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Bactérias Archaea Eucariotas Fungos Procariotas Organismos do solo Colêmbolas Besouros Centípedes Moluscos Formigas Minhocas Crustáceos Ácaros Nematoides Fungos Bactérias Nematoides Dimensões http://www.landcareresearch.co.nz/research/biodiversity/invertebratesprog/invertid/list_category.asp?Ca_ID=19 http://www.landcareresearch.co.nz/research/biodiversity/invertebratesprog/invertid/list_category.asp?Ca_ID=18 Componentes da matéria orgânica do solo Matéria orgânica Lábil 70-90 % Húmus estável 7-21% Solo Partículas minerais 95-99% Organismos Algas Protozoários Nematóides Fungos 50% Fauna 10% 10% Bactérias Actinomicetos 30% 7-10 Mg.ha-1.ano-1 Floresta tropical 15-16 Mg.ha-1.ano-1 Pastagem 1-15 Mg.ha-1.ano-1 Cultura anual Em solução NH4 + NO3 - Ca + K+ PO3 - Mg Na atmosfera CO2 N2O CH4 NOx Serapilheira ou palhada produzidas anualmente Organismos do solo No solo Humus Qual o destino da matéria orgânica que chega ao solo ? Resíduos orgânicos: 100 g 60-80 g CO2 Biomassa (organismos do solo) Substâncias não húmicas Compostos húmicos complexos Húmus (15-35 g) 3-8 g 3-8 g 10-30 g Balanço do carbono nos ecossistemas PPLíquida = PPBruta – Respiração Recossistema = Rplantas + Rheterotrófica (50%) (50%) Rheterotrófica = Rmicrobiana + Ranimal (90%) (10%) Participação dos componentes da biota na ciclagem do C do solo O que é biodiversidade ??? “...diversidade (número ou abundância) de organismos vivos em determinada área ou região...” biota do solo ↔ biodiversidade do solo A biodiversidade compreende todas as variações biológicas, desde o gene (espécie), até a comunidade, o ecossistema e o bioma. http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=dINBGY04wx16vM&tbnid=sVqCaC0uOtclyM:&ved=&url=http%3A%2F%2Fwww.ecoturismoaventura.com.br%2Fbrasil%2Fbiomas.htm&ei=t504UYWpKoeQ9gSfg4CoBg&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNEpmqsUon75BDx-5Zb5O74u8CciGA&ust=1362751288011591 Os solos são o habitat de grande parte da biodiversidade SOLO → + de ¼ da biodiversidade global Grupo Organismo Conhecidos % conhecidos Plantas Plantas vasculares 270.000 84 Macro-fauna Minhocas 3.500 50 Meso-fauna Ácaros 45.231 4 Colêmbolas 7.617 15 Micro-fauna Protozoários 1.500 7.5 Nematóides 25.000 1.3 Microorganismos Bactérias 10.000 1 Fungos 72.000 1 Espécies marinhas Todas 230.000 30 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=usVnDsku-DLt1M&tbnid=VgPLv7yZwm7iSM:&ved=&url=http%3A%2F%2Fwww.guiageo-mapas.com%2Fglobos.htm&ei=uaA4UfnEI4Ws9AS264CIBA&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNGqwfqwaotNcXutHJbRuIK5_n4iEA&ust=1362752057920951 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=7obxok_6-m6rsM&tbnid=sRcntDa1veAc9M:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.yardcare.com%2Frestore%2Frestoring-a-tired-lawn%2Fgetting-a-soil-test%2F&ei=naE4UYWvAoS69QT2yoHgCw&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNGwyfL8xeCHO3vCKn9H-1GHAIAo6g&ust=1362752257777278 A biota do solo pode ser dividia em três grandes grupos funcionais Engenheiros químicos: principalmente micro-organismos, responsáveis pela decomposição de matéria orgânica vegetal em nutrientes prontamente disponíveis para plantas e animais http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=E25bty2T9peS3M&tbnid=ZNFnmrV_9oVBsM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fpiremongolia.wordpress.com%2F2011%2F07%2F05%2Fdont-treat-my-soil-like-dirt%2F&ei=O_E5Ubm8IYzW8gSqr4GoBA&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNG0c3cF90rNGpsNRm7xpjNLqwpzkQ&ust=1362837728206144 Reguladores biológicos: ampla variedade de pequenos invertebrados como nematóides, ácaros, colêmbolas e equitreídeos que predam plantas, outros invertebrados e microorganismos, regulando sua dinâmica no espaço e tempo. http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=UnKnFU2IjJk1dM&tbnid=FRyqLz4YFI6UpM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.agencia.cnptia.embrapa.br%2Fgestor%2Fsistema_plantio_direto%2Farvore%2FCONT000fwuzxobq02wyiv807fiqu95qsd16v.html&ei=NfM5UYfJKoaQ9gS-mYDYAw&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNGYuny3kjpNy9U_n3mJO6NO4wuIUQ&ust=1362838648590137 Engenheiros do ecossistema: minhocas, formigas, cupins modificam ou criam habitats para organismos menores, construindo agregados resistentes, poros e galerias. http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=MgPvnkhH5W1xtM&tbnid=dqgptZli33oYBM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.trufamania.com%2FIstria-truffles.htm&ei=1PY5UfqzN4rM9AS4xIDYDw&psig=AFQjCNGcUzmsEzePdR5yU6EKFQBMqH031Q&ust=1362839590729489 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=ubrFIFLdcbxe-M&tbnid=83E3uu7XK0YAWM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fasnovidades.com.br%2Fcupim-praga-resistente-fotos%2F&ei=Bfk5Ue7RIIfI9gTM_4HACQ&psig=AFQjCNFveknDMSSgNVmA7RYozvE0xcFZ_g&ust=1362840190865345 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=ubrFIFLdcbxe-M&tbnid=83E3uu7XK0YAWM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fasnovidades.com.br%2Fcupim-praga-resistente-fotos%2F&ei=Bfk5Ue7RIIfI9gTM_4HACQ&psig=AFQjCNFveknDMSSgNVmA7RYozvE0xcFZ_g&ust=1362840190865345 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=B58p7LZAXQDEMM&tbnid=g2NBUFCzKsy5TM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.flickr.com%2Fphotos%2Fameliaberti%2F5566444576%2F&ei=jvk5UajnLYv88QTop4HgCw&psig=AFQjCNFveknDMSSgNVmA7RYozvE0xcFZ_g&ust=1362840190865345 Representação esquemática de redundância funcional Cada elipse representa uma série de funções que podem ser exercidas por uma parte de dada comunidade do solo (espécie ou grupo de organismos). Pode haver sobreposição de funções. Se uma parte da comunidade é removida, desaparecem funções exercidas por ela. Entretanto, devido à sobreposição de funções exercidas por comunidade diferentes, nem todas as funções são perdidas. Isto se denomina “redundância funcional”. Representação esquemática de diferentes níveis de redundância funcional para diferentes exemplos de funções do ecossistema Alto nível de redundância funcional Ex: Decomposição de algumas formas de matéria orgânica do solo por muitas espécies de invertebrados, fungos e bactérias Nível médio de redundância funcional Ex: Fixação de nitrogênio por cyano- bactérias, actinomicetos e Rhizobium Sem redundância funcional A perda dessa parte da comunidade significa a perda completa dessa função. Ex: Quebra de alguns compostos altamente recalcitrantes Serviços dos ecossistemas prestados pela biodiversidade do solo Suporte Decomposição Ciclagem nutrientes Formação do solo Produção primária Ciclagem da água Provisionamento Alimento Água potável Combustível Madeira, fibras Recursos genéticos Remédios, farmacêuticos Regulagem Regulagem do clima Regulagem da água Regulagem de doenças Regulagem de pragas Purificação da água Regulagem da erosão Regulagem qualidade do ar Cultural Estético Espiritual Educacional Recreativo http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=0q1nDlzqDVblHM&tbnid=ltlfBjNCJJLfDM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fecoconception.oree.org%2FEN%2Fpartners.html&ei=UBZCUcbEOMn-qwHml4HYBg&psig=AFQjCNFyLkklCpUyrdzaeO3JhbpO88i95Q&ust=1363371942025318 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=f0VhIgWTIWM7lM&tbnid=q5XL_PNGe2rpRM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Ffr.democraticbelarus.eu%2Feucommissionandbelarus&ei=2xZCUdiRKoysqQHZsoGIDA&psig=AFQjCNFfgxibGc2cqfG-h9NpFcrH29EVtg&ust=1363372086955776 Serviços prestados pela biodiversidade do solo Estrutura, matéria orgânica e fertilidade do soloOs três grupos funcionais estão envolvidos na formação e decomposição da matéria orgânica, contribuindo com a estruturação do solo. Folhas fragmentadas por cupins Fragmentos vegetais no tubo digestivo de enquitreideos A glomalina contribui para estabilidade dos agregados ao serem excretadas pelas hifas fúngicas. Ligam-se às argilas por pontes catiônicas de ferro Humus, principal responsável pela qualidade e fertilidade dos solos, somente pode ser produzido pela diversidade dos organismos do solo. Não pode ser produzido pelo homem Vegetação 470-655 Solo (100 cm) 1500-2000 Atmosfera 752 Solo (0-30 cm) ~800 Pg C (109 t = 1 Pg) Reservatório de C formado diretamente pela biota e matéria orgânica do solo. Todos os anos os organismos do solo processam 25 Mg de matéria orgânica por área equivalente a um campo de futebol. Regulagem do fluxo de carbono e controle do clima A perda de diversidade reduz a capacidade do solo de regular a composição da atmosfera, assim como seu papel de mitigar o aquecimento global. Regulagem do fluxo de água Engenheiros dos ecossistemas afetam a infiltração e distribuição de água no solo através da criação de agregados e espaços porosos. Afeta indiretamente a infiltração através de ação sobre a composição e estrutura da vegetação, camada de liteira e padrão de enraizamento. Observou-se que a eliminação da população de minhocas por contaminação química reduziu a infiltração de água em até 93%. Perda/redução desse serviço reduz a qualidade e quantidade de água do solo, enquanto que nutrientes e contaminantes não são mais degradados ou neutralizados. Descontaminação e bioremediação Engenheiros químicos têm papel chave na bioremediação, acumulando poluentes em seu corpo, degradando-os em moléculas menores não tóxicas, ou mesmo modificando-os em moléculas úteis. Material DES contaminado ORGANISMOS & BIOCATALIZADORES (bactérias, fungos, plantas, enzimas) Material contaminado Mineralização (CO2, H2O, NO3 -, Cl-) Humificação Princípio da eliminação biológica de poluentes orgânicos Bioremediação microbiológica é uma opção de baixo custo, capaz de destruir ampla variedade de poluentes sem deixar resíduos tóxicos. A população microbiana se autorregula. Diminuindo a concentração do contaminante, o mesmo ocorre com a comunidade microbiana. A perda da biodiversiade do solo reduz a disponibilidade de microorganismos capazes de bioremediação. Exemplo de bioremediação de uma mancha de óleo por cepas de fungos do solo Trametes versicolor e Pleurotus ostreatus (a) Devido a natureza porosa do solo não seria possível remover a mancha de óleo sem afetar uma grande porção do solo, o qual então deveria ser tratado como material contaminado. Devido a natureza tóxica do óleo bruto é pouco provável que plantas pudessem crescer em solo nessas condições. (b) Quatorze dias após a inoculação de uma combinação de cepas de Trametes versicolor e Pleurotus ostreatus. As hifas dos fungos crescem tão abundantes sobre a mancha de óleo que são claramente visíveis. (c) Após 49 dias a mancha de óleo praticamente se foi, assim como os fungos, cujas hifas não são mais visíveis. Controle de pragas Controle biológico eficiente de pragas evita o uso de métodos químicos, como pesticidas, que têm alto custo econômico e ecológico. Solos com maior biodiversidade, naturalmente têm maior probabilidade de abrigar um inimigo natural da praga em questão. Exemplo: Substituição do brometo de metila (BM), substância nociva à camada de ozônio, por métodos alternativos de controle de patógenos, ervas daninhas e outros problemas de replantio. Alternativas não químicas: biofumigação, biosolarização, cultivo mínimo, rotação de culturas, variedades resistentes, enxertia http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=REFudC9jrMColM&tbnid=Vy8IXmZ1XW1laM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.gardentownsuites.com%2Fnatural-and-safe-biological-pest-control%2F&ei=t2o_UY7SHYPq8QTYuoDoBw&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNFpz3uVKau0e9FERWZpxUfaoxSoeQ&ust=1363196814666908 Biocontrole de pragas Consiste no uso de inimigos naturais como agentes de controle biológico como predadores, parasitas ou patógenos. Sua ação geralmente pode ser classificada em três categorias: Conservação: quando se cuida para que agentes de controle biológico natural não sejam erradicados por outros processos de controle de pragas. Controle biológico clássico: quando um agente de controle biológico é introduzido em uma área visando o controle de uma espécie de praga. Aumento: quando envolve a liberação suplementar de um agente de controle de praga. Um exemplo é o uso de nematóides entomopatogênicos, liberados em taxas de milhões ou bilhões por hectare, para o controle de certas pragas de insetos. Exemplo de controle biológico do patógeno de plantas Botrytis cinerea Controle CaCl2 Fungicida Biocontrole Trichoderma hamatum Claramente o biocontrole apresentou os melhores resultados Saúde humana Organismos do solo são importante fonte de recursos químicos e genéticos para o desenvolvimento de novos fármacos. Penicillium notatum Fungo do solo isolado por Alexandre Fleming em 1928 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=_bUFn8LQJeseEM&tbnid=qxgJNSgRkCsbFM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.ciriscience.org%2Fph_81-Mold_conidiophores_and_conidia_of_Penicillium_notatum_Copyright_Dennis_Kunkel_Microscopy&ei=k4o_Ucr1L5LK9QTxk4CgDg&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNHtYipYXprRq_yh5YjGjqzKcRTJvg&ust=1363204985175164 “Neste local foram obtidas em janeiro de 1965 as amostras de solo que permitiram obter a rapamicina, substância que inaugurou uma nova era para os pacientes submetidos a transplantes de órgãos” Homenagem dos investigadores brasileiros Novembro de 2000 Um presente do solo da Ilha de Páscoa A rapamicina foi desenvolvida inicialmente como agente antifúngico, porem muitas outras importantes propriedades foram sendo descobertas: - Imunossupressor para prevenir rejeição de órgãos transplantados; - Efeito anti-proliferativo. Potencial tratamento para o câncer. - Habilidade para estender a vida em ao menos 15% em ratos. Quais são as principais causas de perda da biodiversidade do solo? • Agricultura e exploração antropogênica intensiva • Diminuição da matéria orgânica do solo • Mudança de uso da terra e destruição de habitats • Erosão do solo • Impermeabilização do solo • Poluição do solo • Compactação do solo • Fragmentação de habitats • Mudanças climáticas • Organismos geneticamente modificados • Salinização • Fogo • Desertificação Principais ameaças à biodiversidade do solo Degradação do solo CAUSAS EFEITOS Práticas agrícolas inapropriadas Perda de matéria orgânica Excesso de pastejo Erosão Desmatamento Fogo Salinização Inativa ou mata a biota do solo Compactação Reduz a ação dos engenheiros dos ecossistema levando a mais compactação Impermeabilização urbana Corta a entrada de água e matéria orgânica para os organismos do solo Manejo do solo Diminui com a intensificação do manejo (uso de pesticidas, fertilizantes, maquinário pesado) Aumenta com compostagem, cobertura morta, rotação de culturas, que melhoram a estrutura do solo, transferência de água e estocagem de carbono Photos Copersucar ® et Arbex (2001) O caso da colheita da cana-de-açúcar Colheita manual, com queima da palhada Colheita mecanizada, sem queima da palhada 8 Cana-de-açúcar Colheita manual (queimada) 3 8 53 ~ 50 anos 72 ± 3 ind. m-2 Exemplo de resultados: abundancia e diversidade 136 8 8 298 189 147 4 anos 786 ± 101 ind. m-2 Cana-de-açúcar Colheita mecanizada(sem queima) Mata nativa Minhocas Myriapodes Arachnides Formigas Larvas de Coleoptera Outros 566 ± 149 ind. m-2 80 3 19 203 120 141 Efeito de diversas práticas de manejo adotadas em agroecossistemas na população e diversidade de minhocas De acordo com Brown et al. 2010 http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=rpQ53Vra5ukqeM&tbnid=gGpiyhIe9RQEqM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fparquecientec.blogspot.com%2F2012%2F02%2Fminhocas-os-arados-de-terra.html&ei=ltdBUYzAHYec9gSy1ICYDA&bvm=bv.43287494,d.eWU&psig=AFQjCNFw4Y5uGKIUXtZaomDAj10BiFEBVQ&ust=1363355920081592 Potenciais soluções Esquemas de monitoramento e indicadores da biodiversidade do solo O risco de perda de diversidade do solo requer o desenvolvimento de indicadores confiáveis para que programas de monitoramento possam ser instituídos. Os indicadores devem ser significativo, padronizado e fácil de medir. Até o momento, não existe um indicador que combine todos os aspectos da complexidade do solo em uma única fórmula que permita comparações precisas. A falta de conscientização da sociedade sobre a importância da biodiversidade do solo agrava o problema. Os custos de um programa de monitoramento também são um entrave para a ampliação dos programas de monitoramento. Políticas relacionadas à biodiversidade do solo Não existe no momento legislação específica sobre a biodiversidade do solo em nenhuma instancia. Quantificação dos organismos do solo MACROFAUNA MICRORGANISMOS MESOFAUNA 3 m Monolito macrofauna 12 tradagens para cada profundidade (0-10, 10-20, 20-30 cm) 3 m 3 m 3 m 3 m 2 m 1m3 liteira (Winkler) Pitfall armadilha Esquema de amostragem dos organismos do solo Monolito macrofauna Extração Monolito macrofauna Extração Monolito macrofauna Separando a macrofauna Monolito macrofauna Separando a macrofauna Monolito macrofauna Identificando a macrofauna Monolito macrofauna Identificando a macrofauna Monolito macrofauna Identificando a macrofauna Separando a fauna da liteira em coletores de Winkler 3 m Monolito macrofauna 12 tradagens para cada profundidade (0-10, 10-20, 20-30 cm) 3 m 3 m 3 m 3 m 2 m 1m3 liteira (Winkler) Armadilha Pitfall Plano de amostragem da biota do solo Extração das amostras Tradagens Homogenização das amostras Tradagens Homogenização das amostras Tradagens Amostras de solo homogêneas Mesofauna Ácaros Microfauna Nematóides Biomassa microbiana Diversidade microbiana 12 tradagens para cada profundidade (0-10, 10-20, 20-30 cm) Extrator modificado de Berlese-Tullgren Mesofauna Ácaros Lâmpadas Amostras Etanol 70% Mesofauna Ácaros Identificando Ácaros Amostras de solo homogêneas Mesofauna Ácaros Microfauna Nematóides Biomassa microbiana Diversidade microbiana 12 tradagens para cada profundidade (0-10, 10-20, 20-30 cm) Extração Microfauna Nematóides http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=nematods+soil+extraction&source=images&cd=&cad=rja&docid=wuU4LPN3n6mXFM&tbnid=fXCr7nmpvdcT4M:&ved=0CAUQjRw&url=http://www.ipm.iastate.edu/ipm/icm/2006/9-18/scn.html&ei=RvMTUZvEDoOzqQHl_4D4Dw&bvm=bv.42080656,d.dmQ&psig=AFQjCNFU0GEAPkbcbTsykzOtsAvT0UXIvQ&ust=1360348205938444 Identificação de Nematóides http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=nematoides+sob+lupa&source=images&cd=&cad=rja&docid=MGzJ-hGStrZfsM&tbnid=CbBtbF9gZTVfiM:&ved=0CAUQjRw&url=http://labbioeducacaoambiental.blogspot.com/2011/04/pratica-04-parte-2-observacao.html&ei=1_kTUZfcOsyAqQH_pYCIBw&bvm=bv.42080656,d.dmQ&psig=AFQjCNELiEUa__hixU5d390Mh-gi7cLfwA&ust=1360349288650191 Amostras de solo homogêneas Mesofauna Ácaros Microfauna Nematóides Biomassa microbiana Diversidade microbiana 12 tradagens para cada profundidade (0-10, 10-20, 20-30 cm) Possíveis métodos de análise dos microorganismos do solo Biomassa microbiana Diversidade microbiana Observação direta e contagem - microscopia Testes funcionais - análises enzimáticas - perfil de utilização de fontes de C - análise de proteínas - ensaios com genes funcionais Testes taxonômicos - análises dos fosfolipídeos (PLFA) - clonagem - técnicas moleculares Métodos microscópicos Suspensão de solo Plataforma com grade Lâmina de vidro Contagem direta Observações: - Aplicável a pequenas amostras - Imagens dos microrganismos “in situ” - Estudos da distribuição dos microrganismos no solo Óptica Fluorescência Eletrônica Tipos de microscopia Número mais provável (NMP) Série de diluições Suspensão microbiana diluída 0,1 ml colocados sobre substrato Distribuição Crescimento, contagem/identificação - Microrganismos cultiváveis representam somente 1-10% das bactérias e 5-15% dos fungos do solo; - Não existe meio de cultura universal ou “não seletivo Observações: • Fungos crescem melhor em meios com C:N alta e pH neutro; • Bactérias crescem melhor em meios com C:N média e pH baixo; • Esporos de fungos comuns, como Aspergillus, Mucor e Penicillium crescem rapidamente e inibem o crescimento de fungos de crescimento mais lento; • Muitas bactérias e fungos produzem antibióticos que inibem o crescimento de outros organismos; Análises químicas. Métodos biocidas Morte da biomassa microbiana presente Quantificação de elementos imobilizados nas células Fumigação Autoclavagem Irradiação (1,0-2,5 Mrad) Métodos químicos diversos Uso de equipamentos Microondas (800 J g-1 solo) Bomba de vácuo Dessecador Vapor de CHCl3 BM = (Fumigada ) - (Controle ) k eficiência da extração QUANTIFICAÇÃO DO ELEMENTO EXTRAÍDO QUANTIFICAÇÃO DO ELEMENTO EXTRAÍDO > > Elementos C, N, P e S Quantificação da biomassa microbiana Método da fumigação-extração (Vance et al., 1987) Defumigação EXTRAÇÃO EXTRAÇÃO K2SO4 0,5 M Quantificação dos elementos extraídos • Digestão micro-Kjeldhal Carbono • Digestão por dicromato de potássio (K2Cr2O7 66,7 mM) • Autoanalisador de carbono • Analisador TOC (Wu et al. 1990. Soil Biol.Biochem. 22:1167-1169) • Compostos na faixa de absorbância ultravioleta (280 nm) (Nunan et al. 1998. Soil Biol.Biochem. 30:1599-1603) Nitrogênio • Autoanalisador de nitrogênio Aplicação da estimativa da biomassa microbiana Indicador da qualidade do solo Solo de qualidade é biologicamente ativo e contém variedade estável de microrganismos Apresenta rápida resposta à interferências externas Reflete o funcionamento do ecossistema Metodologia fácil e barata Distribuição universal Índices eco-fisiológicos qCO2 Cmicr:Corg 2.0 - 4.4% 0.5 - 2.0 ng C-CO2 g Cmicr-1 h-1 valores críticos Relação Cmicrobiano : Corgânico Disponibilidade de C para o crescimento da população Quociente metabólico qCO2 (ug C-CO2 g Cmicr -1 h-1 ) Demanda de energia necessária para a manutenção da população Análises químicas. Moléculas características Phospholipid fatty acids (PLFA) H2O Fosfato Glicerol Ácidos graxos São componentes essenciais de todas células vivas • grande diversidade estrutural, especificidade biológica Indicam a biomassa microbiana viva e, possivelmente, ativa • o grupo fosfato é consumido rapidamente quando o organismo morre • não são encontrados em produtos de armazenamento • presentes em proporções relativamente constantes na biomassa Alterações no padrão do PLFA Alterações na comunidade microbiana Alterações em PLFAs específicos Alterações em grupos específicos Porque fosfolipídeos ? Ácido graxo Grupo microbiano 15:0i, 17:0i, 15:0a, etc.. Gram positive bacteria cy17:0, cy19:0, 18:1D11c Gram negative bacteria (also cy19:0 gm+) 10 Me18:0, 10 Me17:0, 10 Me16:0 Actinomycetes 18:2w6,9, 18:1w9c Fungi 20:4 w6 Protozoan16:1 w5 Arbuscular mycorrhizal fungi 18:1w8c Methanotrophs min 14 16 18 20 22 24 26 28 30 pA 20 40 60 80 100 120 FID1 A, (C:\DOCUME~1\JENN\MYDOCU~1\RESEARCH\GC-FID~1\08120312.D) 15:0i 16:0 19:0 cy 18:2 w6,9 18:1 w9c 18:1 w7c 15:0a 14:0 16:0 10 Me 1 2 .9 9 0 1 3 .1 6 1 1 3 .3 8 7 1 3 .6 1 8 1 3 .7 2 6 1 3 .8 9 9 1 4 .1 3 1 1 4 .4 8 0 1 4 .7 3 9 1 5 .0 0 9 1 5 .1 7 4 1 5 .4 1 8 1 5 .5 8 1 1 5 .6 7 7 1 5 .8 2 3 1 5 .9 2 6 1 6 .1 4 6 1 6 .4 9 2 1 6 .8 8 4 1 7 .0 0 3 1 7 .2 9 2 1 7 .3 9 9 1 7 .6 2 2 1 7 .7 3 6 1 7 .9 1 0 1 8 .1 2 7 1 8 .3 1 8 1 8 .5 6 9 1 8 .9 5 1 1 9 .0 9 3 1 9 .1 9 2 1 9 .3 1 7 1 9 .4 8 3 1 9 .6 2 3 1 9 .7 6 4 1 9 .9 0 1 2 0 .0 0 6 2 0 .0 7 6 2 0 .3 7 2 2 0 .4 6 8 2 0 .7 6 8 2 1 .0 6 2 2 1 .1 8 5 2 1 .3 1 1 2 1 .4 1 6 2 1 .5 1 3 2 1 .6 7 1 2 1 .8 3 8 2 1 .9 7 2 2 2 .3 6 5 2 2 .5 3 5 2 2 .8 0 4 2 2 .9 3 3 2 3 .1 4 1 2 3 .3 0 8 2 3 .4 0 8 2 3 .5 9 0 2 3 .6 8 6 2 3 .8 9 2 2 4 .0 4 9 2 4 .1 9 9 2 4 .3 2 1 2 4 .4 2 3 2 4 .4 9 6 2 4 .6 0 3 2 4 .8 7 2 2 5 .1 5 1 2 5 .2 8 9 2 5 .5 4 5 2 5 .7 5 1 2 5 .9 7 5 2 6 .1 7 1 2 6 .2 7 2 2 6 .3 6 1 2 6 .4 8 0 2 6 .6 8 9 2 6 .9 1 3 2 7 .0 6 4 2 7 .2 4 7 2 7 .3 5 9 2 7 .4 6 5 2 7 .5 9 4 2 7 .8 9 5 2 8 .0 5 2 2 8 .2 2 8 2 8 .4 9 0 2 8 .6 5 9 2 8 .8 3 7 2 8 .9 4 1 2 9 .0 3 5 2 9 .1 3 1 2 9 .3 7 6 2 9 .6 0 9 2 9 .8 6 3 18:0 10 Me Cromatograma típico A formação da côr púrpura ocorre quando os microrganismos utilizam a fonte de C e começam a respirar. A respiração das células reduz o corante tetrazolium, incorporado no substrato. Consumo de substrato Placas BiologTM Consumo de substrato Catabolic Response Profile (CRP) Medida da resposta respiratória à adição de substrato Adição dos substratos às amostras de solo Incubação de 4 horas CO2 CO2 CO2 CO2 Quantificação da concentração de CO2 • Infra-red gas analyser (IRGA) • Cromatografia gasosa 21 susbstratos: 2 aminas 3 carbohidratos 6 amino-ácidos 8 ácidos carboxílicos 1 aromático 1 polímero CO2 Vantagens: • Incubações curtas (4 horas); • Microrganismos não são extraídos do solo; • Inclui a resposta de todos os organismos; • Os substratos adicionados podem ser alterados Desvantagens: Método trabalhoso; Estrutura original do solo é alterada Capoeira Cultivado Biologia molecular Análise do DNA extraído do solo Identificação da seqüência de genes que confere as características desejadas e a estocagem de C no solo Extração do DNA dos organismos contidos na amostra de solo Amplificação da seqüência alvo de genes via PCR e marcação com corante fluorescente Análise da diversidade de microrganismos contendo os genes alvo. Quanto mais cópias, maior o potencial de estocagem de carbono http://eusoils.jrc.ec.europa.eu/library/maps/Biodiversity_Atlas/download/1.pdf http://eurosoils.jrc.ec.europa.eu/awareness/Inventory.cfm http://www.soil-net.com/ http://ec.europa.eu/environment/index_en.htm http://eurosoils.jrc.ec.europa.eu/awareness/Inventory.cfm http://www.soil-net.com/ http://www.soil-net.com/ http://www.soil-net.com/
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