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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Bacteriologia Clínica DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Liziane Manci MATRÍCULA: 01441851 CURSO: Biomedicina POLO: Recife PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Rosilma de Oliveira Araújo TEMA DE AULA: MICOBACTÉRIAS, UROCULTURA E COPROCULTURA RELATÓRIO: 1. COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN A. Qual o princípio dessa coloração? As microbactérias apresentam grande quantidade de lipídeos em suas paredes celulares. Quando tratadas pelo corante Fucsina Fenicada, coram-se de vermelho e persistem ao descoramento subsequente por uma solução de Álcool-ácido forte (diferenciador). B. Descreva qual a aplicabilidade dessa técnica? O método de coloração de Ziehl-Neelsen é utilizado para a detecção dos BAAR (bacilos álcool-ácido-resistentes). 2. UROCULTURA E IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS AGENTES A. Descrever como é realizado o processamento da amostra Método de cultivo quantitativo, há várias opções de meios para urocultura. Classicamente, os meios recomendados são o Ágar Sangue e um meio seletivo para bacilos Gram-negativos. Embora possa ser usado o Ágar Eosina Azul de Metileno ou mais comumente o Ágar MacConkey. Cite e descreva as provas bioquímicas realizadas: O semeio do ágar Cled é realizado retirando-se uma alíquota da amostra com a alça bacteriológica calibrada de 1uL, arrastando a gota vertical, em seguida o semeio em rede. Após o período de incubação, foi observado o crescimento das colônias. Gram +: (número de colônias x 2x 1000 (crescimento apenas no ágar do sangue). Gram -: (número de colônias no sangue + número de colônias no Ágar Teague (EMB) x1000 (crescimento no ágar sangue no ágar EMB). No Cled – número de colônias x 1000. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 Identificação das colônias através das provas bioquímicas: TSI (Triple Sugar Iron): Meio diferencial utilizado no processo de bacilos gram-negativos (BGN) através das provas bioquímicas de testes de fermentação da glicose, lactose e sacarose e teste de produção de H2S. CITRATO: O teste do citrato de Simmons é indicado para determinar a capacidade de certas bactérias de utilizarem o citrato como única fonte de carbono para o seu metabolismo. SIM: Ágar Indol Sulfeto Motilidade (SIM) é um meio semissólido usado para diferenciar bacilos entéricos com base na produção de sulfeto, formação de indol e motilidade. URÉIA: Produção de uréase, meio de cultura utilizado principalmente na diferenciação das espécies de na identificação bioquímica de microrganismos em geral, principalmente para diferenciação de Proteus e outras espécies de bacilos gram- negativos entéricos. BILE esculina: Meio de cultura utilizado na identificação bioquímica de cocos gram-positivos. NOVOBIOCINA: Tem por finalidade verificar se o microrganismo é resistente à novobiocina. 3. COPROCULTURA E IDENTIFICAÇÃO DOS PRINCIPAIS AGENTES A. Descrever como é realizado o processamento da amostra B. Cite e descreva as provas bioquímicas realizadas A amostra foi inoculada em meios seletivos para bacilos gram-negativos e em caldo de tetrationato para inibir a microbiota intestinal, em seguida, uma alíquota da amostra deverá ser semeada nos meios específicos para identificação de enterobactérias: EMB: (ágar teague); é um meio para diferenciação ligeiramente seletivo utilizado para o isolamento e diferenciação de bacilos entéricos gram-negativos (Enterobacteriaceae e outros bastonetes gram-negativos) provenientes de amostras clínicas. SS: Meio diferencial seletivo utilizado no isolamento de bacilos entéricos patogênicos, especialmente os que pertencem ao gênero Salmonella. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 MACCONKEY: um meio de cultura destinado ao crescimento de bactérias gram- negativas e indicar a fermentação de lactose. Colônias bacterianas que fermentam lactose tornam o meio rosa choque e as bactérias que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo claro. Posteriormente as placas semeadas deverão ser incubadas em estufas bacteriológicas em 37ºC por 18 a 24 horas. Após o crescimento bacteriano, proceder a identificação das colônias através das provas bioquímicas. TSI: (Triple Sugar Iron); Finalidade: Meio diferencial utilizado no processo de bacilos gram-negativos (BGN) através das provas bioquímicas de testes de fermentação da glicose, lactose e sacarose e teste de produção de H2S. CITRATO: O teste do citrato de Simmons é indicado para determinar a capacidade de certas bactérias de utilizarem o citrato como única fonte de carbono para o seu metabolismo SIM: Ágar Indol Sulfeto Motilidade (SIM) é um meio semissólido usado para diferenciar bacilos entéricos com base na produção de sulfeto, formação de indol e motilidade. UREIA: Produção de uréase, meio de cultura utilizado principalmente na diferenciação das espécies de na identificação bioquímica de microrganismos em geral, principalmente para diferenciação de Proteus e outras espécies de bacilos Gram negativos entéricos. Posteriormente os tubos semeados deverão ser incubados em estufas bacteriológicas em 37ºC por 18 a 24 horas.
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