BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES

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CARACTERÍSTICAS 
- São microrganismos aeróbios e 
incapazes de utilizar carboidratos como 
fonte de energia através da 
fermentação, degradando-os pela via 
oxidativa. 
- Os bacilos gram-negativos não 
fermentadores apresentam oxidase 
positiva, diferente das enterobactérias 
que apresentam oxidase negativa. 
 
 
 
Bacilos Gram Negativos Não Fermentadores 
 Aula 10 
 
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- São identificados pelo teste de oxidase, 
que é um procedimento qualitativo para 
determinar a presença ou ausência de 
atividade de oxidase no citocromo C 
nas bactérias. 
 
 
- Estudos filogenéticos baseados na 
sequência 16S do rRNA levaram a 
inúmeras mudanças na classificação e 
nomenclatura desse grupo de 
microrganismos nos últimos anos; 
- Dentre os principais gêneros 
causadores de infecções em seres 
humanos encontram-se: 
 
- Representam cerca de 15% dos bacilos 
Gram negativos isolados nos 
laboratórios de microbiologia; 
- Destes, 75% são representados por: 
• Pseudomonas aeruginosa e 
Acinetobacter baumanni. 
• Estão entre as bactérias mais 
isoladas em hemoculturas e 
amostras do trato respiratório de 
pacientes sob regime de 
internação hospitalar. 
- As demais BGN-NF representam um 
percentual pequeno de isolados, 
quando comparados com outros 
agentes etiológicos. 
 
 
IMPORTÂNCIA CLÍNICA 
- As bactérias que compõem o grupo de 
BGN-NF são consideradas oportunistas; 
 
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- Tem grande importância clínica em 
casos de infecções relacionadas à 
assistência à saúde, principalmente em: 
• Unidades de terapia intensiva; 
• Pacientes submetidos a 
procedimentos invasivos; 
• Unidades de queimados; 
• Infecções do trato respiratório de 
pacientes com fibrose cística (FC). 
- A fibrose cística é uma doença 
genética grave, de herança 
autossômica recessiva, cuja principal 
manifestação clínica é a doença 
pulmonar obstrutiva crônica 
progressiva, frequentemente associada 
a quadros infecciosos. 
 
Pseudomonas 
- Ampla coleção de bactérias não 
fermentadoras que foram agrupadas 
devido semelhanças morfológicas; 
- Existe 2 mil espécies do gênero; 
- P. aeruginosa é a mais importante; 
- São bastonetes Gram negativos; 
- Móveis retos ou ligeiramente curvos; 
- Utilizam carboidratos através da 
respiração aeróbica; 
- Aeróbio obrigatórios, podem crescer 
de modo anaeróbico, utilizando nitrato 
ou arginina como aceptor de elétrons; 
- Ubíquos: encontrados no solo, matéria 
orgânica em decomposição, vegetação, 
água, ambiente hospitalar, 
reservatórios úmidos (alimentos, vasos 
de plantas, pias, pano de chão, 
equipamento de terapia respiratória ou 
diálise); 
- Ampla distribuição: exigência 
nutricional simples e versatilidade 
nutricional; 
 
Pseudomonas aeruginosa 
• É a espécie mais importante; 
• Infectam aproximadamente 60% 
da população com FC e 70% a 
80% dos adolescentes e adultos, 
segundo a Cystic Fibrosis 
Foudation, BGN-NF que mais 
acomete estes pacientes. 
• Muitas cepas de P. aeruginosa 
isoladas de pacientes com FC 
apresentam o fenótipo mucoide, 
devido à produção de alginato 
(substância presente na parede 
celular de algas marinhas e na 
cápsula celular de algumas 
bactérias, em que desempenha 
funções primariamente 
estruturais); 
• A presença desse fenótipo é 
indicativa de infecção crônica e 
está relacionada com um declínio 
da função pulmonar e pior 
prognóstico. 
 
• Pode causar infecções 
oportunistas em seres humanos 
 
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causa infecções em indivíduos 
imunocomprometidos como: 
1. Pacientes de AIDS e câncer; 
2. Vítimas de queimaduras; 
3. Portadores de FC – neste caso, 
P. aeruginosa coloniza os 
pulmões, onde produz grande 
quantidade de polissacarídeo 
alginato. 
• É comumente encontrada em 
infecções hospitalares, sendo 
capazes de se aderir a diversos 
materiais, contaminando 
cateteres, ventiladores, próteses e 
lentes de contato; 
• Cepas – resistência elevada a 
vários antimicrobianos e são 
capazes de causar infecções 
graves – Por causa disso, da alta 
resistência a antibióticos e do 
grande arsenal de fatores de 
virulência desta bactéria, as 
infecções causas por ela são de 
difícil controle. 
• É um bacilo Gram -; 
• Móvel; 
• Aeróbio estrito; 
• Pertence ao grupo fluorescente do 
gênero (pioverdina): P. 
aeruginosa, P. fluorescens e P. 
putida; 
• Produz pigmentos hidrossolúveis 
como a pioverdina, piocianina, 
piorrubina ou piomelanina; 
• Espécie de maior importância 
clínica entre os BGN-NF; 
 
 
- Fluoresceína ou pioverdina (F) pode 
ser produzida por P. aeruginosa, P. 
fluorescens e P. putida. 
- Pioverdina cora em verde 
fluorescente; 
- Piocianina se manifesta corando o 
meio de cultura de azul-esverdeado; 
- Pseudomonas aeruginosa é a única 
espécie conhecida de bactéria que 
produz a piocianina. 
 
 
Diagnóstico laboratorial de 
Pseudomonas 
- Material: 
• Amostras de lesões cutâneas, pus, 
urina, sangue, líquor, escarro e 
outros, conforme o tipo de 
infecção. 
- Microscopia: 
 
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• Esfregaço: bastonetes 
visualizados após coloração de 
Gram = Bastonetes Gram 
negativos delgados, disposto em 
células únicas é sugestivo de 
Pseudomonas, Bulkoderia, 
Stenotrophomonas. 
• Não há nenhuma característica 
morfológica específica que os 
diferencie de outros bastonetes 
Gram negativos. 
• Coloração: 
 
- Cultura: 
• Pseudomonas apresentam 
necessidades nutricionais 
simples. Crescem facilmente nos 
meios de isolamento como ágar 
sangue e ágar MacConkey. 
 
 
- Se o microrganismos fermentou 
lactose, ele também fermentará glicose. 
- Quando há lactose negativa, há 
necessidade de fazer prova de oxidase. 
- Quando realiza-se a prova de oxidase 
e dá positiva, pode ser uma 
Pseudomonas (que não é 
 
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fermentadora). Caso dê negativa, pode 
ser Salmonella (fermentadora). 
 
Teste da oxidase 
- É um teste diferencial importante na 
identificação de bactérias Gram 
negativas; 
- Baseia-se na produção de uma 
enzima oxidase intracelular da 
bactéria; 
- No teste, aceptores eletrônicos 
naturais podem ser substituídos por 
substratos artificiais, que na presença 
de oxigênio atmosférico, são oxidados 
pela citocromo oxidase, formando um 
composto colorido; 
- Tiras de papel absorvente 
impregnadas com p-fenilenodiamina 
(acondicionadas em frasco escuro e 
opaco contendo agente dessecante); 
- Procedimento: com uma alça de 
platina ou bastão de vidro faz-se um 
esfregaço da bactéria a ser identificada 
na fita; 
- As bactérias que possuem atividade 
de citocromo-oxidase (oxidase positiva) 
provocam uma reação rápida do 
reativo, que desenvolve a coloração 
púrpura intenso quando oxidado. 
 
 
 
Identificação de P. aeruginosa 
- A morfologia da colônia e os 
resultados de alguns testes bioquímicos 
específicos e rápidos,são suficientes 
para identificação preliminar dos 
isolados; 
- Morfologia das colônias: cresce 
rapidamente e apresenta colônias 
redondas, lisas e planas (mucoides ou 
secas), achatadas, com bordas 
irregulares, beta-hemólise; 
- Positividade da oxidase; 
- Presença de pigmentos característicos 
(piocinina e pioverdina) 
- Odor: doce característico semelhante 
a uva 
 
 
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Indicações laboratoriais 
- Oxidase +; 
- Beta-hemólise me ágar sangue; 
- Odor e cor característicos; 
- Motilidade +; 
- Crescimento a 42 graus Celsius; 
- Redução de nitrato a nitrito + 
- Lisina descarboxilase -. 
- Acetamina + 
- Malonato + 
- Citrato + 
- Indol - 
- Formação de ácido oxidativo a partir 
da glicose e do manitol; 
- Incapacidade de oxidar maltose e 
lactose; 
- DNAse - 
- Sensibilidade à polimixina beta.