Contagem manual de leucócitos, eritrocitos e plaquetas

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Contagem manual de leucócitos 
- A contagem é realizada na câmera de Neubauer 
(hemocitômetro). 
PROCEDIMENTO: 
1- Pipetar 380 uL da solução diluente. (Turk) * 
2- Acrescentar 20 uL de sangue. (1:20) 
3- Colocar sobre a câmera de Neubauer uma 
lamínula especifica para a câmara. 
4- Introduzir a amostra (sangue+diluente) 
entre a lamínula e a câmara de Neubauer. 
5- Aguardar 1 minuto para os leucócitos 
depositarem. 
6- Realizar a contagem por microscopia óptica, 
utilizando objetiva de 10 ou 40, conforme 
necessidade. 
7- Contar os leucócitos posicionados nos 4 
quadrantes periféricos da Neubauer (ver 
imagem). 
8- O resultado da contagem será multiplicado 
por um fator, calculado de acordo com a 
diluição utilizada, sendo expresso por mm3. 
 
*SOLUÇÃO DILUENTE: 
Líquido de Turk → composto por: 
- 30 ml de ácido acético glacial 
- 1000mL de água destilada (q.s.p); 
- 2 gotas de solução a 1% de azul de 
metileno. 
 
 
 
 
- Adota-se um sentido único para contagem nos 
4 quadrantes. 
- Além disso, há 
critérios de exclusão 
para contagem. 
 
- Se contar uma célula 
em cima dos limites 
dos quadrantes, deve-
se deixar de contar 
uma célula no lado 
oposto. 
DILUIÇÕES: 
 
 
FÓRMULA: 
 
 Nº leucócitos = FM x leucócitos contados 
 
 
PC = profundidade da câmara (que é uma constante 
igual a 10). 
PD = proporção da diluição (este parâmetro varia com 
a diluição utilizada. Geralmente é de 1:20 ou 1:40). 
CC = campos contados ( = 4) 
FM=100 (geralmente) 
 
CUIDADOS: 
-Em acentuadas leucopenias, utiliza-se uma 
menor diluição a fim de concentrar mais os 
leucócitos para facilitar na contagem e 
confiabilidade dos resultados. 
- Em acentuadas leucocitoses, utiliza-se uma 
maior diluição para diluir os leucócitos e facilitar 
na contagem com maior confiabilidade dos 
resultados. 
 
VALORES DE REFERÊNCIA: 
 
 
Contagem manual de eritrócitos 
 - Determinação do número de eritrócitos por 
mm3 de sangue, a partir de contagem em um 
hemocitômetro. 
 
PROCEDIMENTO: 
- 3980 mL de líquido diluidor (líquido de Hayen)* 
- 20 uL de amostra (limpar cuidadosamente a 
parte externa da ponteira com papel 
absorvente). 
- Transferir a amostra para o tubo com o líquido 
diluidor, homogeneizando com a ponteira. 
(diluição 1:200) 
- Homogeneizar a amostra do tubo por inversão 
(cuidadosamente para não romper as hemácias). 
- Encher a câmara de contagem e realizar a 
contagem. 
 
*DILUENTES: 
- Líquido de Dacie: citrato trissódico 
- Líquido de Gower: sulfato de sódio 
- Líquido de Hayen: bicloreto de mercúrio 
 
CÁLCULO: 
 
Nº erit. total = nº de eritrócitos contados X 10.000 
 Volume X Diluição 
 
Volume: área X profundidade da câmara (0,2 
mm2 X 0,1 mm = 0,02 mm3) 
Diluição= 1:200 
Unidade de medida = mm3 
 
VALORES DE REFERÊNCIA (mm3) 
HOMENS 4.400.000 a 6.000.000 
MULHERES 3.900.000 a 5.400.000 
 
 
- A contagem é realizada em 1/5 do quadrante 
central (5 quadrados da extremidade e meio do 
quadrante central). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
- É um método impreciso devido ao grande 
número de eritrócitos em uma amostra e a 
grande diluição que é necessária. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Contagem manual de plaquetas 
 
➔ Técnica de Fônio 
- Conta-se as plaquetas em 5 campos com 200 
hemácias cada. 
 
PROCEDIMENTO: 
- Realização da punção venosa. 
- Confecção do estiraço sanguíneo. 
- Posicionar em um campo onde as hemácias 
estejam bem distribuídas, sem a presença de 
leucócitos. 
- Realizar a contagem das plaquetas em 
aproximadamente 1.000 hemácias (200 por 
campo). 
- Realizar o cálculo para estimar o número de 
plaquetas da amostra. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
- Pode dividir o campo em 4 quadrantes para 
facilitar a contagem. 
- Contar 5 campos com 200 hemácias cada. 
 
CÁLCULO: (109/L) 
 
Nº plaquetas ------------------------- 1000 hemácias 
Total de plaquetas ----------------- RBC