5 - Microbiologia - estágio

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Microbiologia - estágio
É a área que estuda os seres vivos que só podem ser vistos por meio do microscópio. Através de pesquisas descobrimos os aspectos, modo de vida, metabolismo, fisiologia e suas interações com outras espécies. Fazem parte desse mundo bactérias, fungos, protozoários e vírus. (Lopes, 2018) 
Os vírus seguem sendo responsáveis por doenças como HIV, caxumba, febre amarela e vários outros, fazem parte da classificação entre adenovírus, arbovírus e retrovírus. 
Os protozoários denominados eucariontes, unicelulares e heterotróficos, chegam a causar malária, doença de chagas e alguns mais, a sua classificação varia de acordo com a sua locomoção, entre ciliados, flagelados, rizópodes e esporozoários. 
Os fungos podem chegar a ser vistos de forma macroscópica dependendo do tipo. Podem ser heterótrofos, eucariontes, unicelulares ou pluricelulares, são encontrados em diversos locais como no solo, na agua e utilizados na medicina, em produtos e até na alimentação, porém também podem ser parasitas e transmitir micose, candidíase, entre outros. 
As bactérias podem ser encontradas dentro de outros seres vivos, no ar, na água, no solo, em diferentes formas, nas quais temos cocos, bacilos, espirilos e algumas mais. Tem diversas funções, tanto como causadoras de doenças quanto em vitaminas e alimentos (Lopes, 2018) 
CENTRO UNIVERSITÁRIO DO NORTE 
ESCOLA DE SAÚDE 
 	 	CURSO: BIOMEDICINA 
CENTRO UNIVERSITÁRIO DO NORTE 
ESCOLA DE SAÚDE 
 	 	CURSO: BIOMEDICINA 
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ESCOLA DE SAÚDE 
 	 	CURSO: BIOMEDICINA 
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1. Meios de cultura 
 
Os meios de cultura são preparações realizadas em laboratório que nela são contidos nutrientes para possibilitar o crescimento de determinados. Microrganismo. Existem diversos modelos e que apresentam diversas características como os fastidiosos que tem mais critérios para crescer, são separados de modo físico em líquido, sólido e semi-sólido, alguns chegam a suportar altas temperaturas, podem ser artificiais ou naturais. Podem ser enriquecidos, seletivos ou diferenciados. (ANVISA, .)
· Meio de cultura (procedimento) 
· Cada aluno realizou a preparação de um meio de cultura, no qual fiquei com o preparo do Trypticasein Soy Agar (TSA), que é utilizado para diversas bacteriologias e determinações de reações hemolíticas; 
· Cada meio de cultura tem um cálculo especifico de diluição para o seu preparo, o qual está presente no frasco com o material, como consta na imagem; 
· A preceptora pediu que fosse preparado 600ml do TSA, para saber a quantidade de material utilizado precisamos fazer o seguinte calculo: 
Para a preparação de 1litro da amostra precisamos de 40gramas do pó contido no frasco de TSA, porém queremos apenas 600ml, para isso calculamos 
40 – 1.000 1.000X = 40 X 600 1.000X = 24.000 X=24.000/1.000 X=24g 
 X - 600 
 Então para realizar a preparação de 600 ml de TSA precisamos de 24g do pó do meio de cultura. 
· Depois de realizado o cálculo pesamos o pó na balança, a qual primeiro taramos; 
· Utilizamos uma proveta ou vidraria graduada para dissolver o pó em 600ml de água destilada; 
· O procedimento é realizado adicionando o pó no recipiente com a água e homogeneizando; 
· Levamos a material á aquecedora, agitando suavemente constantemente, até que tudo seja dissolvido; 
· Depois levamos o material á autoclave por 15 minutos á 121°; 
· Enquanto o material fica na autoclave, separamos as placas na capela de fluxo laminar; 
· Quando sair da autoclave precisamos plaquear o TSA, fechando as placas apenas quando resfriadas. 
 
2. Técnicas de semeadura 
 
As técnicas de semeadura são estabelecidas de acordo com a finalidade do cultivo, porém, todas seguem um padrão, como as alças utilizadas para cultivo da amostra devem ser flambadas antes de depois do procedimento; O recipiente com a colônia deve ser aberto apenas dentro da capela e perto do bico de Bunsen; evitar deixar a tampa sobre a bancada e não perfurar ou rasgar o ágar. Entre as técnicas de semeadura temos: 
· Esgotamento no qual as colônias são isoladas na placa; 
· Estrias simples que apenas realiza o crescimento microbiano; 
· Spread plate que possibilita a contagem bacteriana;
· Picada que avalia a motilidade. (Câmara, 2013)
 
3. Técnicas de coloração 
 
 A coloração é realizada em lâmina para saber qual microrganismo o paciente tem presente e especificar a patologia, foram trabalhadas as técnicas de coloração de gram, Ziehl-Neelsen e Loeffer. 
· Método de Gram (procedimento) 
· O método de gram é o mais utilizado na microbiologia, que é simples e tem capacidade de apresentar a visualização morfotintorial das bactérias, onde no final do procedimento temos a coloração roxa para as 	baterias 	gram-positivas e 	coloração 	vermelha 	para as gram negativas. 
· Adicionamos 1 gota de solução salina na lâmina, então com auxilio da alça de platina coletamos do ágar uma pequena amostra de colônia de diluímos na lâmina; 
· Depois de seca adicionamos cristal violeta por 1 minuto; 
· Lavamos superficialmente e adicionamos lugol por 1 minuto; 
· Realizamos a lavagem novamente e adicionamos álcool etílico e esperamos 10 segundos, esperamos secar e levamos a lâmina para o microscópio. 
 
· Método de Ziehl-Neelsen 
· É utilizada para identificar bactérias do gênero mycobacterium 
· Depois da colônia ser diluída na lâmina e seca adicionamos um pdaço de papel toalha sobre a mesma; 
· Adicionamos fucsina por 5 minutos sobre a lâmina, que deve estar sobre o bico de Bunsen, lembrando que o papel não deve secar; 
· Depois dos 5 minutos adicionamos álcool acido por 1 minuto e logo realizamos a lavagem; 
· Por ultimo adicionamos contracorante azul de metileno por 2 minutos, esperamos seca elvamos para o microscópio. 
· Como resultado temos as células descoradas que são denominadas de álcool acido sensíveis e as coradas que são denomiadas de álcool acido resistentes. 
 
· Método Loeffer 
· Utilizado para identificar a morfologia bacteriana 
· Depois da colônia fixada na lâmina adicionamos o corante azul de metileno e deixamos agir por 2 minutos e lavamos com água. 
· Como resultado temos a visualização das estruturas. 
 
4. Antibiograma 
 
O antibiograma consiste em um teste para saber se determinado microorganismo é sensível ou não a padrões de antibióticos. 
· Antibiograma (procedimento) 
· Coletamos uma colônia da amostra e semeamos por uma placa de ágar mueller hinton; 
· Inserimos discos de papel que contem antibióticos em sua formação e incubamos; 
· Depois da incubação realizamos a leitura medindo os halos de inibição presentes na placa.