Avaliação laboratorial das proteínas

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MATERIAL APOIO PEDAGÓGICO
ANO LECTIVO 2022-2023 – 1º SEMESTRE
SIGLA /CURSO ACS ANÁLISES CLÍNICAS E SAÚDE PÚBLICA
ANO/TURNO 
CÓD./DISCIPLINA 423 BIOQ. CLINICA II
DATA DA PUBLCAÇÃO 20 / 10 /2022
OSVALDO R. UNDEMBE PAULINO PROF./NOME
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3º MANHÃ/TARDE 
Tena 2 
Avaliação laboratorial das proteínas 
SUMÁRIO (S): Nºs 2. 1 
- Proteínas Definição, função e composição 
- Principais Proteínas Plasmáticas
- Método Do Biuret.
- Princípio Do Método
- Técnica e Cálculo
- Espectrofotometría De Absorção
NOTA: Os presentes slides são destinados exclusivamente aos alunos do ISUPEKUIKUI II e a sua reprodução 
por qualquer meio é proibida, constituindo crime. 
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▪Albúmen – clara de ovo [albus = branco];
▪Tinha átomos de C, H, N, O e S;
▪Tinha estranha propriedade de coagular ao ser submetido a
aquecimento;
▪Verificaram que outras substâncias presentes no leite e no
sangue também coagulavam quando aquecidas;
▪Então decidiram chamar esses componentes de substâncias
albuminoides [semelhantes ao albúmen].
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Um pouco de história...
Entre os objetos de estudo dos cientistas no início do século XIX (...) Estava:
▪Estudos mais tarde acabaram por
concluir que essas substâncias estão
presentes em todos os seres vivos.
▪Em 1838, Gerardus Mulder chama
essas substâncias de PROTEÍNAS
[do grego Proteios = primeiro,
primitivo].
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Imagem: Amamentando uma criança / Fotografia: Ken 
Hammond / Source: USDA / Public Domain
Um pouco de história...
Definição
As proteínas compostos orgânicos de peso
molecular elevado, que consistem principalmente
em cadeias de alfa-aminoácidos unidas entre si por
enlaces peptídicos, e constituem um elemento
fundamental dos organismos vivos.
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Aminoácidos: os monômeros proteicos
Esquema da estrutura química básica de um aminoácido
Imagem: YassineMrabet / Estrutura 
geral de um aminoácido, em 12 de 
agosto de 2021 / Public Domain
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Nome Símbolo
Glicina Gly, Gli
Alanina Ala
Leucina Leu
Valina Val
Isoleucina Ile
Prolina Pro
Fenilalanina Phe ou Fen
Serina Ser
Treonina Thr, The
Cisteina Cys, Cis
Tirosina Tyr, Tir
Asparagina Asn
Glutamina Gln
Aspartato ou Ácido aspártico Asp
Glutamato ou Ácido glutâmico Glu
Arginina Arg
Lisina Lys, Lis
Histidina His
Triptofano Trp, Tri
Metionina Met
Aminoácidos
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tipos
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Ligação feita entre aminoácidos (aa) para formar peptídeos 
(2 a 5 aa), polipeptídeos (+5 aa) e proteínas (+50 aa).
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Ligação Péptica
Aminoácido 2Aminoácido 1
Duplo Peptídeo
Água
Ligação peptídica
•Contribuir para a formação integral do estudante,
estimulando-o a compreender os métodos utilizados
na dosagem de proteínas séricas.
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Objetivo
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Competencias 
O Estudante;
•Ser capaz de entender o funcionamento dos
espectrofotómetros, manipulação e realização de
exames, cálculos, interpretação, correlacionar e
compreender o processo fisiopatológico.
FUNÇÕES
1. Servem como componentes estruturais de células
(colágeno), biocatalizadores (enzimas),
2. Reguladoras do metabolismo (hormônios),
moléculas de transporte (hemoglobina, albumina),
3. Defesa e Protecção (anticorpos), e fatores da
coagulação
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FUNÇÕES
4. Genética: atuam se envolvendo com os ácidos
nucleicos para dar conformação. Ex: nucleoproteínas)
5. Contração: promovem os movimentos de
estruturas celulares, músculos. Ex: actina e miosina
3. Defesa e Protecção (anticorpos), e fatores da
coagulação
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1. Albumina (55%): Intervém no transporte de
substâncias e o equilíbrio hídrico.
PRINCIPAIS PROTEINAS PLASMATICAS
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2. Globulinas (40%): Inclui;
a-globulinas (proteína de resposta rápida),
b-globulinas (intervém transporte de moléculas)
g-globulinas (anticorpos).
3. Fibrinogénio. (40%)
PRINCIPIO DO MÉTODO DE BIURET.
As proteínas séricas reagem com sulfato de cobre no
meio alcalino (hidróxido de sódio) formando um
complexo colorido de cor violeta;
A intensidade da cor obtida é diretamente
proporcional à concentração de proteínas presentes
no soro.
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TÉCNICA
COMPONENTES BRANCO PADRÃO
AMOSTRA
CQ1 CQ2 PACIENTE
Agua destilada 20 μl --
Padrão
o Pool
20 μl
Soro
20 μl 20 μl 20 μl
Reactivo de Biuret 1000 μl 1000 μl 1000 μl 1000 μl 1000 μl
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VALORES DE REFERÊNCIA 
VALORES DE REFERÊNCIA: 60 a 80 g/L
NOTA: O complexo colorido do Biuret alcança
sua máxima intensidade depois dos 20 minutos e
segue sendo estável durante 1 hora.
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1. É o método de análise óptica mais usada nas
investigações biológicas.
2. O espectrofotómetro é um instrumento que
permite comparar a radiação absorvida ou
transmitida por uma solução que contém uma
quantidade desconhecida de soluto, e uma que
contém uma quantidade conhecida da mesma
substância.
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORÇÃO
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•São as Leis do Beer e Lambert, as quais se 
complementam e fundamentam no fenômeno da 
fotometría.
A Lei de Lambert expresa: Absorção da luz é 
directamente proporcional a espessura de corpo.
A Lei de Beer expresa: Absorcção da luz é 
directamente proporcional a concentração da 
substancia
LEIS QUE REGEM A 
ESPECTROFOTOMETRÍA
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O princípio básico de quase todos os
métodos apoiados na Lei de Lamber-Beer, consiste em
que:
❑ A absorção da energia radiante de uma longitude de
onda determinada por uma solução a investigar em uma
ou varios calibradores, é directamente proporcional a
concentração da substância
❑ Por isso a transmissão da luz é inversamente
proporcional a espessura e concentração.
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É medida mediante a fórmula:
CP x AM AM
CM = ----------------- Ou CM = CP x -------------
AP AP
CM = [ ] da amostra
CP = [ ] do patrão
AM = absorvância da amostra, 
AP = absorvância do patrão
Lei do Lambert-Beer 
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1. Fotocolorímetros: Denominam-se assim os
equipamentos que empregam filtros para a
dispersão da luz
2. Espectrofotómetros: São os que empregam para a
dispersão da luz um prisma ou uma rede de
difração.
Tipos de equipamentos
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Esquema de um fotómetro
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1- Fonte de energia radiante (luminosa)
2- Seletor de bandas (Sistema Monocromador).
3- Detector.
4- Elementos associados.
5- Galvanômetro
Componentes básicos de uma 
equipamento de medição
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 Empregam-se lâmpadas de : 
1. Wolfromio →W (zona visíveis: de 400 – 800 nm)
2. Deuterio → D2 (zona UV: 100 – 400 nm)
3. Vapor de Hg 
1- Fonte de energía radiante
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1. Filtros de absorção ou de interferência 
2. Prismas ou rede de difração
1. Porta cubetas
2. Cubetas para as amostras
3. Lentes.
4. Espelhos
5. Diafragmas
2 . Sistema monocromador
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3 . Elementos associados
Filtros de absorção 
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“Estudar é encontrar 
no conhecimento a 
resposta para as nossas 
perguntas !”
Trabalho independente
1. Rever o metabolismo das proteínas 
2. Mencionar os métodos de determinação
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