qual técnica?
a) Seqüenciamento de RNA
b) PCR convencional
c) Seqüenciamento de DNA
d) PCR em Tempo Real
e) Northern blotting
 
5. As técnicas de Southern Blot, Northen-blot e Western-
blot envolvem a transferência de moléculas de um gel para
um suporte sólido (membrana). As moléculas transferidas
em cada técnica são, respectivamente:
a) DNA, RNA e proteínas.
b) RNA, proteínas e DNA.
c) DNA, proteínas e RNA.
d) RNA, DNA e proteínas.
e) proteínas, RNA e DNA.
 
 
 
 
 
 
 
 
6. Southern blot, Northern blot and Western blot são técnicas
usadas no diagnóstico molecular de doenças de organismos
aquáticos cultivados. Essas técnicas se baseiam em:
a) extração e imobilização de proteínas e ácidos nucleicos em
membranas.
b) hibridização de moléculas de DNA fixas em suporte com
sondas marcadas.
c) extração e amplificação de fragmentos de ácidos nucleicos
através do uso de sondas marcadas.
d) hibridização de moléculas (DNA, RNA e proteínas) usando
um anticorpo específico para cada molécula de interesse.
e) hibridização de ácidos nucleicos (Southern e Western blot)
e proteínas (Northern blot) usando um anticorpo específico
para cada molécula de interesse.
 
7. Teste de DNA confirma paternidade de bebê perdido
no tsunami
Um casal do Sri Lanka que alegava ser os pais de um bebê
encontrado após o tsunami que atingiu a Ásia, em dezembro,
obteve a confirmação do fato através de um exame de DNA.
O menino, que ficou conhecido como “Bebê 81” por ser o 81
o sobrevivente a dar entrada no hospital de Kalmunai, era
reivindica-do por nove casais diferentes.
Folhaonline, 14/02/2005. Adaptado.
Algumas regiões do DNA são sequências curtas de
bases nitrogenadas que se repetem no genoma; o número de
repetições dessas regiões varia entre as pessoas. Existem
procedimentos que permitem visualizar essa variabilidade,
revelando padrões de fragmentos de DNA que são “uma
impressão digital molecular”. Não existem duas pessoas com
o mesmo padrão de fragmentos com exceção dos gêmeos
monozigóticos. Metade dos fragmentos de DNA de uma
pessoa é herdada de sua mãe e metade, de seu pai. Com base
nos padrões de fragmentos de DNA representados abaixo,
qual dos casais pode ser considerado como pais biológicos do
bebê 81?
 
 
a) 1
b) 2
c) 3
d) 4
e) 5
 
 
 
 
 
8. As enzimas de restrição são as principais ferramentas
bioquímicas empregadas em Engenharia Genética. Com
relação a essas substâncias é correto afirmar que:
a) são altamente específicas, cortando o DNA em locais
determinados.
b) não existem em seres vivos, sendo exclusivamente
produtos da indústria química.
c) atuam como agentes de ligação entre DNA viral e
bacteriano.
d) permitem somente a ligação de pedaços de DNA de um
mesmo tipo celular.
e) impedem a clonagem de moléculas de DNA recombinante.
 
9. Em relação ao método de cromatografia de afinidade,
assinale a opção correta.
a) A cromatografia de afinidade é um método de separação de
proteínas que tem como base o uso de uma resina contendo
um anticorpo específico para a proteína que se deseja
purificar.
b) A cromatografia de afinidade, também conhecida como
filtração em papel, permite o fracionamento de substâncias
químicas de volumes moleculares diferentes.
c) A rede tridimensional presente no gel de cromatografia de
exclusão separa as moléculas, discriminando-as pela carga
elétrica.
d) Durante a cromatografia de afinidade, as moléculas com
maior carga elétrica são excluídas.
e) Na cromatografia de afinidade, ocorre a separação das
proteínas pela sua polaridade.
 
10. Um determinado teste é baseado nas seguintes etapas:
extração de RNA total, eletroforese em gel de agarose,
transferência para filtro de nitrocelulose, incubação com
sondas específicas e exposição ao filme de raio X. Estamos
falando de qual procedimento?
a) PCR em tempo real
b) Cromatografia
c) Seqüenciamento do DNA
d) Southern blotting
e) Northern blotting
 
11. A reação em cadeia da polimerase (PCR, na sigla em
inglês) é uma técnica de biologia molecular que permite
replicação in vitro do DNA de forma rápida. Essa técnica
surgiu na decada de 1980 e permitiu avanços científicos em
todas as áreas de investigação genômica. A dupla hélice é
estabilizada por ligações de hidrogênio, duas entre as bases
adenina (A) e timina (T) e três entre as bases guanina (G) e
citosina (C). Inicialmente, para que o DNA possa ser
replicado, a dupla hélice precisa ser totalmente desnaturada
(desenrolada) pelo aumento da temperatura, quando são
desfeitas as ligações hidrogênio entre as diferentes bases
nitrogenadas.
Qual dos segmentos de DNA será o primeiro a desnaturar
totalmente durante o aumento da temperatura na reaçao de
PCR? (1,0 ponto)
 
 
 
12. Na técnica de Western blot, o
_________________________ deve ser executado junto com
as amostras.
a) padrão comercial da proteína alvo.
b) padrão de peso molecular.
c) controle negativo.
d) controle positivo.
e) controle de carregamento.
 
13. As proteínas citoplasmáticas abaixo apresentam as
seguintes características:
 
 
PROTEÍNA
PESO
MOLECULAR
(PM)
PONTO
ISOELÉTRICO
(pI)
X 48.000 7,1
Y 126.000 3,8
Z 31.500 10,0
Pergunta-se:
A) Como se disporiam estas proteínas em uma eletroforese
em gel de poliacrilamida?
B) Qual seria a ordem de eluição (saída da coluna) das
proteínas em uma coluna de gel filtração
 
14. De acordo com a sequencia de aminoácidos das proteínas
abaixo (use a tabela abaixo para ajudar):
 
Cadeia lateral dos aminoácidos
Polar com carga
positiva
Polar com carga
negativa
Apolar Polar neutro
Arginina (Arg) Aspartato (Asp) Alanina (Ala) Asparagina (Asn)
Histidina (His) Glutamato (Glu) Isoleucina (Iso) Cisteína (Cys)
Lisina (Lys) Leucina (Leu) Glutamina (Gln)
 Metionina (Met) Serina (Ser)
 Fenilalanina (Phe) Treonina (Thr)
 Prolina (Pro) Tirosina (Tyr)
 Triptofano (Trp) 
 Valina (Val) 
 Glicina (Gli) 
 
Proteína A: Arg-His-Iso-Asn-Leu-Ser-Leu-Asp-Arg-Lys-met
 
Proteína B: Leu-Met-Gli-Asp-Glu-Glu-Cys-Thr-Asp-Asn-Glu
 
Proteína C: Ala-His-Lys-Met-Phe-Pro-Glu-Gli-Arg-Phe-Iso-
Leu-Leu-His-Trp-Val-Met-Glu-Pro-Trp-Asp-Met-Iso-Pro-
Ala-Phe-Met-Arg-val-Thr-Gln-Glu-Met-Iso-Leu-Gli-Cys-
His-Ala-Pro-Gln-Asn-Leu-Asp-Isso-Gli
 
Proteína D: Met-Cys-Arg-Lys-Iso-Glu-Phe-Met-Ala-Ser-Lys-
Gln-Thr-Tyr-Glu-Ser-Ala-Met-His-Lys-Gln-Trp-val-His-His-
Phe-Arg
 
a) Como estariam estas proteínas em eletroforese simples?
b) Explique, detalhando as etapas,como você faria para
purificar a proteína A das demais?
 
15. Qual é a diferença entre southern blotting e northern
blotting?
 
25/05/2022 20:20
Página 1 de 1