ESTUDOS DISCIPLINARES XII - QUESTIONÁRIO UNIDADE II

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 Pergunta 1 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Qual é um método habitualmente usado para separar e também purificar 
macromoléculas, principalmente ácidos nucleicos e proteínas? Essas 
macromoléculas são submetidas a um campo elétrico, na qual migram 
para um polo positivo ou negativo de acordo com a sua carga. Dentre as 
alternativas a seguir, assinale a que se refere ao método. 
 
Resposta Selecionada: b. 
Eletroforese. 
Respostas: a. 
Cromatografia gasosa. 
 
b. 
Eletroforese. 
 
c. 
Espectrofotometria. 
 
d. 
Espectrometria de massa. 
 
e. 
Infravermelho. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: B 
Comentário: A eletroforese é um método habitualmente 
usado para separar e também purificar macromoléculas, 
principalmente ácidos nucleicos e proteínas. Essas 
macromoléculas são submetidas a um campo elétrico, na 
qual migram para um polo positivo ou negativo de acordo 
com a sua carga. 
 
 
 Pergunta 2 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Na eletroforese, o fluxo migratório é determinado pelo peso molecular, no 
qual moléculas de: 
Resposta 
Selecionada: 
b. 
Menor peso migram mais rápido que as de maior peso, 
formando as bandas características que serão visualizadas 
posteriormente. 
Respostas: a. 
Maior peso migram mais rápido que as de menor peso, 
formando as bandas características que serão visualizadas 
posteriormente. 
 
b. 
Menor peso migram mais rápido que as de maior peso, 
formando as bandas características que serão visualizadas 
posteriormente. 
 
c. 
Menor peso migram mais lentamente que as de maior 
peso, formando as bandas características que serão 
visualizadas posteriormente. 
 
d. 
Maior peso migram mais lentamente que as de menor 
peso, formando as bandas características que serão 
visualizadas posteriormente. 
 
e. 
Maior peso migram em etapas contínuas que as de menor 
peso, formando as bandas características que serão 
visualizadas posteriormente. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: B 
Comentário: O fluxo migratório é determinado pelo peso 
molecular, no qual moléculas de menor peso migram mais 
rápido que as de maior peso, formando as bandas 
características que serão visualizadas posteriormente. 
 
 Pergunta 3 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Analise as afirmativas a seguir sobre a técnica de eletroforese em gel e responda (V) 
Verdadeiro ou (F) Falso. 
 
 
( ) A eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel que possibilita a corrida da amostra. 
( ) O gel é introduzido em uma solução tampão específica para eletroforese que fornece as 
condições ideais para a passagem da corrente e a manutenção do valor do pH. 
( ) As amostras são pipetadas em pequenos poços feitos com um pente no gel. Para 
ocorrer a migração, a cuba e a fonte de eletroforese exercem uma voltagem, corrente e 
potência constantes, esses fatores irão determinar o sucesso da técnica. 
( ) As bandas são visualizadas sob luz ambiente. 
Resposta Selecionada: a. 
V, V, V, F. 
Respostas: a. 
V, V, V, F. 
 
b. 
V, F, V, V. 
 
c. 
V, V, V, V. 
 
d. 
F, V, V, F. 
 
e. 
V, V, F, V. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: A 
Comentário: A eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gel que 
possibilita a corrida da amostra. O gel é introduzido em uma solução 
tampão específica para eletroforese que fornece as condições ideais para 
a passagem da corrente e a manutenção do valor do pH. Em seguida, as 
amostras são pipetadas em pequenos poços feitos com um pente no gel. 
Para ocorrer a migração, a cuba e a fonte de eletroforese exercem uma 
voltagem, corrente e potência constantes, esses fatores irão determinar o 
sucesso da técnica. E, por fim, as bandas são visualizadas sob luz 
ultravioleta ou LED, através do equipamento chamado transiluminador. 
 
 
 Pergunta 4 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Há vários tipos de eletroforese. A eletroforese normalmente é utilizada para 
separar proteínas e moléculas de DNA e RNA. Assinale (V) Verdadeiro ou (F) Falso para 
as técnicas de eletroforese. 
 
( ) Eletroforese em gel de agarose. Nesse caso, a agarose é utilizada como gel para 
a eletroforese. 
( ) Eletroforese em gel de poliacrilamida. A poliacrilamida é feita pela polimerização de 
dois polímeros. 
( ) Eletroforese desnaturante. Normalmente feita em gel de agarose, inclui um 
agente desnaturante (normalmente ureia). 
( ) Eletroforese luminosa utiliza luz solar. 
( ) Eletroforese de transiluminador. Normalmente utiliza lâmpada de cátodo oco. 
 
Resposta Selecionada: b. 
V, V, V, F, F. 
Respostas: a. 
V, V, V, V, V. 
 
b. 
V, V, V, F, F. 
 
c. 
V, F, V, V, F. 
 
d. 
V, F, F, F, F. 
 
e. 
V, V, F, V, V. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: B 
COMENTÁRIO: ELETROFORESE EM GEL DE AGAROSE. NESSE 
CASO, A AGAROSE É UTILIZADA COMO GEL PARA A 
ELETROFORESE. A AGAROSE É UM POLISSACARÍDEO E FORMA 
UMA REDE QUE PRENDE AS MOLÉCULAS DURANTE A 
MIGRAÇÃO. DEPENDENDO DA CONCENTRAÇÃO DE AGAROSE, HÁ 
UMA DIFERENÇA NO GRADIENTE DE SEPARAÇÃO, ISTO É, 
QUANTO MAIOR A CONCENTRAÇÃO DE AGAROSE, MENOR O 
TAMANHO DOS POROS E MAIOR A DIFICULDADE DA MIGRAÇÃO 
DOS FRAGMENTOS DE DNA E DE RNA, AUMENTANDO O TEMPO 
DE MIGRAÇÃO. 
ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA (PAGE, 
DE POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS). O GEL 
DE POLIACRILAMIDA TAMBÉM PODE SER UTILIZADO PARA 
SEPARAÇÃO DE MOLÉCULAS NA ELETROFORESE. A 
POLIACRILAMIDA É FEITA PELA POLIMERIZAÇÃO DE 
DOIS POLÍMEROS: ACRILAMIDA E BISACRILAMIDA. O GEL 
GERALMENTE É MONTADO NA VERTICAL, ASSIM, VÁRIAS 
AMOSTRAS PODEM SER ANALISADAS NOS POÇOS QUE SÃO 
MONTADOS DURANTE O PREPARO DO GEL. O TAMPÃO QUE É 
UTILIZADO É O MESMO NO GEL E NA CUBA DE ELETROFORESE 
E TEM PH DE APROXIMADAMENTE 9 PARA PROTEÍNAS, ASSIM, 
AS MACROMOLÉCULAS FICAM COM SUAS CARGAS NEGATIVAS 
E MIGRAM EM DIREÇÃO AO ÂNODO. ELETROFORESE 
DESNATURANTE. NORMALMENTE FEITA EM GEL DE AGAROSE, 
INCLUI UM AGENTE DESNATURANTE (NORMALMENTE UREIA), O 
QUE AJUDA A TORNAR A SEPARAÇÃO MELHOR 
ENTRE MOLÉCULAS QUE APRESENTAM DIFERENCIAÇÃO EM 
SUAS ESTRUTURAS SECUNDÁRIAS. ELETROFORESE CAPILAR. 
FUNCIONA COMO A ELETROFORESE NORMAL, PORÉM O GEL E 
A AMOSTRA ESTÃO DENTRO DE UM CAPILAR, E A AMOSTRA É 
DETECTADA AUTOMATICAMENTE. ESSE PROCESSO É 
ATUALMENTE UTILIZADO EM SEQUENCIADORES DE DNA. 
 
 
 Pergunta 5 
0,5 em 0,5 pontos 
 
 
A eletroforese pode ser usada para separar moléculas com base na carga, tamanho e 
afinidade de ligação que possuem. A técnica é aplicada principalmente para separar e 
analisar biomoléculas, como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e 
fragmentos dessas macromoléculas. Essa é uma das técnicas utilizadas para identificar 
DNA-fonte, como no teste de paternidade e na ciência forense. 
 
Analise as afirmações a seguir: 
 
I – A eletroforese de ânion ou partículas carregadas negativamente é 
chamada anaforese. 
II – A eletroforese de cátion ou partículas carregadas positivamente é 
chamada cataforese. 
III – Um fator importante é o tamanho da partícula. Pequenos íons e moléculas podem 
se mover através de um gel ou líquido muito mais rapidamente do que os grandes. 
IV – O processo de eletroforese foi observado pela primeira vez em 1807 por Ferdinand 
Frederic Reuss, da Universidade Estadual de Moscou, que notou que as partículas de 
argila migraram em águas expostas a um campo elétrico contínuo. 
 
Assinale a alternativa correta: 
 
Resposta Selecionada: c. 
I, II, III e IV. 
Respostas: a. 
Apenas I e II. 
 
b. 
Apenas I, II e IV. 
 
c. 
I, II, III e IV. 
 
d. 
Apenas I e III. 
 
e. 
Apenas II, III e IV. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: C 
Comentário: A eletroforese de ânion ou partículas carregadas 
negativamente é chamada anaforese. A eletroforese de cátion ou 
partículas carregadas positivamente é chamada cataforese. Um fator 
importante é o tamanho da partícula. Pequenos íons e moléculas 
podem se mover através de um gel ou líquido muito mais rapidamente do 
que os grandes. O processo de eletroforese foi observado pela primeira 
vez em 1807 por Ferdinand Frederic Reuss, da Universidade Estadualde 
Moscou, que notou que as partículas de argila migraram em águas 
expostas a um campo elétrico contínuo. 
 
 
 Pergunta 6 
0,5 em 0,5 pontos 
As técnicas eletroquímicas constituem-se em poderosa ferramenta para 
os analistas na resolução de seus problemas, especialmente por causa de 
 
 
algumas características vantajosas, como a elevada sensibilidade das 
determinações, custo moderado e portabilidade. 
 
Analise as afirmativas a seguir: 
 
I – Aparecem aspectos desvantajosos das medições eletroquímicas, 
principalmente quando comparadas às efetuadas com técnicas 
espectroscópicas. Um dos problemas refere-se à interação do eletrodo 
com a amostra, que, em muitos casos, ocasiona perda ou 
irreprodutibilidade nas medidas. 
II – A versatilidade das técnicas eletroquímicas também merece destaque, 
visto que é possível controlar as reações eletródicas modificando a 
interface eletrodo-solução e selecionando-se criteriosamente o potencial 
aplicado à célula. 
III – O uso de reagentes moleculares para manipular deliberadamente a 
superfície de eletrodos tem vasta aplicação em eletroanalítica, pois conduz 
à melhoria na capacidade de reconhecimento e/ou na amplificação de 
sinais de corrente. 
 
Assinale a resposta correta: 
Resposta Selecionada: e. 
I, II e III. 
Respostas: a. 
Apenas I. 
 
b. 
Apenas I e II. 
 
c. 
Apenas III. 
 
d. 
Apenas II e III. 
 
e. 
I, II e III. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: E 
Comentário: Aparecem aspectos desvantajosos das 
 
medições eletroquímicas, principalmente quando 
comparadas às efetuadas com técnicas espectroscópicas. 
Um dos problemas refere-se à interação do eletrodo com a 
amostra, que, em muitos casos, ocasiona perda ou 
irreprodutibilidade nas medidas. A versatilidade das técnicas 
eletroquímicas também merece destaque, visto que é 
possível controlar as reações eletródicas modificando a 
interface eletrodo-solução e selecionando-se criteriosamente 
o potencial aplicado à célula. O uso de reagentes 
moleculares para manipular deliberadamente a superfície de 
eletrodos tem vasta aplicação em eletroanalítica, pois 
conduz à melhoria na capacidade de reconhecimento e/ou 
na amplificação de sinais de corrente, ao mesmo tempo em 
que pode tornar as determinações mais seletivas pelo efeito 
eletrocatalítico (diminuição da sobretensão dos processos 
eletródicos) ou pela restrição da passagem de espécies 
interferentes empregando-se membranas apropriadas. 
 
 Pergunta 7 
0,5 em 0,5 pontos 
 
O efeito eletroforético tem como base a teoria de Debye-Hückel-Onsager. Essa teoria de 
dissociação eletrolítica aceita o fato de as partículas carregadas moverem-se sob a 
influência de forças eletrostáticas para um eletrodo de carga oposta quando é aplicada 
uma diferença de potencial em uma solução contendo eletrólitos. Para sua execução, é 
necessária uma solução tampão, que possui várias funções nesse processo. 
 
Analise tais funções e marque para as afirmativas (V) Verdadeiro ou (F) Falso. 
 
( ) Conduz corrente elétrica. 
( ) Determina a carga elétrica do soluto. 
( ) Colore a substância a ser analisada. 
( ) Estabiliza o pH. 
 
Resposta Selecionada: d. 
F, V, F, V. 
Respostas: a. 
V, V, F, F. 
 
b. 
F, V, V, V. 
 
c. 
F, F, V, V. 
 
d. 
F, V, F, V. 
 
 
e. 
V, F, F, V. 
Comentário da 
resposta: 
Resposta: D 
Comentário: A eletroforese é a migração de uma molécula carregada 
sob a influência de um campo elétrico. Estabiliza o pH e determina a 
carga elétrica do soluto. 
 
 Pergunta 8 
0,5 em 0,5 pontos 
 
As técnicas analíticas instrumentais têm se destacado sobremaneira nos 
últimos anos pelos avanços tecnológicos, tanto na montagem de sistemas 
analíticos mais robustos e de menor tamanho, quanto no 
desenvolvimento de softwares de operação e tratamento de dados que 
otimizam o tempo de análise e de interpretação dos resultados obtidos, o 
que tem levado, em associação a outros fatores de mercado, a uma 
redução nos preços dos equipamentos de laboratório. São objetivos dos 
controles de qualidade internos e externos realizados no laboratório 
clínico: 
 
Resposta 
Selecionada: 
e. 
Todas as alternativas estão corretas. 
Respostas: a. 
Analisar o comportamento das análises instrumentais 
frequentemente. 
 
b. 
Identificar problemas e realizar correções. 
 
c. 
Avaliar e garantir a eficácia de métodos de trabalho, 
desempenho dos equipamentos, verificar interferência do 
ruído de rede e reagentes. 
 
d. 
Somente as alternativas A e B estão corretas. 
 
e. 
Todas as alternativas estão corretas. 
 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: E 
Comentário: Para garantir a qualidade dos ensaios, deve-se: 
analisar o comportamento das análises instrumentais 
frequentemente, identificar problemas e realizar correções, 
avaliar e garantir a eficácia de métodos de trabalho, 
desempenho dos equipamentos, verificar interferência do 
ruído de rede e reagentes. 
 
 Pergunta 9 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Embora o método instrumental aumente o custo de uma análise pelo uso 
de equipamentos sofisticados, que demandam aparatos eletrônicos mais 
complexos, sua utilização vem sendo cada vez mais difundida nos 
laboratórios. 
Assinale a alternativa que apresenta o princípio da seguinte técnica: a 
técnica é aplicada principalmente para separar e analisar biomoléculas, 
como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e 
fragmentos dessas macromoléculas. 
 
Resposta Selecionada: c. 
Eletroforese. 
Respostas: a. 
Cromatografia. 
 
b. 
Fotoluminescência. 
 
c. 
Eletroforese. 
 
d. 
Potenciômetro. 
 
e. 
Espectrofotometria. 
Comentário da 
resposta: 
Resposta: C 
Comentário: Eletroforese é a técnica aplicada 
principalmente para separar e analisar biomoléculas, 
 
como DNA, RNA, proteínas, ácidos nucleicos, plasmídeos e 
fragmentos dessas macromoléculas. 
 
 Pergunta 10 
0,5 em 0,5 pontos 
 
Os fundamentos da eletroforese bidimensional foram introduzidos em 
1975. A técnica resulta da combinação da focalização isoelétrica e da 
eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante. As proteínas são 
separadas de acordo com seu ponto isoelétrico pela focalização 
isoelétrica, na primeira dimensão e, na segunda dimensão, as proteínas 
são separadas de acordo com suas massas moleculares. 
 
Analise as afirmações a seguir: 
 
I – A eletroforese bidimensional é uma ferramenta importantíssima em 
investigações bioquímicas. Ela combina duas formas diferentes de 
separação de proteínas: a focalização isoelétrica e a eletroforese do tipo 
SDS-PAGE. Em cada uma de suas etapas, as proteínas são separadas por 
diferentes características. 
II – A SDS-PAGE, eletroforese unidimensional, consiste em um método 
para a separação de polipeptídios de acordo com os seus pesos 
moleculares. 
III – A técnica é realizada em gel de poliacrilamida contendo duodecil 
sulfato de sódio (SDS). No entanto, os métodos unidimensionais de 
separação podem separar um número relativamente pequeno de 
proteínas (geralmente menos de 50). 
IV – A eletroforese bidimensional apresenta uma menor capacidade para 
separar misturas complexas. 
V – Apesar de ser amplamente utilizado, esse método apresenta 
problemas de reprodutibilidade, uma vez que é incapaz de detectar 
proteínas em baixa abundância ou altamente hidrofóbicas. 
 
Assinale a alternativa correta: 
 
Resposta Selecionada: e. 
Apenas I, II, III e V. 
Respostas: a. 
Apenas I, II e III. 
 b. 
 
Apenas II, III e V. 
 
c. 
Apenas III, IV e V. 
 
d. 
Apenas I, IV e V. 
 
e. 
Apenas I, II, III e V. 
Comentário 
da resposta: 
Resposta: E 
Comentário: A eletroforese bidimensional é uma ferramenta 
importantíssima em investigações bioquímicas. Ela combina 
duas formas diferentes de separação de proteínas: a 
focalização isoelétrica e a eletroforese do tipo SDS-PAGE. Em 
cada uma de suas etapas, as proteínas são separadas por 
diferentes características. 
A SDS-PAGE, eletroforese unidimensional, consiste emum 
método para a separação de polipeptídios de acordo com os 
seus pesos moleculares. 
A técnica é realizada em gel de poliacrilamida contendo 
duodecil sulfato de sódio (SDS). No entanto, os métodos 
unidimensionais de separação podem separar um número 
relativamente pequeno de proteínas (geralmente menos de 
50). 
A eletroforese bidimensional apresenta uma maior 
capacidade para separar misturas complexas. 
Apesar de ser amplamente utilizado, esse método apresenta 
problemas de reprodutibilidade, uma vez que é incapaz de 
detectar proteínas em baixa abundância ou altamente 
hidrofóbicas.