Resumo de citologia - coloração papanicolau

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COLORAÇÃO PAPANICOLAU 
→ Possuem corantes e tem um corante que tem mais de 1 pigmento. 
Fixação: 
- Pode ser seco ou úmido; 
- Para a interpretação citopatológica adequada é necessária a preservação da morfologia 
celular desde a coleta até o processamento, pois acontecem reações para poder corar; 
OBS: TENTAR MANTER A CÉLULA COM AS CARACTERÍSTICAS O MAIS PRÓXIMO POSSÍVEL DO 
QUE ELA ERA NO EPITÉLIO. 
- Preservar características citomorfológicas e reter certos elementos citoquímicos que são 
essenciais para a coloração. 
Bom fixador: 
- Penetrar rapidamente na célula; 
- Minimizar a retração e distorção celular; 
OBS: HAVERIA ESSA RETRAÇÃO SE NÃO HOUVESSE A FIXAÇÃO. 
- Preservar a morfologia da célula; 
- Tornar as membranas mais permeáveis ao corante (tem que entrar e sair); 
OBS: SE O NÚCLEO FICA MUITO ESCURO, SIGNIFICA QUE TEM ATIVIDADE CELULAR E ISSO É 
UM CRITÉRIO IMPORTANTE. 
- Ter afinidades específicas para diversas estruturas celulares; 
- Facilitar a adesão celular à lâmina (durante a coloração não é para ir embora). 
 
➔ A SECO: Colorações Hematológicas 
OBS: NA CITOLOGIA, USA-SE A SECO PARA CORAR O GRAM (BACTERIOSCOPIA). 
➔ FIXADOR EM SPRAY – FIXAÇÃO DE COBERTURA 
Película ao secar por ação do glicol, e o álcool é o fixador, resistem a uma semana de 
armazenagem sem perda significativa. Pode provocar também uma retração celular 
exagerada resultando em condensação da cromatina e perda dos detalhes nucleares (álcool 
e polietilenoglicol). 
Permite enviar amostrar pelos correios. 
No laboratório, é necessário banhar sucessivamente em álcool para poder corar, porque o 
corante não consegue entrar porque a permeabilidade dessas células está alterada. 
➔ FIXAÇÃO ÚMIDA 
Imersão imediata do esfregaço na solução fixadora até o momento do processamento da 
amostra (álcool absoluto) = SUS. 
Para mandar por correio não pode, pois pode derramar o álcool e ainda manchar a 
requisição. 
 
Coloração 
- Corante nuclear = HEMATOXILINA (Hemateína – COR ROXA); 
OBS: O QUE REALMENTE CORA É A HEMATEÍNA QUE SERIA A OXIDAÇÃO DA HEMAOXILINA. 
- Citoplasmático 
 
OBS: ORANGE G CORA DIRETO A QUERATINA 
- Hematoxilina por oxidação (óxido de mercúrio) se transforma em hemateína, corando o 
núcleo em azul; 
- O verde brilhante é um corante ácido que cora em verde/azul as células metabolicamente 
ativas (parabasais, intermediárias, colunares e histiócitos); 
- A eosina, também, corante ácido cora o citoplasma em rosa das células superficiais e 
nucléolos; 
- Pardo de Bismarck cora em marrom; 
- As células metaplásicas coram verde ou rosa pela ação do verde brilhante e eosina; 
- Orange G cora hemácias e grânulos eosinofílicos. 
 
FASES: 
➔ Hidratação 
➔ Coloração 
➔ Desidratação 
➔ Coloração do Citoplasma 
➔ Desidratação, clarificação e selagem 
 
Primeiro faz a fixação com álcool. Depois faz a Hidratação gradativa diminuindo a quantidade 
de etanol até chegar na água, porque o corante da Hematoxilina é diluído em solução aquosa 
Orange G 
 EA Eosina, Verde luz ou verde brilhante e pardo de Bismarck. 
 
→ Etanol a 80%, 70%, 50% e Água Destilada. Em seguida, a primeira estrutura a ser corada é 
o Núcleo com Hematoxilina. Depois tem que usar o Orange G e o EA, mas eles estão em 
solução alcoólica, então vai Desidratar utilizando água destilada e aumentando as 
concentrações de etanol. → Água destilada, água corrente, água destilada, etanol a 50%, 70% 
e 95%. Cora com Orange G, lava 3x com Etanol a 95%. Cora com EA, lava 3x com Etanol a 95% 
e lava 2x com Etanol a 100%. Faz a Clarificação com Xilol (lava 3x) para a célula ficar 
translúcida e ver detalhes e, por fim, faz a Selagem da lamínula com Bálsamo do Canadá para 
pregar. 
 
OBS: COLORAÇÃO DE PAPANICOLAU É MAIS UTILIZADA EM CITOLOGIA GINECOLÓGICA, PAF 
DE MAMA E PAF DE TIREÓIDE. 
 
- Células escamosas maduras: Rosa-avermelhada; 
- Nucléolo: vermelho-arroxeada; 
- Células metabolicamente ativas: verde-azulado (citoplasma de profunda ou metaplásica); 
- Citoplasma queratinizado: laranja ou amarelo; 
 
MONTAGEM: 
- Capela (porque o Xilol é tóxico e volátil); 
- Bálsamo do Canadá; 
- Lamínula. 
 
LEITURA: 
- Microscópio ótico (10x e 40x); 
- Óleo de imersão (só se for para foto ou Gram); 
- Dá para ver tudo na de 40x, tem que percorrer toda a lâmina e, se der, mais de uma vez.