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Prática de observação de células vegetais: manual com introdução, objetivos, listas de materiais e procedimentos passo a passo para preparar lâminas de epiderme de tomate e cebola (uso de azul de metileno na cebola), com orientação de observação ao microscópio e desenho.

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PRÁTICA - OBSERVAÇÃO DE CÉLULAS VEGETAIS 
1 INTRODUÇÃO
As células vegetais são eucariontes, ou seja, possuem o núcleo delimitado por uma membrana intitulada carioteca ou membrana nuclear que separa nitidamente o DNA do citoplasma. Elas possuem diversas semelhanças com as células animais, tanto na sua estrutura molecular de membranas como pelas diversas organelas presentes, a replicação do DNA, a transcrição em RNA, toda a síntese proteica e a energia proveniente das mitocôndrias (JUNQUEIRA; CARNEIRO, 2011).
Estas células em geral possuem a maior parte do citoplasma ocupado por uma grande estrutura chamada vacúolo central. Ou seja, o que difere das células animais é, principalmente, a presença de parede celular, grandes vacúolos muitas vezes ocupam espaços muito grandes na célula e também a presença de plastídeos.
A Citologia têm nos mostrado cada vez mais o papel imprescindível das células nos seres vivos, e esta prática permitirá que você visualize as células de diferentes partes de dois vegetais. Ela se divide, portanto, em duas etapas para que você aplique e permita a diferenciação e o comparativo entre as duas. 
É importante destacar que o conteúdo desta prática relaciona-se com outras disciplinas do curso e/ou áreas afins, especialmente Botânica, Genética, Microbiologia, Hematologia, Imunologia e Histologia.
Desejamos bom estudo ao longo desta disciplina. Que você perceba a cada leitura e/ou atividade realizada, a satisfação de consolidar a formação do seu conhecimento, tanto profissional como pessoal.
Lembre-se de que, além do seu Professor-Tutor Externo, Coordenador, Articulador do Polo de Apoio Presencial, você também pode contar com o Apoio dos Supervisores de Disciplina e os Professores-Tutores Internos.
Boa prática!
2 OBJETIVOS
Os objetivos desta prática são:
- visualizar as células de epiderme de tomate e da cebola;
- diferenciar a metodologia utilizada em cada processo de visualização.
3 MATERIAIS
3.1 Prática de observação de células da epiderme do tomate
- frasco contendo lâminas de vidro para microscopia;
- frasco de conta-gotas contendo água;
- frasco para o descarte das lâminas de vidro usadas;
- lápis e folha de papel para desenho; 
- máquina fotográfica se necessário;
- microscópio;
- pacote de papel de filtro cortado em tiras de aproximadamente 7 x 25 cm;
- pedaço de lâmina de barbear (recobrir parte da lâmina com esparadrapo) ou faca;
- pedaço de papel (± 60 cm x 40 cm) para cobrir a bancada se necessário;
- pedaços de tomate;
- pinça de ponta fina;
- placa de Petri com lamínulas;
- rolo de papel higiênico fino e macio.
3.2 Prática de observação de células da epiderme
- frasco com lâminas de vidro para microscopia;
- frasco conta-gotas contendo azul de metileno 0,5%;
- frasco para o descarte das lâminas de vidro usadas;
- lápis e folhas de papel para desenho;
- pacote de papel de filtro cortado em tiras de aproximadamente 7 x 25 cm;
- pedaço de lâmina de barbear ou faca;
- pedaço de papel (± 60 x 40 cm) para cobrir a bancada se necessário;
- pedaço de ¼ de cebola sem casca, como pode ser visualizado na Figura 2;
- pinça de ponta fina;
- placa de Petri contendo lamínulas;
- rolo de papel higiênico fino e macio;
- máquina fotográfica se necessário;
- microscópios.
4 PROCEDIMENTO
4.1 Procedimento da prática para visualização das células da epiderme do tomate
1. Usando o frasco conta-gotas, pingue, sobre a região central de uma lâmina, uma gota de água.
2. Com o auxílio de uma lâmina de barbear, recorte um triângulo com cerca de 1 cm de lado na superfície de um tomate maduro. 
3. Com uma pinça de ponta fina, retire a epiderme do pedaço recortado (primeira camada externa) e coloque-a sobre a gota de água na lâmina.
4. Cubra a preparação com a lamínula.
5. Retire as bolhas de ar pressionando levemente a lamínula com a pinça.
6. Coloque a lâmina com a preparação dentro de um pedaço de papel de filtro dobrado.
7. Pressione levemente para retirar o excesso de líquido.
8. Observe ao microscópio: focalize usando a objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Gire vagarosamente o micrométrico para obter o melhor foco. 
9. Faça um desenho das células observadas.
Na Figura 1 você poderá visualizar um esquema representativo destas etapas:
FIGURA 1 – PROCEDIMENTO PARA VISUALIZAÇÃO DAS CÉLULAS DA EPIDERME DO TOMATE
FONTE: CENTRO DE ESTUDOS DO GENOMA HUMANO. Disponível em <www.genoma.ib.usp.br/educacao/Observacao_Celulas_Vegetais_web.pdf>. Acesso em: 9 mar. 2012.
4.1 Procedimento da prática para visualização das células de cebola
1. Com o auxílio de um conta-gotas, coloque, na região central de uma lâmina, uma gota de azul de metileno.
2. Com o auxílio de uma lâmina de barbear, recorte um triângulo, com cerca de 1centímetro de lado, na parte interna de um catafilo de cebola. 
3. Com a pinça de ponta fina, retire a epiderme inferior do pedaço recortado e coloque-a sobre a gota de azul de metileno.
4. Com o frasco conta-gotas pingue mais uma gota de azul de metileno sobre a epiderme da cebola. Aguarde 2 minutos.
5. Cubra a preparação com a lamínula.
6. Retire as bolhas de ar pressionando levemente a lamínula com a pinça.
7. Coloque a lâmina com a preparação dentro de um pedaço de papel de filtro dobrado. Pressione levemente para retirar o excesso de líquido.
8. Observe ao microscópio: focalize usando a objetiva de 10x e em seguida a de 40x. Gire vagarosamente o micrométrico para obter o melhor foco.
9. Faça um desenho das células observadas.
Na Figura 3 você poderá visualizar um esquema representativo destas etapas:
FIGURA 3 – PROCEDIMENTO PARA VISUALIZAÇÃO DAS CÉLULAS DE CEBOLA
FONTE: CENTRO DE ESTUDOS DO GENOMA HUMANO. Disponível em <www.genoma.ib.usp.br/educacao/Observacao_Celulas_Vegetais_web.pdf>. Acesso em: 9 mar. 2012.
5 INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
Após a realização da prática descreva os resultados obtidos e discuta-os a partir dos questionamentos a seguir: 
1. Por que na prática com a cebola foi necessário o uso de corante e na prática para visualização da epiderme do tomate não foi preciso?
2. Diante disso, qual a função do azul de metileno?
3. O que poderia ser visualizado em uma folha de uma planta qualquer, além do que foi verificado nos tomates e cebolas?
REFERÊNCIAS
ALBERTS, Bruce. Fundamentos da biologia celular. 8. ed. reimp. Porto Alegre: Artmed, 2008.
JUNQUEIRA, Luís Carlos Uchoa; CARNEIRO, José. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011.

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