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Rev. Bras. Pl. Med., Botucatu, v.9, n.3, p.76-81, 2007.
Recebido para publicação em 06/12/2005
Aceito para publicação em 04/07/2006
Investigação do efeito hipolipemiante do extrato aquoso de folhas de alcachofra
(Cynara scolymus L.) em associação à atividade física intensa
SANTOS, T.M.; PEREIRA, L.F.; ELIFIO-ESPOSITO, S.L.*
Laboratório de Fisiologia Animal – CCBS - Pontifícia Universidade Católica do Paraná. R. Imaculada Conceição,
1155. CEP 81215-901, Curitiba, Paraná, Brasil. * Autor para correspondência: selene.e@pucpr.br
RESUMO: O estudo consistiu numa análise das propriedades hipolipemiantes e da redução de
gordura corporal em ratos submetidos ao tratamento diário com a infusão de folhas secas de
alcachofra (ALE), ofertada na dose de 250 mg kg-1. Foram utilizados 40 ratos machos, compondo
quatro grupos experimentais: controle; ingestão da infusão de alcachofra (ALE); exercício físico
na forma de natação (EX. FÍS.) e ingestão de alcachofra associada ao exercício físico (EX. FÍS.
+ ALE). Para as análises bioquímicas foram analisados colesterol total, colesterol HDL, colesterol
LDL, e triglicerídeos plasmáticos. Após um mês de tratamento, os animais foram sacrificados e
retiradas amostras de pele e intestino delgado para análises histológicas. Demonstrou-se que os
valores de colesterol total, LDL e triglicerídeos não apresentaram diferenças estatisticamente
significativas nos grupos analisados. Houve, porém, decréscimo significativo nas taxas de colesterol
HDL no grupo EX. FÍS. + ALE (36,3 ± 5,9 mg dL-1) em comparação ao grupo controle (45,6 ± 4,8
mg dL-1). Análises morfométricas do tecido adiposo subcutâneo mostraram redução significativa
para todos os grupos (600-800 pixels) quando comparados ao grupo controle (1100 pixels),
representando efeitos satisfatórios na diminuição da camada adiposa. Entretanto, não se
observaram alterações na morfologia das células que compõem o intestino delgado. Os resultados
apresentados vão de encontro com o apresentado por outros autores e discute a determinação
da dose adequada para obtenção de efeitos sistêmicos e locais
Palavras-chave: Cynara scolymus, Asteraceae, medicamentos fitoterápicos
ABSTRACT: Investigation of the hypolipemiant of the aqueous extract of leaves of
alcachofra ( Cynara scolymus L.) in association to the intense physical activity. The present
study showed an analysis of the hypolipimidemic properties of artichoke infusion (ALE) and its
effect on reducing body fat in mice. An infusion of dry leaves of artichoke were prepared and
offered daily to the animals (250 mg kg-1). Forty male mice were used, comprising four experimental
groups as follows: control; ingestion of the artichoke infusion (ALE); physical activity in the swimming
form (EX. FÍS.) and artichoke ingestion associated to the physical activity (EX. FÍS. + ALE). For
biochemical analyses plasmatic total cholesterol, HDLc, LDLc, and triglycerides were measured.
After a month of treatment, the animals were sacrificed and skin and small intestine samples
were taken for histopatological analyses. The increment of body mass, biochemical and histological
studies were analyzed statistically (ANOVA p = 0,05). Results showed that ALE had no effect on
total cholesterol, HDL and triglycerides levels. There was, even so, significant effect on HDLc
rates for the group EX.FÍS. + ALE (36.3 ± 5.9 mg dL-1) in comparison to control group (45.6 ± 4.8
mg dL-1). Morphometric analyses of the skin fatty tissue presented significant reduction for all
experimental groups (600-800 pixels) when compared to control (1100 pixels). However, alterations
were not observed in the morphology of the small intestine cells. The presented results suggest
that further studies are needed using variations of dose and time of ALE treatment for reduction of
corporal fats and decrease of plasmatic lipids.
Key words: Cynara scolymus, Asteraceae, phytotherapic drugs
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INTRODUÇÃO
As propriedades terapêuticas das folhas de
alcachofra são conhecidas desde tempos antigos
(Noldin et al., 2003). Dos seus principios ativos foram
identificados diversos metabólitos secundários tais como
grosheimina, ácido criptoclorogênico, flavonóides, ácido
cafeoilquínico, ácido clorogênico, cinarina, luteolina,
glicosídeos, lactonas sesquiterpênicas, entre outros
(Zhu et al., 2000; Gebhardt, 2001; Llorach et al., 2002;
Fritsche et al., 2002; Speroni et al., 2003; Shimoda
et al., 2003; Li et al., 2004; Wittemer et al., 2005). O
extrato das folhas de alcachofra (ALE) tem sido citado
pela medicina popular para o tratamento de desordens
digestivas e circulatórias pela sua potencial ação
como antioxidante e redutor de colesterol plasmático
(Gebhardt & Fausel, 1997; Pérez-Garcia et al., 2000;
Saénz-Rodriguez et al., 2002; Zapolska-Downar et
al., 2002). Devido às suas aplicações para a redução
de lipídios plasmáticos o ALE tem sido também
indicado para redução de massa corporal, como
coadjuvante em regimes de emagrecimento.
A maioria dos estudos citados utiliza plantas
cultivadas na Europa que podem apresentar grande
variabilidade na composição dos princípios ativos
devido a fatores ambientais diversos. Alta variabilidade
também se apresenta nas doses recomendadas para
cada tratamento por cada um dos autores.
O presente estudo teve como objetivos
investigar os efeitos da ingestão da infusão das folhas
secas de alcachofra (ALE) sobre os níveis de lipídeos
plasmático e subcutâneo em ratos, quando
administrada como única forma de tratamento ou em
associação com atividade física intensa. Optou-se
por investigar o efeito de folhas comercializadas em
Curitiba, Região Sul do Brasil, por estar presente em
preparações fitoterápicas da população local,
buscando subsídios maiores para seu uso na
complementação de dietas hipolipemiantes.
MATERIAL E MÉTODO
Obtenção do Extrato das Folhas Secas
de Alcachofra (ALE). A alcachofra, Cynara scolymus
Linné, cultivada no Brasil, trata-se de uma planta
pertencente à família ASTERACEAE, que compreende
cerca de 920 gêneros com aproximadamente 19 mil
espécies, cujos hábitos são muito variados (Noldin
et al., 2003; Santos et al., 2003). Utilizou-se para
este estudo folhas de C. scolymus, oriundas do
Mercado Municipal de Curitiba.
A preparação do extrato aquoso seguiu
método descrito por Santos et al. (2003): 15 gramas
das folhas foram adicionados a 200 mL de água
fervente. Após 15 minutos, o infuso foi filtrado. Este
extrato foi diluído 20 vezes para fornecimento aos
animais, durante 30 dias. Esta dose corresponde, no
adulto, a 320 mg, 4 a 6 vezes ao dia, por no mínimo
de 6 semanas.
Grupos experimentais . Quarenta ratos
machos, Rattus norwergicus norwergius, com 3
semanas de vida, pesando inicialmente entre 61 ± 34
g, foram distribuídos, aleatoriamente, compondo
quatro grupos experimentais (n=10). Nas primeiras
três semanas todos os grupos recebem uma mistura
hipercalórica composta por preparado especial de
milho, semente de girassol e aveia na proporção de
3:1:1 (Santos et al. 2003) além, da ração padrão para
roedores (Nuvital, Curitiba) envolta em banha de porco
derretida em fervura. Da quarta à sétima semana os
grupos passaram a receber tratamento específico
conforme mostrado na Tabela 1. Ao longo de todo o
procedimento experimental o incremento da massa
corporal foi monitorado.
TABELA 1. Planejamento dos grupos experimentais.
Exercício Físico Intenso . Os animais foram
submetidos à prática de natação por 45 minutos, três
dias na semana (López-Molina et al., 1996; Santos et
al., 2003). Foram identificados com coleira contendo
pesos de chumbo de, aproximadamente, 5% da
massa corporal dos mesmos, sendo retirada ao
término de cada sessão.
Análise Bioquímica. O sangue total foi
retirado por punção cardíaca e o soro destinado às
dosagens de colesterol total, as sub-frações HDL e
LDL e os triglicérides séricos. As amostras foram
analisadas por testes fotométricos em analisador
Bayer Advia® 1650 no Laboratório de Análises
Bioquímicas do Hospital deClínicas da Universidade
Federal do Paraná.
Análise Histológica . Após a punção
cardíaca os animais anestesiados foram sacrificados
pela inalação de éter. Seus órgãos foram coletados e
fixados em formalina 10%. Transcorrido o período
mínimo de 24 horas de fixação, as peças foram
seccionadas transversalmente com estilete,
colocadas em caixas plásticas e novamente em
formalina 10% por 12 horas. As peças foram
transferidas ao Histotécnico, seguindo-se os
procedimentos de desidratação, diafanização e
impregnação em parafina. Fez-se então a confecção
dos blocos de parafina que foram cortadas em navalha
de aço, obtendo-se cortes de 5 �m de espessura.
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Por fim, todas as lâminas foram coradas com
Hematoxilina-Eosina (HE). A análise quantitativa das
diferenças entre os tecidos analisados foi feita através
de Microscopia de luz e Programa Image-Pro Plus
4.5.
Análise Estatística . As comparações
múltiplas entre amostras de tamanhos diferentes
foram realizadas pelo teste de Tukey enquanto que
os pressupostos de normalidade e homogeneidade
de variância para cada uma das variáveis por grupo
formam determinados pelo teste de Cochran
(Salvatore, 1982; Werkema & Aguiar, 1996), em todos
os casos o nível de significância foi pré-fixado em
5%.
RESULTADO E DISCUSSÃO
A Figura 1 mostra o incremento de massa corporal
dos animais no decorrer de todo o procedimento
experimental. Verifica-se um leve decréscimo da massa
dos animais dos grupos experimentais em relação ao grupo
controle e redução aparentemente mais acentuada para o
grupo de animais tratados com ALE e submetidos á
atividade física (EX.FÍS+ALE). Entretanto a análise
estatística indicou diferença não significativa entre os grupos
para p<0,05 e, desta forma, que nenhum tratamento foi
eficaz em provocar qualquer alteração sobre o ganho padrão
de massa corporal.
Desde início do período de treinamento físico até
o término experimental, não se observou aumento
significativo no consumo alimentar dos animais submetidos
à natação (dados não mostrados).
FIGURA 1. Análise do ganho relativo de massa corporal ao longo das sete semanas comparado aos valores
iniciais do experimento. Valores expressados em grama representando média, e desvio padrão. Valores para as 7
semanas apresentam diferença estatisticamente não significativa (ANOVA p<0,05).
Supõe-se então que o estresse físico sofrido
pelos animais durante o treinamento físico tenha
elevado a taxa metabólica, não alterando a massa
corporal de forma significativa. Resultados
semelhantes foram encontrados nos estudos de
Santos et al. (2003) e de Ballor et al. (1990) que
submeteram os animais à atividade física com graus
variados de intensidade, mostrando que a intensidade
da atividade não altera a massa corporal dos
indivíduos. Silva et al. (1999) observaram que não
houve diferença quanto à ingestão calórica entre os
animais exercitados e os sedentários. Justifica-se
neste estudo que o exercício físico regular possa ter
favorecido a manutenção de equilíbrio entre gasto e a
ingestão energética, restringindo o balanço energético
positivo durante o experimento. Sabia et al. (2004)
verificaram que indivíduos submetidos à atividade
física três vezes por semana, durante 16 semanas
por 20 a 40 minutos, não tiveram seus pesos corporais
significativamente alterados comparados aos valores
iniciais do estudo.
O perfil do tecido adiposo em ratos após a
conjuntivo, nesta camada nos animais dos grupos
ALE; EX.FÍS.e EX.FÍS.+ALE. Este dado assemelha-
se ao encontrado com Powers & Howley (2000) que
afirmam que o uso do exercício como parte de um
programa de perda de peso, pode servir para manter
uma maior massa corporal magra, ou seja, reduzir a
camada adiposa, resultando numa gordura ideal
mesmo sem apresentar uma alteração da massa
corporal.ingestão de ALE, bem como a influência do
exercício físico na modificação do tamanho das
células foi analisado por microscopia óptica acoplada
a um sistema computadorizado para morfometria
(Figura 2). Observa-se que os grupos experimentais
tiveram uma redução estatisticamente significativa na
espessura da camada de células adiposas em
relação ao grupo controle. Esta redução foi mais
expressiva nos animais que ingeriram infusão de
alcachofra como único tratamento (ALE) e no grupo
EX.FÍS+ALE. Verifica-se ainda que além da redução
da camada adiposa, ocorre uma nítida infiltração do
tecido
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FIGURA 2. Fotomicrografia do tecido adiposo unilocular. Corte da parte abdominal da pele de ratos dos grupos
CONT. (A), ALE (B), EX. FÍS.(C) e EX. FÍS.+ ALE (D). TA: Camada de tecido adiposo unilocular; TC: Tecido
Conjuntivo; TM: Tecido Muscular. Coloração hematoxilina-eosina 4x. Redução estatisticamente significativa em
relação aos grupos experimentais (p<0,05).
Outra propriedade atribuída ao extrato de
alcachofra é promoção da melhora das funções
intestinais por promover maior lubrificação intestinal,
podendo até mesmo levar à diarréia quando ingerida
em excesso (Sheneider, 2005). O muco viscoso e
elástico que protege e lubrifica a superfície do epitélio
intestinal, é secretado por células epiteliais em toda
a extensão do trato gastrointestinal, pelas glândulas
de Brunner no duodeno e pelas células caliciformes
na mucosa do intestino delgado (Junqueira &
Carneiro, 1999). No presente trabalho nenhuma
alteração decorrente da ingestão da infusão de
alcachofra foi detectada nas células intestinais,
observadas por microscopia óptica. No grupo controle,
o epitélio de revestimento e as células caliciformes
se apresentam de forma desejável, assim como, nos
demais grupos (dados não mostrados).
Tem sido proposto que o ALE poderia reduzir
as taxas de triglicerídeos, colesterol total e LDL, além
de aumentar HDL (Fritsche et al., 2002), principalmente
pela ação de metabólitos secundários como o ácido
clorogênico e cinarina (derivado do ácido
cafeoilquínico) (Papolska-Downar, 2002). No presente
trabalho foram encontrados resultados antagônicos
aos descritos (Tabela 2). Após 56 dias de experimento
verifica-se que os valores de colesterol total, LDL e
triglicerídeos não apresentaram diferenças
estatisticamente significativas entre os grupos
analisados, além de redução significativa nos níveis
de colesterol-HDL no grupo EX.FÍS.+ALE.
TABELA 2. Colesterol Total, HDL, LDL e Triglicerídios séricos em ratos machos (Wistar). Valores expressos em
mg/dL representando média ± o desvio padrão. *Valor estatisticamente significativo em relação aos grupos CONT
e EX.FÍS.# (ANOVA p<0,05).
CONCLUSÃO
Recentes pesquisas com o extrato de
alcachofra nas mais variadas concentrações, indicam
através de estudos clínicos e pré-clínicos, que a
infusão das folhas secas de Cynara scolymus L. (ALE)
apresenta ação hepatoprotetora, antioxidante,
colerética, colagoga, antidispéptica, redutora de
colesterol, estimulante do sistema hepatobiliar. É
ainda utilizada contra náuseas, indigestão,
aterosclerose, ação diurética, antibacteriana,
antifúngica, e, por possuir baixo valor calórico, ser
rico em fibras e ferro, é indicado em dietas
hipocalóricas como auxiliador em regimes de
emagrecimento. Neste trabalho, utilizou-se a ingestão
de ALE, a prática de exercício físico e a junção dos
dois procedimentos como uma proposta para se
investigar as ações destes tratamentos na perda de
massa corporal e na alteração das taxas dos lipídios
plasmáticos.
Quando ALE foi administrado na dose
recomendada pela medicina popular (250 mg kg-1)
(Sheneider, 2005; Accorsi & Stipp, 1983; Botsari,
1998) em grupos de ratos que praticavam exercício
físico ou que ingeriam a infusão de forma isolada,
não se constatou alterações na massa corporal
destes animais em comparação ao grupo controle. A
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alcachofra isolada e sua associação com a prática
de exercício físico demonstraram ser importantes na
redução de tecido adiposo subcutâneo,assim como
a prática de exercício físico de forma isolada, quando
comparado ao grupo controle, sendo mais expressivo
nos animais que ingeriram ALE como único
tratamento. Além da redução da camada adiposa,
observou-se uma infiltração de tecido conjuntivo na
camada adiposa dos grupos que praticaram atividade
física e ingeriram infusão de alcachofra. Ao
analisarmos o epitélio de revestimento do intestino
delgado e suas células caliciformes, nenhuma
alteração nas estruturas celulares decorrente da
prática de exercício ou da ingestão de ALE foi
observada. A ingestão de ALE não foi eficaz em
provocar aumento significativo nos níveis sangüíneos
de colesterol HDL e decréscimo dos níveis de
triglicerídeos, colesterol LDL e colesterol total.
Com base nos resultados apresentados,
sugere-se que outros estudos sejam realizados
apresentando-se novas dosagens e diferentes
períodos de tratamento, para que se possam
estabelecer condições para sua utilização por seres
humanos para a redução de gorduras corporais e
diminuição de lipídios plasmáticos.
AGRADECIMENTO
Ao Curso de Pós Graduação em Fisiologia
Humana e da Nutrição da Pontifícia Universidade
Católica do Paraná PUCPR pelo fornecimento dos
animais, ao Laboratório de Patologia Experimental
da PUCPR pela confecção das lâminas e ao Biotério
da PUCPR pela manutenção dos animais.
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