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Resumo av1 biotec
Coleta e manipulação do sêmen em bovinos e equinos
· Antes da coleta
- Preparo do macho
Higienização do pênis com água corrente, para não causar mudanças na flora peniana, e secar com papel toalha
- Preparo da fêmea
Colocar a peia para que a fêmea não dê um coice no macho, prender a cauda para que os fios dela não acabem caindo no sêmen e para que não haja perigo de copulação e esvaziar o ânus para que a fêmea não acabe defecando e contaminando o sêmen.
- Procurar indicativos de se os animais estão no cio ou não
Reflexo de flehmen
Utilizando rufiões
· Coleta
A coleta do sêmen de um animal serve para duas situações diferentes:
1- Avaliação do potencial de fertilidade do macho: antes dessa coleta fazer o esgotamento das reservas gonadais para padronizar a qualidade do sêmen 
2- Coleta para armazenamento de sêmen para inseminação artificial
· Método de coleta:
 - Vagina artificial:
Usado em grandes animais. Esses animais devem ser condicionados desde novos para que a coleta seja feita de forma segura tanto para o animal quanto para quem está coletando. 
Coleta que garante a melhor qualidade do sêmen.
Formas de coleta com a vagina artificial:
a. Fêmeas no estro: o cavalo irá montar na fêmea, mas a penetração ocorrerá na vagina artificial.
b. Fêmeas em diestro com aplicação de estrógeno: 
c. Manequim: o cavalo monta em um manequim com feromônios ou teremos uma fêmea no cio dentro do recinto, mas o animal montará o manequim.
d. Outro macho: utilizado com touros
Coisas que causam falhas nessa coleta:
a. erro na temperatura da vagina artificial
b. excesso de pressão
c. erro de posicionamento na hora da coleta
 - Por eletroejaculador:
Usado em ruminante. Nesse método, pequenos choques estimulam a ejaculação. O sêmen tem menos qualidade
 - Ejaculação química:
Utilização de xilazina e imipramina para causar a ejaculação.
Usado para animais mais velhos que já não conseguem fazer a monta. A qualidade do sêmen coletado não é tão boa.
· Manipulação e análise do sêmen
Dividida em:
1) Exames imediatos-
Logo após a coleta.
Neles vemos:
A. Volume: ( não importa desde que a concentração espermática seja a ideal ): 
Equinos- 20 a 80ml
Bovinos- 2 a 10ml
B. Cor:
Branco acinzentado
Se tiver avermelhado o animal pode ter uma lesão ou a coleta pode ter sido mal feita e lesionado o animal
C. Odor:
“ suis generis “
D. Aspecto:
Aquoso/ leitoso
E. Motilidade: percentual de spitz que se movimentam na amostra
 0-100%
F. Vigor: velocidade dos movimentos dos spitz
0-5 
G. Turbilhonamento: movimento circular, relacionado a alta concentração espermática
 1-5 
2) Exames mediatos- Exames que podem ser feitos após o sêmen ser armazenado
A. Concentração espermática
feita com espermatozoides mortos, faz a contagem de espermatozóides
Calculo da concentração:
Ce = n de spitz x 10³
 1/10 x D x 5/25
D ( muda de acordo com a espécie):
* Equinos e cães: 1/20
* Bovinos: 1/40
* Pequenos ruminantes: 1/80
B. Patologia espermática 
- Avalia o número de spitz defeituosos em uma amostra.
- Os defeitos são divididos em primários ( afetam diretamente a reprodução ) e secundários (dificultam a movimentação, mas n impedem a reprodução )
- Para o sêmen poder ser utilizado ele deve ter no máximo 30% de spitz defeituosos 20% secundários e 10% primários
C. Provas de integridade da membrana
 Avalia o número de spitz com membrana rompida
· Diluição 
Preserva os spitz, reduz a contaminação bacteriana, impede choques térmicos e possui substancias antioxidantes.
· Armazenamento
O sêmen fresco e diluído dura até 2h, mas se houver a necessidade de armazenar este sêmen para ser utilizado depois, existem dois tipos de armazenamento:
- Resfriamento
Se mantido a 5°c conserva por até 48h
- Congelamento
Congelamento com nitrogênio, sêmen fica conservado por anos, mas acaba sofrendo algumas lesões
O armazenamento afeta a dose mínima para a inseminação. 
Se for um sêmen fresco, a dose inseminante será de 500 milhões
Se for um sêmen resfriado ou congelado de 800 milhões a 1 bilhão de spitz
Inseminação artificial ( IA ) em bovinos
O sêmen utilizado sempre será congelado
· Vantagens do ia
- Melhoria genética
- Controle sanitário, impede a transmissão de dsts
- 1 reprodutor emprenha várias fêmeas
- Uniformidade do lote
- Melhor qualidade da carcaça
· Materiais necessários para a ia
Bainhas descartáveis ( protege o aplicador )
Aplicador 
Termômetro 
Cortador de palhetas
· Conservação do sêmen 
O sêmen deve ser mantido em palhetas dentro de um botijão com nitrogênio liquido a -196°C ou no vapor de nitrogênio a -125°C
Quantidade de sêmen na palheta: 0,25ml
Dose inseminante: 50 milhões
· Seleção de matrizes
- As fêmeas devem ter um escore corporal: 3 ou 4
- Devem estar saudáveis
· Identificação do cio
Podemos observar através de mudanças comportamentais ( as vacas permitem que outras montem nelas ) e físicos ( saída de muco da vagina ).
Uma das formas de saber se uma vaca esta no cio sem ficar observando o tempo inteiro é a utilização de rufiões que usam um instrumento que marca a tinta as vacas que eles tentam montar
· Momento da inseminação
A vaca ovula de 12 a 16h após o cio ( no metaestro ) e o cio delas dura de 8 a 12h, então a inseminação é feita 12h após a observação dos comportamentos de cio.
- Método de Trimberger
É um método que deixa mais claro o horário de inseminação
*Observação de cio de manhã → insemina a vaca a tarde 
*Observação de cio a tarde → insemina a vaca pela manhã
· Inseminação
Nos bovinos a inseminação ocorre do corpo do útero
a. Higienizar a fêmea
b. Aquecer o sêmen a 37°C por 30 segundos
c. Montar o aplicador com a palheta e introduzir na vagina da fêmea
*No ia da vaca, é necessário introduzir a mão no reto da vaca para manipular o cérvix e posicionar os anéis fibrocartilaginosos de forma que o aplicador consiga chegar ao corpo do útero 
Inseminação artificial ( IA ) em equinos
O sêmen utilizado pode ser congelado, resfriado ou fresco
· Observação do cio
As éguas são poliéstricas estacionais fotoperíodo positivo e só entram no cio durante a primavera e verão.
Para reconhecer o cio das éguas é necessário fazer uma ultra do trato genital ou usar a presença de um rufião e observar o comportamento. O rufião fica em um piquete diferente para garantir sua proteção, éguas normalmente n aceitam a presença de machos.
Comportamento das fêmeas no cio quando veem o rufião: Passividade, elevação da cauda, micção, contração do clítoris.
*Fêmeas com potro ao pé não aceitam a presença de machos mesmo estando no cio
· Indução do cio
Nas éguas é possível induzir a ovulação com programas de luz e aplicação de Gnrh. Após a aplicação, a égua entrará em cio após 36h a 42h
- Sêmen fresco ou resfriado:
Deve-se inseminar a fêmea 12 horas antes de ela entrar no cio
-Sêmen congelado:
Após a aplicação deve-se observar a fêmea de 2 em 2h pois só é possível fazer a inseminação até no máximo 4h após ela ovular. A taxa de sucesso de inseminação diminui com o tempo, após 4h é improvável.
· Inseminação
A égua ovula no terço final do estro
O ideal é que seja feita 1 inseminação por cio pois o sêmen causa uma reação inflamatória no útero da fêmea 
Nas éguas a inseminação é mais profunda, a deposição do sêmen vai ocorrer na papila útero-tubárica
A taxa de prenhez de éguas normalmente é de 30%, mas com a utilização das biotecnologias passa para 70%
Inseminação artificial ( IA ) em cães
O sêmen utilizado pode ser congelado, resfriado ou fresco
· Cio
As cadelas sincronizam o cio
A observação do cio ocorre por meio de alterações comportamentais e físicas
Fazemos perfil hormonal para saber quando acasalar a fêmea:
Se a concentração de p4 estiver de 4 a 8 ng/ml esperar 2 dias e botar para acasalar
· Método de coleta: 
Massagem digital
· Frequência de coleta
1 a 2 coletas por semana com intervalo de 4 a 5 dias 
*Medicações contra ecto e endoparasitas não devem ser utilizadas durante o cio pois afetam a fertilização
· Coleta
Antes da coleta do material pra inseminação,fazer 2 coletas para retirada de células mortas.
O ejaculado é dividido em 3 frações sendo a 2° com maior concentração de sptz
Na 1° fração: o sêmen vai ser claro, o volume de até 3 ml e a concentração de 3 milhões de spitz por ml
Na 2° fração: a amostra vai ser mais turva, volume de até 5 ml e a concentração de 400 milhões de spitz por ml
3° fração: amostra clara, com até 30ml de volume e sem spitz
· Característica do sêmen ideal:
a. Volume: ( depende do porte )
8ml
b. Motilidade: percentual de spitz que se movimentam na amostra
80% - 90%
c. Vigor: 
Acima de 3
d. Ph
 6,3 – 6,7
· Inseminação
Pode ser:
- Intra-vaginal:
Usando uma sonda rígida ou sonda de osiris e inseminando a dose inseminal de 50 milhões de spitz
 - intra- uterina
* Utiliza sêmen congelado
Feita de forma:
a. Cirúrgica;
 Aplicação após o cérvix
b. Transcervical;
Difícil de passar pelo cérvix pois é muito fechado.
c. Endoscopia vaginal.

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