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Universidade Estadual de Feira de Santana Departamento de ciências biológicas BIO 172- Protistas e Heterótrofos- A Docente: Walter Ramos Pinto Cerqueira Discente: Larissa Menezes Brito Gomes Relatório prático: Cultivo de protistas Feira de Santana-BA, 2022 Resumo O reino protista é um reino bastante diversificado que engloba seres cuja suas características os excluem de outros reinos, neste trabalho foi realizado coletas em dois locais diferentes dentro do campus da Universidade Estadual de Feira de Santana (UEFS), a fim de observar esses seres. O material foi coletado em dois locais diferente: um foi na lagoa, coletando o substrato e os outros foram coletados o líquido que se encontrava entre as folhas de bromélias, logo após as coletas foram preparadas infusões e depois de uma semana começaram as observações e coletas de dados. Palavras- chave: Uefs, protistas, experimento prático. Introdução Segundo a classificação dos seres vivos em cinco reinos (Whittaker – 1969), um deles, o dos Protistas, agrupa organismos eucariontes, unicelulares, autótrofos e heterótrofos. Neste reino se colocam as algas inferiores: euglenófitas, pirrófitas (dinoflagelados) e crisófitas (diatomáceas), que são protistas autótrofos (fotossintetizantes). Os protozoários são protistas heterótrofos. Uma das principais características dos protistas é que a grande maioria são seres de vida livre, isso quer dizer que eles dependem apenas de material organico e inorganico presentes na água e no solo para viverem, podem ser parasitas (depender de um hospedeiro para sobreviver e se reproduzir) e séssil, se reproduzem de maneira sexuada, assexuada ou ambos. O reino protista engloba os protozoários e as algas tem também o mixomicetos que embora sejam semelhantes aos fungos são classificados como protistas. Estima-se que exista cerca de 20 mil espécies e que evoluíram a partir de algas unicelulares, costumam viver em locais com alta umidade e em ambientes aquáticos, sejam poças, lama, terra úmida e etc. Neste trabalho iremos observar de perto o surgimento desses protistas, bem como seu comportamento com o passar do tempo. Justificativa Esse trabalho visa trazer o conhecimento sobre protistas de uma maneira mais dinâmica , através da experimentação e visualização em laboratório, utilizando metodologias ativas para aprofundamento do conteúdo a ser aprendido. Walter R. Pinto Cerqueira Resumo ok Walter R. Pinto Cerqueira A justificativa tem que dialogar com o título do trabalho. Se o título fala de cultivo de protozóários, quais seriam as justificativas para se cultivar protozoários em laboratório? Quais as justificativas para dizer como o cultivo facilitaria uma aula didática? Walter R. Pinto Cerqueira Como o título do trabalho fala em "cultivo de protistas", na introdução teria que ter alguns parágrafos caracterizando como se dá o cultivo de protistas em laboratório (infusões) Objetivos Esse trabalho tem como objetivo o estudo dos protistas, a identificação dos espécimes ali encontrados, suas estruturas e locomoção, bem como a observação e a quantificação de dados e a promoção da percepção acerca dos protistas. Materiais e métodos Os materiais utilizados para o experimento foram: - 6 recipientes plásticos e transparentes - 6 pipetas - gazes - elásticos ou cordões - 1 ou 2 folhas de alface - 1,5l de água mineral - microscópio - Lâminas e lamínulas Metodologia Foram realizadas duas coletas dentro do campus da Universidade Estadual de Feira de Santana ( UEFS), com a turma de licenciatura em ciências biológicas da matéria BIO 172- Protistas e heterótrofos-A. A primeira coleta foi realizada numa pequena lagoa localizada em um local rico em vegetação, descendo a estrada entre o módulo 1 e o módulo 0, lá foram coletados o material com os próprios recipientes de coleta e buscamos coletar em diferentes áreas da lagoa, mais a fundo, mais perto da superfície a fim de obter um material bem rico e diversificado para as observações futuras. A segunda coleta ocorreu ao lado do módulo 1 na estrada lateral, onde encontramos bromélias, as bromélias são um gênero vegetal que possui mais de 3000 indivíduos que pertencem à família Bromeliaceae. Cada grupo teve que escolher três bromélias distintas para a coleta, com o auxílio da pipeta o líquido que se encontrava entre as folhas da bromélia, até ter uma quantidade ideal para prosseguimento do experimento e com muito cuidado pois tem bastante espinhos, é importante que o material coletado seja devidamente separado e etiquetado para que não haja mistura, ou seja, não pode haver material de duas ou mais bromélias dentro de um único recipiente, deverá ser devidamente separado. Walter R. Pinto Cerqueira objetivos ok Walter R. Pinto Cerqueira Metodologias de campo e de laboratório bem descritas - ok. Após as coletas, voltamos ao laboratório para preparar as infusões, adicionando água mineral nos seis recipientes com o material já coletado e o alface, foi utilizado cerca de 1 ou 1 ⅕ de alface em cada recipiente e depois foi devidamente fechado com gazes e elásticos afim que ventile e evite outros indivíduos como mosquitos que podem colocar ovos e contaminar as amostras. Ao fim foram armazenados em um local ventilado e fresco. Foi preciso esperar cerca de 7 dias para que fosse possível visualizar os protozoários nas infusões, então a partir da segunda semana que começou as 8 semanas de observações para acompanhar o desenvolvimento desses indivíduos ao longo do tempo. Uma semana após as coletas começou-se a montagem das lâminas para a observação das infusões, como uma pipeta pegamos um pouco do líquido as infusões e colocamos uma gota na lâmina, depois colocamos a lamínula em cima do líquido da lâmina e posicionamos no microscópio, regulando o foco e a luminosidade até conseguir observar de maneira clara o que ali está, esse processo foi repetido no mínimo seis vezes em algumas vezes foi preciso fazer mais de uma lâmina para a mesma infusão e a partir daí fomos identificando e nomeando os indivíduos que apareciam nas infusões, esse processo foi repetido por oito semanas. Resultados e discussão Após oito semanas de observações obtemos os seguintes dados da infusões da lagoa: 1ª semana 04/04/2022 - Na primeira amostra da lagoa não foi visualizar nada; - Na segunda amostra foram observados poucos paramecium pequenos - Na amostra 3 visualiza-se apenas um paramecium. Isso nos mostra que uma semana após a coleta e preparo de infusões já foi possível observar protistas em duas das três infusões, ou seja, começa aí um crescimento gradual desses indivíduos. 2ª semana 11/04/2022 - Na amostra 1 apareceu uma nematoda (metazoária) do reino animalia. - Na amostra 2 foi observada a quantidade de 30 paramecium (ciliados) - Na amostra 3 detectamos a presença de dinoflagelados ( alga protista fotossintetizante) e um copépodo ( microcrustáceo zooplâncton) Walter R. Pinto Cerqueira Os resultados estão bem apresentados e discutidos. Walter R. Pinto Cerqueira Não está seguindo as regras de nomenclatura zoológica, onde os protozoários se enquadram. A partir da segunda semana, já podemos ver um aumento na quantidade e na diversidade nas amostras da lagoa bem como o surgimento de espécies de outros reinos. 3ª semana 18/04/2022 - Na amostra 1 apareceram 30 colpidium (ciliados) - Na amostra 2 apareceram apenas 8 colpidium ( ciliados) - Na amostra 3 apareceram 30 paramecium e 8 colpidium ambos são ciliados. Na terceira semana já podemos notar uma diminuição da diversidade nessas infusões bem como o surgimento de um segundo ciliado o colpidium. 4ª semana 25/04/2022 - Na amostra 1 apareceram 30 paramecium ( ciliados) - Na amostra 2 apareceram apenas seis paramecium( ciliados) - Na amostra 3 apareceram quatro paramecium ( ciliados) Nessa semana a infusão estava bem seca, por conta do tempo houve a evaporação do líquido das infusões. notamos aqui que nessa semana que a variação da quantidade de indivíduos (paramecium) sempre é menor em cada amostra bem como o desaparecimento da diversidadede seres. 5ª semana 02/05/2022 Não houve observações esse dia, por conta de problemas particulares. 6ª semana 09/05/2022 - Na amostra 1 tivemos apenas 8 paramecium (ciliados) - Na amostra 2 tivemos menos paramecium (ciliados) apenas três - Na amostra 3 30 paramecium (ciliados) e uma oligochaeta (anelídeo) Nessa semana não houve muita variação com a semana anterior e vimos o aparecimento de oligochaeta que é um anelídeo. 7ª semana 16/05/2022 - Na amostra 1 contamos 14 paramecium ( ciliados) - Na amostra 2 contamos 30 paramecium (ciliados) e um copépodo (microcrustáceo zooplâncton) - Na amostra 3 não foi possível visualizar nada. Três semanas após repor a água da infusão, notamos novamente o crescimento da quantidade de ciliados e o aparecimento de um microcrustáceo zooplâncton. 8ª semana 23/05/2022 (última) - Na amostra 1 apareceram 3 nematodas (metazoário) e 30 paramecium (ciliados) - Na amostra 2 apareceram 30 paramecium (ciliados) e um copépodo (microcrustáceo zooplâncton) - Na amostra 3 apareceram apenas 2 paramecium (ciliados) Na última semana podemos ver um aumento da diversidade de seres nas amostras 1 e 2 já na terceira amostra não há pouquíssimos ciliados e nenhuma diversidade como nas outras duas amostras. Após todas as observações, tiramos as médias de todos os valores das quantidades de cada espécime que vimos e organizamos em uma tabela única: 1-Tabela das médias das quantidades de cada espécime visto nas três infusões da lagoa . Espécies semana 1 semana 2 semana 3 semana 4 semana 5 semana 6 semana 7 semana 8 Colpidium 0 0 15 0 0 0 0 0 Oligochaeta 0 0 0 0 0 0,3 0 0 Rotíferas 0 0 0 0 0 0 0 0 Stentor 0 0 0 0 0 0 0 0 Paramecium 1 10 10 13 0 14 15 21 Ostracoda 0 0 0 0 0 0 0 0 Nematoda 0 0,3 0 0 0 0 0 1 Copépodo 0 0,3 0 0 0 0 0,3 0,3 Dinoflagelado 0 0,3 0 0 0 0 0 0 Observação: os valores encontrados foram aproximados. Logo depois colocamos esses valores em gráfico para sintetizar os valores obtidos: Gráfico 1: média de espécimes visualizados nas infusões da lagoa Após oito semanas de observações obtemos os seguintes dados da infusões das três bromélias, lembrando que cada recipiente contém a amostra de uma bromélia diferente: 1ª semana 04/04/2022 - na primeira amostra da bromélia visualizamos apenas 1 paramecium (ciliado) - na segunda amostra foi observada 3 paramecium (ciliados) - Na amostra 3 visualiza-se apenas um colpidium (ciliado) Isso nos mostra que uma semana após a coleta e preparo de infusões já foi possível observar apenas ciliados nas três infusões. 2ª semana 11/04/2022 - Na amostra 1 apareceram uma ostracoda (microcrustáceo) - Na amostra 2 apareceram quatro rotíferas (metazoário) - Na amostra 3 detectamos a presença de três rotíferas (metazoário) Na semana 2 já vemos o surgimento de rotíferas em duas das três amostras e a presença também de um microcrustáceo a ostracoda e o desaparecimento do paramecium (ciliado), ou seja, uma certa variabilidade e desaparecimento de uma espécie. 3ª semana 18/04/2022 - Na amostra 1 apareceram 9 rotíferas ( metazoários), muitos stentors (ciliados heterotróficos) 30 e 7 colpidium (ciliados) - Na amostra 2 apareceram uma oligochaeta (anelídeo), e 30 paramecium (ciliados) - Na amostra 3 apareceram 30 paramecium (ciliados) e apenas 6 colpidium (ciliado) Na terceira semana já podemos notar um aumento da diversidade nessas infusões bem como o surgimento de um segundo ciliado o colpidium e o reaparecimento dos paramecium. 4ª semana 25/04/2022 - na amostra 1 apareceram uma ostracoda (microcrustáceo) - na amostra 2 apareceram apenas três paramecium( ciliados) e quatro rotíferas - ( metazoários) - na amostra 3 apareceram 7 paramecium (ciliados) e 7 rotíferas (metazoários) Nessa semana a infusão estava bem seca, por conta do tempo houve a evaporação do líquido das infusões. notamos aqui que nessa semana que a variação da quantidade de indivíduos diminuindo porém não totalmente e se mantém uma certa diversidade nas infusões com a presença de microcrustáceos, metazoários e ciliados. 5ª semana 02/05/2022 Não houve observações esse dia, por conta de problemas particulares. 6ª semana 09/05/2022 - Na amostra 1 tivemos apenas 5 rotíferas (metazoários) - Na amostra 2 tivemos menos rotíferas (metazoários) apenas dois - Na amostra 3 tivemos 30 rotíferas (metazoários) Nessa semana houve uma drástica diminuição da diversidade de espécies das infusões e uma grande variação na quantidade de metazoários nas mesmas. 7ª semana 16/05/2022 - Na amostra 1 apareceram 17 paramecium ( ciliados) e uma rotifera (metazoário) - Na amostra 2 apareceram 30 paramecium (ciliados) - Na amostra 3 sete rotíferas (metazoários) Três semanas após repor a água da infusão, notamos novamente o crescimento da quantidade de ciliados e a diminuição da quantidade de metazoários. 8ª semana 23/05/2022 (última) - Na amostra 1 apareceram 30 rotíferas (metazoários) - Na amostra 2 quatro rotíferas (metazoários) - Na amostra 3 também 4 rotíferas (metazoários) Na última observação nota-se a queda da diversidade das amostras da bromélia, o desaparecimento dos ciliados e a diminuição da quantidade de metazoários em duas das três amostras. Como feito com as amostras da lagoa também foram a medida da quantidade de cada espécime achado, depositamos em uma tabela e em gráfico para acompanhamento dos resultados. 2-Tabela das médias das quantidades de cada espécime visto nas três infusões das bromélias Espécies semana 1 semana 2 semana 3 semana 4 semana 5 semana 6 semana 7 semana 8 Colpidium 0,3 0 4 0 0 0 0 0 Oligochaeta 0 0 0,3 0 0 0 0 0 Rotíferas 0 2 3 4 0 12 3 13 Stentor 0 0 10 0 0 0 0 0 Paramecium 1 0 20 3 0 0 16 0 Ostracoda 0 0,3 0 0,3 0 0 0 0 Nematoda 0 0 0 0 0 0 0 0 Copépodo 0 0 0 0 0 0 0 0 Dinoflagelado 0 0 0 0 0 0 0 0 Observação: os valores encontrados foram aproximados. Discussão Com a visualização desses dados obtidos das infusões da lagoa e das bromélias, podemos observar que: - Nas amostras da lagoa na primeira semana apareceram uma pequena quantidade de ciliados em duas das três infusões, já nas amostras das bromélias já vimos uma diversidade maior, com o aparecimento de dois ciliados distintos embora em pequenas quantidades. - Na semana 2 na amostras da lagoa já se observa um crescimento substancial de ciliados e o aparecimento de outros seres como metazoários, algas e microcrustáceos, já nas bromélias não houve tanta diversidade no mesmo período, porém os ciliados desapareceram e os metazoários e a presença de um microcrustáceo. - Em ambas ocorreram a recorrência de espécies, ou seja, espécimes que desapareciam em uma semana e apareciam em outra ou simplesmente não apareceram mais. Walter R. Pinto Cerqueira Se o tópico anterior foi resultados e discussão esta discussão aqui está inclusa no tópico anterior, mesmo comparando as duas áreas não precisa criar um tópico novo. - A partir da terceira semana nas amostras da lagoa começou a haver uma diminuição na diversidade de seres que se encontravam nas infusões e o surgimento de um segundo ciliado, já nas amostras das bromélias houve um aumento da diversidade, o aparecimento de um segundo ciliado e o reaparecimento do paramecium. Ao longo das semanas ocorre uma notável variação da densidade desses indivíduos, ou seja, a quantidade que eles se encontram, diminui ou aumenta conforme o passar do tempo embora tenha diminuído mais que aumentado em ambas todas as amostras, só que esses aumentos vistos ocorreram em momentos diferentes, como indicados nos gráficos e tabelas apresentadas. Conclusão Nesse trabalho conseguimos através das observações conhecer e observar alguns espécimes: ciliados, metazoários, algas, microcrustáceos, anelídeos, nessa primeira conclusão já podemos ver que não foram vistos apenas protistas, embora seja o objetivo do trabalho, mas também vimos esses protistas convivendo com outros indivíduos de outros reinos e vivendo de maneira harmoniosa. Ao final vimos que houve as amostras da lagoa terminaram com uma diversidade de espécies e em quantidademaiores compradas com a primeira semana, já nas amostras das bromélias, terminaram apenas com uma espécie de metazoário mas em uma boa quantidade embora tenha havido uma diminuição tanto na diversidade quanto na quantidade desses indivíduos. Esse fenômeno se ocorre pelo fato da alface que foi utilizada ali como alimento nas infusões ter acabado é por conta disso algumas espécies acabaram sumindo e a população das remanescentes diminuiu devido a escassez do alimento . Não houve problemas significativos para excussão do trabalho, foi um trabalho muito positivo que cumpriu com seus objetivos e trouxe muito conhecimento acerca dos protistas e de outros seres de outros reinos e também reforçou procedimentos e manuseios e protocolos de equipamentos de laboratório bem como o conhecimento deles e suas funções. Walter R. Pinto Cerqueira Conclusões ok. Gostei bastante da forma como você raciocinou em cima dos dados. Parabéns! Referências CULTURA de Protozoários.educador.brasil escola.uol.com.br, [s.d]. Disponível em: https://educador.brasilescola.uol.com.br/estrategias-ensino/cultura-protozoarios. Acesso em: 27/06/2022 SANTANA, Cristiana.Trabalhando O REINO PROTISTA EM TURMA DE FORMAÇÃO DE PROFESSORES EM BIOLOGIA DO PROGRAMA PROESP. Revista gestão universitária , http://www.gestaouniversitaria.com.br/, volume único ,1, p. única ,10/09/2018. Resumo completo com tudo o que precisa para conhecer os protistas. https://beduka.com/,2020. Disponível em: https://beduka.com/blog/materias/biologia/reino-protista/. Acesso em: 25/06/2022
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