Papanicolau: Pré-requisitos e Passos

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Papanicolau
Pré-requisitos
- Preservação da morfologia celular 
- Retenção de certos elementos citoquímicos que são essenciais na etapa de coloração
Passos
1. Fixação
- Características: penetração rápida na célula, minimização da retração e distorção celular, preservação da morfologia celular, tornar as membranas mais permeáveis aos corantes, ter afinidades específicas para diversas estruturas celulares e facilitar a adesão celular à membrana
- Tipos de fixadores:
· Seco: colorações hematológicas e álcool e polietilenoglicol - película que permite o armazenamento de 1 semana, pode gerar retração celular exagerada, resultando em condensação da cromatina e perda dos detalhes nucleares
· Úmido: imersão imediata do esfregaço na solução fixadora até o momento do processamento da amostra
2. Coloração
- Fases da coloração: hidratação (imersão em álcool em concentrações decrescentes até a água destilada) coloração nuclear (corante aquoso – hematoxilina de Harris) desidratação (imersão em álcool em concentrações crescentes) coloração do citoplasma (corante alcoólico – Orange G e EA-65) desidratação, clarificação e selagem (imersão em álcool em concentrações crescentes, clarificação e selagem com meios permanentes hidrofóbicos)
- Corantes: 
· Hematoxilina - corante nuclear – leucócitos e células endometriais: óxido de mercúrio oxidação hemateína (cora o núcleo em azul)
· Orange G - corante de hemácias, grânulos dos eosinófilos e queratina
· EA (EOSINA, VERDE LUZ OU VERDE BRILHANTE E PARDO DE BISMARCK) – corante de metaplásicas em verde ou rosa
* Eosina (corante ácido) - cora o citoplasma em rosa das células superficiais e nucléolos
* Verde brilhante (corante ácido) – cora em verde/ azul as células metabolicamente ativas (parabasais, intermediárias, colunares e histiócitos)
- Coloração:
3. Montagem
- Capela
- Bálsamo do Canadá
- Lamínula
4. Leitura
- Microscópio óptico
- Óleo de imersão